王春荣
- 作品数：12 被引量：27H指数：3
- 供职机构：郑州大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 冠心病患者左室纵轴力学变化的临床研究
- 秦石成秦兆冰王珏王亮卿王春荣张克敏汤五洲
- 该项研究通过对二尖瓣环运动参数的检测，探讨了冠病患者左心纵铀力学的变化特点。在国内率先系统的多位点的讨反映左室纵轴力学变化的二尖辨环运动参数进行检测，探讨了该方法评价左空功能的准确性。率先在国内探讨了不同部。研究率先提出...
- 关键词：
- 关键词：冠心病患者
- 嵌合抗原受体表皮生长因子受体Ⅲ型突变体单链抗体-ICOS-CD3ζ表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的 构建嵌合抗原受体表皮生长因子受体Ⅲ型突变体单链抗体（EGFRvⅢscFv）-ICOS-CD3ζ表达载体.方法 将靶向EGFRvⅢscFv（726 bp）与第2代嵌合抗原受体的铰链区、跨膜区、胞内信号区（Hinge-TM-ICOS-CD,648bp）通过重叠延伸聚合酶链反应（PCR）连接,克隆入表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP的EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点,测序确定DNA序列正确后脂质体法转染293T细胞,Western blot检测目的基因表达.结果 EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切和DNA测序显示嵌合抗原受体EGFRvⅢscFv-ICOS-CD3ζ各基因片段连接及序列正确,转染293T细胞48h后提取蛋白质,鼠抗人CDζ单抗免疫印迹显示目的基因为57×103的蛋白条带,与预算相对分子质量相符.结论 成功构建嵌合抗原受体EGFRvⅢscFv-ICOS-CD3ζ表达载体,为表达EGFRvⅢ的肿瘤靶向免疫治疗提供了研究基础.
- 王力夫孙向东王春荣杨玉秀徐洪伟韩双印
- 关键词：过继免疫治疗
- 重组人干扰素α-2b／免疫球蛋白G4 Fc融合蛋白在杆状病毒昆虫系统中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的利用杆状病毒昆虫系统表达人干扰素（IFN）α-2b／免疫球蛋白（Ig）G4Fc融合蛋白（IFN／Fc），为长效干扰素的抗病毒治疗探索新方法。方法利用分子克隆技术获得人IFNα-2b及IgG4Fc基因cDNA，构建杆状病毒穿梭载体，在DHIOBac菌株中转座获重组杆粒，转染昆虫细胞Highfive，Western blot检测目的蛋白表达，细胞病变抑制法检测生物学活性。结果穿梭载体在DHIOBac中转座成功，获得重组杆粒BacmidqFN／Fc；HighFive细胞在病毒感染后72h蛋白表达较好。病毒感染48h即有少量目的蛋白表达，72h表达量较高。Westernblot结果显示在45×10^3处有特异性蛋白条带，体外抗病毒活性为580IU／ml。结论利用杆状病毒昆虫系统成功表达重组IFN／Fc融合蛋白，为新型长效干扰素研制及慢性病毒性肝炎治疗提供实验依据。
- 姬朝霞陈雅宁张延瑞杨玉秀王春荣韩双印
- 关键词：干扰素类融合蛋白质类病毒
- 基因修饰T细胞肿瘤过继免疫治疗安全性的研究进展被引量：1
- 2017年
- 基因修饰T细胞(CAR-T,TCR-T)赋予其肿瘤靶向性、更强的杀伤活性和持久的生命力,在恶性血液肿瘤和实体瘤的临床试验中取得了可喜的效果。然而,不断积累的的临床资料也发现了安全性担忧:炎症细胞因子级联反应引发的肿瘤靶向毒性;抗原识别相关的脱靶效应、非肿瘤靶向效应、移植物抗宿主病等,不仅难以预见而且复杂难治,促使研究人员以毒性发生机制为切入点,尝试应用自杀基因开关、细胞内凋亡酶调控、分离式CAR受体、抑制性CAR受体等调控策略,实现对基因修饰T细胞时间和空间的精准控制,预防毒性反应的发生。本文综述基因修饰T细胞的安全问题及应对策略。
