马丽
- 作品数：3 被引量：9H指数：1
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 短发夹结构RNA干扰新城疫病毒的增殖被引量：9
- 2007年
- 以新城疫病毒(NDV)NP基因为标靶,构建3个细胞内表达发夹样结构小干扰RNA(shRNA)的质粒载体,在鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚上进行了RNAi试验,筛选出一个有效抑制病毒复制的小分子ndv1.用阳离子脂质体转染试剂Silent-fect将ndv1转染CEF,以不相关shRNA质粒载体HK为阴性对照,4h后接种NDV,与对照相比,干涉组在病毒感染后3hNP基因的表达量降低2.3倍,6h降低21.1倍,9h降低9.8倍;ndv1能在48h内完全阻断NDV在CEF中的增殖,延缓病变出现时间,减轻病变程度.将Silent-fect-ndv1混合物与NDV同时注入10日龄SPF鸡胚绒毛尿囊腔,能使105ELD50NDV感染后17h鸡胚尿囊液中病毒增殖量减少94.4%,使106ELD50 NDV感染后17h鸡胚尿囊液中病毒增殖量减少62.5%.实验结果证实,在CEF中存在RNAi机制,抑制ND VNP基因的表达能有效阻断该病毒增殖,说明NP基因在NDV复制过程中起重要作用.实验结果为进一步利用RNAi技术在CEF和鸡胚中研究病毒基因组功能及筛选抗病毒小分子奠定了基础.
- 岳华汤承李定霏傅安静马丽
- 关键词：RNA干涉新城疫病毒鸡胚成纤维细胞鸡胚
- shRNAs干涉新城疫病毒在鸡胚中的增殖
- 用pGenesil-3 vector,构建了针对新城疫病毒NP基因的3个短发夹RNA表达载体,将其与转染试剂SiLentFectTM Lipid Reagent按1:3比例混合均匀后与新城疫病毒同时经绒毛尿囊腔接种于鸡胚...
- 李定霏岳华马丽
- 关键词：短发夹RNA
- shRNAs干涉新城疫病毒在鸡胚中的增殖
- 本研究用pGenesil-3 vector,构建了针对新城疫病毒NP基因的3个短发夹RNA表达载体,将其与转染试剂SiLentFectTM Lipid Reagent按1:3比例混合均匀后与新城疫病毒同时经绒毛尿囊腔接种...
- 李定霏岳华马丽
- 关键词：新城疫病毒RNA干涉短发夹RNA鸡胚病毒增殖
- 文献传递
