王宗立
- 作品数：17 被引量：79H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 表达反义单核细胞趋化蛋白-1的重组逆转录病毒对家兔动脉平滑肌单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响被引量：12
- 1999年
- 为研究反义单核细胞趋化蛋白－１ 转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用，首先构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－ １ 基因的逆转录病毒重组体，并观察它在培养的细胞中的表达。将家兔单核细胞趋化蛋白－ １ ｃＤＮＡ 反向插入到ｐＬＮＣＸ，构成ＬＮＣＸ－ａｎｔｉ－ ＭＣＰ－１ 重组病毒质粒。再将重组质粒转染φ－２ 细胞，继以φ－ ２ 细胞产生的病毒上清感染ＰＡ３１７细胞，取得Ｇ４１８ＰＡ３１７ 抗细胞克隆。上述细胞经扩增培养，收集病毒上清并感染ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞后进行检测。结果发现，病毒的滴度为５．６×１０７ ＣＦＵＬ，感染的ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中有重组病毒的整合。重组病毒感染培养的家兔动脉平滑肌细胞后，用聚合酶链反应检测发现，感染的平滑肌细胞基因组ＤＮＡ中有重组病毒整合；ＲＮＡｓｌｏｔ 杂交结果显示，感染的平滑肌细胞中有反义单核细胞趋化蛋白－１ 的表达，与未感染的平滑肌细胞相比，感染的平滑肌细胞中单核细胞趋化蛋白－ １ ｍＲＮＡ 的表达明显受到抑制。结果提示，反义单核细胞趋化蛋白－ １ 逆转录病毒表达载体在培养的动脉平滑肌中能表达反义基因并抑制靶基因的表达。
- 李福生王宗立许漫乔绘红刘佩毛张华任国锋赵三妹佘铭鹏
- 关键词：MCP-1反义RNA逆转录病毒
- 高密度脂蛋白及载脂蛋白A_1防止实验性动脉粥样硬化斑块形成
- 1992年
- 根据临床流行病学调查和实验研究,已明确高密度脂蛋白（HDL）和缺血性心脏病（动脉粥样硬化）的发病率呈负相关。动脉粥样硬化的发生和血清HDL-胆固醇的量降低有密切关系,HDL是一保护因子,可防止动脉粥样斑块形成。HDL是一种脂质和蛋白的复合体,组成它的主要载脂蛋白有apoA1, A2,A4,apoB,apoC和apoE等,其中以apoA1所占的比例最大,约为65％。体外细胞实验表明,HDL抑制低密度脂蛋白（动脉粥样硬化的主要致病因子）穿过动脉内膜。
- 佘铭鹏夏人仪冉碧芳王宗立刘连生赵三妹谷素敏梁平刘佩毛吴时丽张华
- 关键词：载脂蛋白高密度脂蛋白主动脉内膜APOEAPOB过氧化酶
- 载脂蛋白AI(apoAI)抑制动脉粥样斑块形成
- 佘铭鹏夏人仪王宗立李健斋李义和李莹梁平陈保生冉碧芳
- HDL重要的功能是参与胆固醇转运特别是胆固醇逆向转运，中起主要作用的是apoA-I及apoAE，可能还有apoA-IV.结合我国国情目前检测AS的最可信任的指标是血浆内HDL-C及apoA-I的改变，我们长期以来从HDL...
- 关键词：
- 关键词：载脂蛋白动脉粥样斑块基因重组
- 反义MCP-1转染兔平滑肌细胞及对其生长的影响被引量：8
- 1999年
- 构建逆转录病毒载体反义单核细胞趋化蛋白1（LUCX-Anti-MCP－1）表达质粒，利用阳离子脂质体（Lipofectamine）将反义MCP－1导入体外培养的平滑肌细胞，通过PCR、Northern杂交检测外源基因的转染及其mRNA表达情况。应用3H胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）掺入法了解反义MCP－1基因对细胞生长的影响．结果显示：Lipofectamine可以成功的将反义MCP－1基因导入体外培养的主动脉平滑肌细胞中，并实现外源基因的转录表达。且反义MCP－1基因对体外培养的平滑肌细胞生长没有影响。
- 李拥军管珩刘佩毛许漫赵三妹王宗立余铭鹏
- 关键词：基因转染反义基因平滑肌细胞阳离子脂质体
- Efect of NF-κB on the induction of PDGF-B transcription by angiotensin Ⅱin the ECV304 cell line被引量：2
- 2002年
- 目的 研究血管紧张素Ⅱ对ECV30 4细胞中转录因子NF κB的作用和对PDGF B基因表达的影响。方法 采用电泳迁移率移动分析法 (EMSA)和免疫组化方法 ,包括共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术 ;荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的方法及Northern印迹法研究血管紧张素Ⅱ激活NF κB的信号传递路径和检测了血管紧张素Ⅱ刺激前后PDGF BmRNA的表达水平。结果 血管紧张素Ⅱ刺激后 ,在ECV30 4细胞内有NF κB的激活及核易位过程 ,应用免疫荧光共聚焦显微镜 ,免疫电镜及Northern印迹等方法均可观察到PDGF B或其基因表达增高。变异型激酶质粒IKKα KM ,IKKβ KM及NIK KM可抑制经AngⅡ刺激的转染细胞内与NF κB启动相连的荧光素酶的表达。结论 AngⅡ可激活胞浆内NF κB并出现核易位 ,激酶NIK、IKKα 和IKKβ 参与了此信号传递路径。血管紧张素Ⅱ刺激后PDGF B链mRNA水平增高。
- 李皓尹鸿操张华曹心宜王宗立佘铭鹏
- 关键词：NF-ΚBPDGF-B
- 用于体腔润滑的人造粘液制造方法
- 一种用于体腔润滑的人造粘液制造方法，按葡聚糖硫酸酯2～5%，聚乙二醇混合物2～4%，对羟基苯甲酸酯0.2%的重量配比将原料加入到95～100℃生理盐水中，搅拌均匀。制造出的人造粘液用于人体粘膜腔道及各种插入物的润滑，润滑...
