韦华
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：厦门大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 三种不同线虫种间rDNA-ITS-RFLP分析
- ＜正＞根结线虫属于线虫纲（Secernentea）,垫刃目（Tylenchida）,垫刃超科（Tylenchoidea）,根结线虫科（Meloidogynidae）。鼠蛲虫属于蛔虫目（Ascaridida）,尖尾线虫科（...
- 任芳杨玉荣韦华
- 关键词：根结线虫
- 文献传递
- 厦门市人体肠道线虫感染和宠物犬犬钩虫（Ancylostoma canium）的调查
- 目的为配合我们的基金课题,并为肠道线虫病的防治提供科学依据,我们对厦门市市郊部分幼儿圆开展了人体肠道线虫病的调查,以及厦门市宠物犬犬钩虫（Ancylostoma canium）的调查并获得犬钩虫实验材料,进行了人工感染实...
- 韦华杨玉荣
- 关键词：肠道线虫
- 文献传递
- 3种线虫rDNA-ITS2-RFLP分析被引量：1
- 2006年
- 目的爪哇根结线虫(Meloidogynejavanica)、鼠蛲虫(Enterobiussp·)和犬钩虫(Ancylostomacaninum)是来自不同种属的3种线虫,利用rDNA-ITS2-RFLP方法分析3种不同线虫种间多态性,为将来进一步发展以rDNA-ITS-RFLP分析为基础的土源性线虫的分子诊断方法建立基础。方法应用种间具有较为保守性的遗传区域-内转录间隔区,包括部分的5·8S序列、ITS2和28S的序列,以爪哇根结线虫、鼠蛲虫、犬钩虫3种不同种类线虫的基因组DNA为模板,设计特定引物用PCR扩增rDNA-ITS2+片段,用限制性内切酶HindⅢ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、PstⅠ、KpnⅠ和SalⅠ酶切PCR扩增产物进行RFLP分析。结果PCR扩增爪哇根结线虫、鼠蛲虫、犬钩虫得到的ITS2+片段大小分别为1000bp、1800bp、1800bp,用6种限制性内切酶酶切PCR扩增产物,共产生12条酶切片段。用限制性内切酶HindⅢ/EcoRⅠ,PstⅠ/EcoRⅠ,HindⅢ/PstⅠ双酶切爪哇根结线虫、鼠蛲虫和犬钩虫的rDNA-ITS2+的PCR扩增产物,除爪哇根结线虫外,鼠蛲虫和犬钩虫均可得到2条以上的RFLP片段。结论爪哇根结线虫、鼠蛲虫、犬钩虫rDNA-ITS-RFLP分析显示这3种不同线虫rDNA-ITS2+存在着种间多样性,其中爪哇根结线虫为植物寄生性线虫,而鼠蛲虫和犬钩虫均为动物寄生性线虫,说明rDNA-ITS2+-RFLP方法可用来作为判断线虫种间多样性以及诊断和区分不同线虫的有用依据。
- 任芳杨玉荣韦华
- 关键词：爪哇根结线虫
- 犬钩虫(Ancylostoma caninum)天冬氨酸蛋白酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的对犬钩虫(Ancylostomacaninum)天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行了克隆,鉴定,并在原核系统中进行表达。方法以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR法对犬钩虫天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行扩增,获得的AspcDNA产物克隆进pMD-18T载体,用PCR筛选阳性克隆。碱裂解法进行质粒提取,单、双酶切进行鉴定并测序。将测序正确的阳性克隆进行双酶切,构建到表达载体pET-32a中,将此重组质粒先转化到E.coliDH5a内,提取质粒,酶切鉴定阳性,再转化入表达宿主E.coliBL21(DE3)菌株内,对转化菌株用IPTG进行诱导培养。收集培养液,破菌、离心,上清进行SDS-PAGE,通过电转移将胶中蛋白转到硝酸纤维素膜上后进行免疫印迹分析。结果电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,所表达蛋白相对分子量为40kDa,抗体检测有特异条带大小为40kDa。结论成功进行了犬钩虫天冬氨酸蛋白酶Asp基因的克隆表达。
- 杨玉荣韦华
- 关键词：天冬氨酸蛋白酶克隆
- 宠物犬犬钩虫的调查及生活史各期形态观察被引量：8
- 2006年
- 目的犬钩虫(Ancylostoma canium)幼虫可以感染人体,但不能发育为成虫,仅引起皮肤幼虫移行症。方法采用饱和盐水漂浮法和涂片法检查钩虫卵;用"T"滤纸条培养犬钩蚴;皮肤感染和灌喂人工感染实验狗。感染后不同时间解剖狗,从狗小肠获取钩虫,镜下观察和拍照。结果厦门市30只宠物犬样本犬钩虫感染率为3.33%(1/30),蛔虫感染率为10.00%(3/30)。对犬钩虫生活史各期的形态进行观察。结论厦门市存在宠物犬犬钩虫感染,特别是农家狗的犬钩虫感染为多。
- 韦华杨玉荣
- 关键词：生活史
- 犬钩虫天冬氨酸蛋白酶和组织蛋白酶B基因的克隆、表达和鉴定
- 钩虫是重要的人兽共患寄生虫，寄生于人体可导致贫血，儿童感染钩虫后造成发育迟缓，为了解肠道线虫在儿童中的流行情况和开展儿童肠道线虫病的防治，我们于2004年7月至10月间进行了厦门市儿童肠道线虫感染调查。通过收集儿章粪便，...
- 韦华
- 关键词：天冬氨酸蛋白酶组织蛋白酶基因克隆肠道线虫感染
- 文献传递
- 犬钩虫(Ancylostoma caninum)不同发育时期蛋白质组分分析
- 2006年
- 为了解犬钩虫在不同发育时期蛋白质的表达情况,我们运用SDS-PAGE凝胶电泳对犬钩虫不同发育时期L3、L4和雌、雄虫的可溶性蛋白组分进行了分析,结果发现,L3期幼虫有22条蛋白带,L4期有17条蛋白带,雄虫有22条,雌虫有22条,各期既有共同的蛋白条带也有期特异性的蛋白条带。其中L3期蛋白条带较多,L3、L4期幼虫的蛋白条带和成虫的蛋白质条带有较大差别,而雄虫和雌虫之间差别很小.这可能与L3是感染期幼虫,需要分泌更多酶穿透宿主皮肤.对犬钩虫不同发育时期表达的蛋白进行分析,为进一步开展钩虫致病和期特异性抗原的免疫保护机制以及以抗原为基础的免疫学诊断研究奠定了基础.
- 韦华杨玉荣
- 关键词：蛋白质SDS-PAGE
- 犬钩虫(Ancylostoma caninure)天冬氨酸蛋白酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达与鉴定
- 目的:对犬钩虫(Ancyiostoma caninum)天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行了克隆,鉴定,并在原核系统中进行表达。方法: 以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR法对犬钩虫天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行扩增,获得的A...
- 韦华杨玉荣
- 关键词：天冬氨酸蛋白酶大肠杆菌
- 文献传递