- 权冰洁韩双印王春荣
- 关键词：免疫治疗安全性肿瘤
- 靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的第三代嵌合抗原受体的构建与表达被引量：5
- 2015年
- 目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp)、铰链区/穿膜区(213 bp)、共刺激分子(CD28和CD137的胞内信号区,123 bp和126 bp)和免疫受体酪氨酸活化基序(CD3ζ链,336 bp)连接成EGFRvⅢsc Fv-CD28-CD137-CD3ζ(EGFRvⅢ/3CAR),克隆入真核表达载体p CDHCMV-MCS-EF1-cop GFP的EcoRⅠ和Bam HⅠ位点,转染293T细胞48 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting检测EGFRvⅢ/3CAR的表达。结果:EGFRvⅢsc Fv和基因合成的CD28-CD137-CD3ζ表达框通过重叠延伸PCR拼接成EGFRvⅢ/3CAR,限制性内切酶片段分析和DNA测序均验证了重组载体序列完全正确,Western blotting应用抗人-CD3ζ抗体检测到EGFRvⅢ/3CAR在293T细胞中的完整表达(相对分子质量约58 k D)。结论:成功构建嵌合抗原受体EGFRvⅢ/3CAR表达载体,为嵌合抗原受体修饰T细胞靶向治疗肿瘤提供研究基础。
- 敖仕梅伍玥王春荣杨玉秀韩双印
- 64排螺旋CT仿真结肠镜诊断结直肠占位性病变价值被引量：8
- 2015年
- 目的探讨64排螺旋CT仿真结肠镜(CT virtual colonoscopy,CTVC)在结直肠占位性病变诊断中的价值。方法疑诊结直肠癌及结肠息肉患者135例,均行CTVC、结肠镜活检组织病理检查,计算CTVC诊断结直肠癌及结直肠息肉的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果结肠镜活检组织病理检查诊断结肠癌42例,结直肠息肉59例,正常34例;CTVC诊断结直肠癌38例,结肠息肉48例(假阳性4例),诊断结直肠占位性病变的敏感性为85.14%,特异性为88.23%,阳性预测值为95.55%,阴性预测值为66.66%。结论 CTVC检查诊断结直肠癌及结直肠息肉有较高敏感性和特异性,可作为高危人群结直肠占位病变的筛查方法。
- 胡春晓王春荣朱绍成韩双印
- 关键词：结肠息肉电子结肠镜
- 阴离子型胰蛋白酶原基因G191R突变与胰腺炎发病的关系
- 2014年
- 目的 分析阴离子型胰蛋白酶原（PRSS2）基因G191R突变在急性胰腺炎（AP）和慢性胰腺炎（CP）患者中的发生率,探讨PRSS2基因突变对胰腺炎易感性的影响.方法 采集82例AP、73例CP及138例健康体检者的血液标本,提取基因组DNA.应用巢式PCR对PRSS2基因进行扩增.PCR产物用Hpy188Ⅲ酶切,行限制性片段长度多态性分析（RFLP）,部分产物测序验证.结果 PRSS2基因的巢式PCP产物长度为436 bp,RFLP2获得309 bp和127 bp两个片段,为RPSS2基因G191R突变（即GGA→AGA）所致.DNA测序证实PRSS2基因G191R突变.AP患者中5例发生RPSS2基因G191R突变,突变率为6.1％（5/82）,OR=0.682,95％ CI 0.231 ～ 2.010; CP患者突变率为1.4％ （1/73）,OR =0.145,95％ CI 0.019～1.145;健康对照组为8.7％ （12/138）.CP组的G191R突变率显著低于健康对照组（x2 =0.432,P=0.035）,而AP组与健康对照组的差异无统计学意义（x2=0.487,P=0.485）.结论 PRSS2基因G191R突变可促进阴离子型胰蛋白酶原的降解,降低慢性胰腺炎的发生率.
