王玉芹
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 棉铃虫核型多角体病毒orf86基因的原核表达、抗体制备与免疫印迹检测被引量：5
- 2010年
- 棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)orf86是一个功能未知的基因。从HearNPV基因组中通过PCR得到orf86基因编码序列,将其构建于原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21获得融合表达产物。融合表达蛋白经分离纯化后免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体。用ELISA测定结果表明,ORF86多克隆抗体效价为1:5.12×105。利用该抗体Western印迹检测HearNPV感染的HZAM1细胞,检测到一个36kD的目的蛋白条带,与ORF86预期大小一致。结果表明该多抗可用于对orf86编码蛋白的检测和相关功能研究。
- 李坚刘强王玉芹项林平王敦
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 迟眼蕈蚊抗菌肽BhSGAMP-1-S在大肠杆菌中的优化表达及其活性分析(英文)被引量：3
- 2010年
- 【目的】BhSGAMP-1 是迟眼蕈蚊唾液腺抗菌肽,为了能够更好的了解其分子特性,我们将其表达、纯化并进行了活性测定。【方法】依据大肠杆菌稀有密码子设计并合成了抗菌肽基因 BhSGAMP-1-S,以 pMAL-c2X 作为表达载体在大肠杆菌 TB1 中进行融合表达,融合蛋白通过麦芽糖亲和层析柱进行纯化,获得的融合蛋白经肠激酶切割后,混合物通过分子筛凝胶层析和反相高效液相色谱来获得单体重组抗菌肽 BhSGAMP-1-S,对获得的抗菌肽进行活性测定。【结果】在最优的表达条件下融合蛋白以可溶的形式表达,100 mL 诱导菌液经多步纯化后可得 0. 38 mg 的重组抗菌肽 BhSGAMP-1-S,抑菌活性测定表明所获得的抗菌肽对部分测试革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌有较强的抑菌活性。【结论】本研究第一次成功的在大肠杆菌中诱导表达了修饰合成的抗菌肽 BhSGAMP-1-S,纯化后的抗菌肽具有很好的抑菌活性,这为进一步研究和应用奠定了基础。
- 王珏高秋荣刘强项林平王玉芹王敦
- 关键词：抗菌肽迟眼蕈蚊纯化可溶性表达
- 一种增强型CpGV病毒制剂及其制备方法
- 本发明公开的一种增强型CpGV病毒制剂，按照体积百分比，由以下组分组成：活性蛋白M2R溶液：6％-30％，CpGV悬浮液：0.5％-1.5％，Tween-80乳化剂：1％-3％，其余为1×PBS缓冲液，以上各组分的体积百...
- 王敦张雅林李坚王玉芹徐红星郑春寒董琨徐利
- 一种增强型CpGV病毒制剂及其制备方法
- 本发明公开的一种增强型CpGV病毒制剂，按照体积百分比，由以下组分组成：活性蛋白M2R溶液：6％-30％，CpGV悬浮液：0.5％-1.5％，Tween-80乳化剂：1％-3％，其余为1×PBS缓冲液，以上各组分的体积百...
- 王敦张雅林李坚王玉芹徐红星郑春寒董琨徐利
- 文献传递
- 蜘蛛毒素基因Ar1b的表达、活性分析与Ar1b重组HearNPV的构建
- 昆虫核型多角体病毒（NPV）属杆状病毒科,是无脊椎动物,尤其是鳞翅目昆虫的病原性天敌,在害虫种群的自然控制和维持生态平衡方面发挥着重要作用。棉铃虫Helicoverpa armigera核型多角体病毒Nucleopoly...
- 王玉芹
- 关键词：原核表达纯化活性分析HEARNPV
- 文献传递
