王玉瑶 作品数:5 被引量:9 H指数:2 供职机构: 山西大学生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
八肋游仆虫核糖体蛋白L11的基因克隆与序列分析 2008年 以单细胞真核生物八肋游仆虫Euplotes octocarinatus为实验材料,采用PCR、RT-PCR方法克隆了核糖体蛋白L11基因(EoRPL11)。将该序列与GenBank中其他物种的RPL11基因序列进行同源性比对,采用DNAStar软件进行聚类分析。结果显示,成功克隆到游仆虫RPL11基因,大核中该基因全长709bp,开放阅读框(ORF)为531bp,编码176个氨基酸;cDNA序列与大核中ORF序列一致,表明该基因具有转录活性;所推导的氨基酸序列与嗜热四膜虫Tetrahymena thermophila的RPL11同源性最高,为66%。 张志云 王玉瑶 梁爱华关键词:核糖体蛋白L11 克隆 纤毛虫 八肋游仆虫 核糖体蛋白L11及其功能 被引量:4 2008年 核糖体蛋白L11(ribosome protein L11)是一种高度保守的蛋白质,是蛋白质合成过程中所必需的。L11由N-末端和C-末端两个结构域组成。L11的N-末端在蛋白质合成中作为分子开关,在多肽链的延伸阶段与延伸因子EF-G相互作用,对EF-G依赖的迁移过程是必需的;在肽链终止阶段与肽链释放因子RF1相互作用,对RF1识别终止密码子UAG的功能是必需的。L11上有一个与噻唑类(thiazole)抗生素结合的靶位点,这种结合会抑制依赖延伸因子的核糖体的活性。 王玉瑶 张志云 梁爱华关键词:核糖体蛋白L11 分子开关 游仆虫重组核糖体蛋白L11与肽链释放因子的体外相互作用分析 被引量:3 2008年 核糖体蛋白L11(ribosome protein L11)是一种高度保守的蛋白质.为研究真核生物的核糖体蛋白L11的功能,从八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)大核基因组中克隆到核糖体蛋白L11基因,构建了重组表达质粒pGEX-6p1-L11,通过谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析,纯化了重组融合蛋白GST-L11.Pull down分析显示,八肋游仆虫的核糖体蛋白L11与第一类肽链释放因子eRF1a可以在体外相互作用.这一结果提示,与原核生物一样,低等真核生物的核糖体蛋白L11在肽链终止过程中可能起一定的作用. 王玉瑶 张志云 柴宝峰 梁爱华关键词:游仆虫 核糖体蛋白L11 相互作用 八肋游仆虫eRF3 C端的76个氨基酸对于释放因子eRF1a的结合不是必需的(英文) 被引量:2 2007年 以八肋游仆虫第二类肽链释放因子eRF3基因为模板,用PCR的方法获得eRF3的C端(eRF3C)和C端缺失76个氨基酸的突变体eRF3Ct片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p-1-eRF3C和pGEX-6p-1-eRF3Ct,转入大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达。通过Glutathione Sepharose 4B柱亲和层析纯化,重组蛋白GST-eRF3C和GST-eRF3Ct获得纯化。Western blotting分析表明获得的蛋白为目的蛋白。PreScission酶切割后得到eRF3C和eRF3Ct蛋白。体外pull down分析显示eRF3C和eRF3Ct均能与八肋游仆虫第一类释放因子eRF1a相互作用,这表明八肋游仆虫eRF3 C端的76个氨基酸对于释放因子eRF1a的结合不是必需的。 宋莉 王玉瑶 柴宝峰 王伟 梁爱华关键词:八肋游仆虫 重组游仆虫核糖体蛋白L11与肽链释放因子体外相互作用的分析 蛋白质合成是细胞内最重要的生命活动之一,这一过程包括核糖体上新生肽链合成的起始、延伸和终止。核糖体蛋白L11(ribosome protein L11)是一种高度保守的蛋白质,是蛋白质合成过程中的几个步骤所必需的。核糖体... 王玉瑶关键词:核糖体蛋白L11 表达纯化 多克隆抗体 游仆虫 蛋白质合成