- 李璐丁辉杨玉秀韩双印王春荣
- 关键词：胰腺炎点突变聚合酶链反应碱基序列
- 溃疡性结肠炎患者血清IL-6、RANKL/OPG水平与骨质疏松的关系被引量：3
- 2014年
- 目的探讨溃疡性结肠炎（UC）患者血清白细胞介素-6（IL-6）、核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（OPG）与骨质疏松的关系。方法 2012年1月至2013年8月在郑州大学人民医院住院治疗的UC患者30例,健康对照20例,Elisa法检测血清IL-6、RANKL、OPG水平,双能X线骨密度仪测量L1-L4骨密度（BMD）。结果 UC患者骨密度降低13例（46.7%）,骨密度平均值（0.97±0.18）g/m^2,低于对照组（1.11±0.14）g/m^2（P=0.007）;UC患者血清IL-6、RANKL、OPG水平均显著高于对照组（P〈0.001）;UC患者骨量正常组血清IL-6、RANKL水平均高于对照组（P〈0.01）,骨量减少组与骨质疏松组IL-6、RANKL、OPG水平均高于对照组（P〈0.01）,IL-6水平在UC患者骨量正常组、骨量减少组及骨质疏松组间存在显著差异（P〈0.01）;OPG水平骨量减少组及骨质疏松组高于骨量正常组（P〈0.01）;UC患者血清IL-6、OPG水平与骨密度呈负相关（r值分别为-0.528和-0.437,P均〈0.05）。结论 IL-6、RANKL及OPG在UC患者骨质疏松发生中起着重要作用,检测UC患者血清IL-6、RANKL和OPG水平对预防和诊断骨质疏松有一定的临床价值。
- 闫小燕李纬丁辉张立达杨玉秀王春荣张延瑞韩双印
- 关键词：溃疡性结肠炎骨质疏松RANKLOPG
- 丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型基因N34S突变与慢性胰腺炎发病的关系被引量：1
- 2014年
- 目的 分析丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型（SPINK1）基因N34S突变在不同类型慢性胰腺炎中的发生率,探讨SPINK1基因突变与慢性胰腺炎发病的关系.方法 采集79例慢性胰腺炎患者及60例健康对照者的血液标本,提取基因组DNA;聚合酶链反应（PCR）对SPINK1基因进行扩增,TspR1酶切进行限制性片段长度多态性分析（RFLP）;部分病例PCR产物进行DNA序列分析,证实SPINK1基因N34S突变.结果 共检测到6例SPINKI N34S突变,其中特发性胰腺炎4例,胆源性胰腺炎1例,酒精性胰腺炎1例,自身免疫性胰腺炎及健康对照组未检出该基因突变.结论 SPINK1基因N34S突变在特发性胰腺炎中发生率较高,而胆源性胰腺炎、酒精性胰腺炎和自身免疫性胰腺炎中该突变与健康对照组比较差异无统计学意义,提示该突变与特发性胰腺炎发病相关.
- 丁辉李鹏飞杨玉秀王春荣韩双印
- 关键词：慢性胰腺炎基因突变
- CD3/CD28免疫磁珠法体外扩增外周血T淋巴细胞被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨CD3/CD28免疫磁珠在外周血T淋巴细胞体外激活、扩增中的应用。方法 Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞、CD3免疫磁珠分选、CD3/CD28免疫磁珠激活和细胞因子扩增CD3＋T细胞。流式细胞术分析CD3＋T细胞纯度,台盼蓝染色分析细胞活性和细胞计数分析扩增效率。结果 流式细胞术检测显示CD3＋T细胞纯度达99.80%,其中CD8＋T细胞占39.33%。CD3/CD28免疫磁珠激活和扩增前后细胞活性无明显变化[（97.05±2.36）%vs（96.34±2.14）%,P〉0.05],然而CD3＋T细胞扩增可持续7~10 d,扩增倍率可达8倍,与对照组（CD3单克隆抗体包被和PBS）相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 CD3/CD28免疫磁珠可在体外实现CD3＋T细胞的有效激活与扩增,为肿瘤过继免疫治疗提供了新方法。
- 王云飞王艺王春荣杨玉秀姬新颖张延瑞韩双印
- 关键词：免疫磁珠