- 王宗立
- 文献传递
- 高脂血清对易感和不易感动脉粥样硬化动物的动脉平滑肌细胞生长的影响被引量：2
- 1989年
- 体外培养家兔和树鼩为主动咏平滑肌细胞,分别观察各自的高脂血清对平滑肌细胞生长的影构,以~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入细胞DNA,用液体闪烁计数器计数。结果表明:兔高脂血清对兔平滑肌细胞生长有显著的增殖作用,而树鼩高脂血清对树鼩平滑肌细胞的生长未见显著的促进增生作用。
- 夏人仪赵三妹蔡春波刘佩毛冉碧芳陶保卫王宗立佘铭鹏
- 关键词：高脂血清动脉粥样硬化平滑肌细胞
- 树鼩高密度脂蛋白亚类及其载脂蛋白构成与抗动脉粥样硬化的关系被引量：2
- 1993年
- 树鼩HDL_3和HDL_2共占血浆总脂蛋白的90%以上,是转运血浆胆固醇的主要脂蛋白,其HDL_2中载脂蛋白构成独特,琼脂糖电泳显示为β脂蛋白,可能在转运脂质中起特殊作用。喂高胆固醇饲料后,血浆HDL_3及HDL_2浓度明显增加,HDL_2中的apo E比例也显著增加,高酪蛋白饲料则能抑制高胆固醇对HDL的作用,并使HDL_3中出现一新的MW22.4kD蛋白成分。这些改变有利于HDL加快转运胆固醇至肝脏分解代谢。
- 梁平谷素敏王宗立夏人仪佘铭鹏
- 关键词：高密度脂蛋白胆固醇动脉粥样硬化
- 反义单核细胞趋化蛋白-1基因抑制移植静脉内膜增殖的实验研究被引量：9
- 2001年
- 目的 探讨反义单核细胞超化蛋白 1(MCP 1)转基因表达对移植静脉术后局部血管MCP 1mRNA表达、单核巨噬细胞浸润及与其相关的内膜增生的影响。 方法 建立 14只兔颈外静脉 颈总动脉移植模型 ,并随机分为基因治疗组、载体对照组和空白对照组。应用阳离子脂质体介导 ,将反义MCP 1基因通过局部定位转染的方法转染至移植静脉段。RNA斑点杂交 ,检测反义基因转染、表达情况 ;病理形态学观察移植血管新生内膜增生以及血管壁中单核巨噬细胞粘附、浸润的情况。结果 RNA斑点杂交提示 :基因治疗组中有反义MCP 1基因表达。移植静脉自身MCP 1mRNA的表达受到明显抑制 (降低 38% ,P <0 0 5 )。相应的单核巨噬细胞在移植静脉中的粘附、浸润明显减少(减少 34% ,P <0 0 5 )。内膜增生程度显著减轻 (减轻 49% ,P <0 0 5 )。 结论 反义MCP 1局部移植静脉内转基因表达 ,可抑制移植静脉自身MCP 1的表达 ,抑制单核巨噬细胞的浸润 。
- 李拥军管珩刘昌伟王宗立
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1静脉移植反义基因内膜增殖
- 用于体腔润滑的人造粘液制造方法
- 一种用于体腔润滑的人造粘液制造方法，按葡聚糖硫酸酯2～5％，聚乙二醇混合物2～4％，对羟基苯甲酸酯0.2％的重量配比将原料加入到95～100℃生理盐水中，搅拌均匀。制造出的人造粘液用于人体粘膜腔道及各种插入物的润滑，润滑...
- 王宗立
- 文献传递
