秦晓宁
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
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- 结直肠癌细胞中lnczc3h7a的表达及对肿瘤细胞增殖和迁移的作用及机制
- 2021年
- 目的研究结直肠癌细胞中Lnczc3h7a的表达及对肿瘤细胞增殖和迁移的作用机制。方法选择6种结直肠癌细胞株人结肠癌细胞(HT-29),人结直肠癌细胞(HCT-116),人结肠癌细胞(SW-60),人结直肠腺癌细胞(COLO320DM),人结肠癌细胞(Lovo)和人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1)与正常结直肠上皮细胞系。以Lnczc3h7a模拟物(mimics)、Lnczc3h7a抑制剂(inhibitor)及空白对照分别转染结直肠癌细胞SW60,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和细胞划痕实验分别检测转染Lnczc3h7a mimics和Lnczc3h7a inhibitor后结直肠癌细胞的增殖和迁移能力,免疫印迹试验(Western blot)法检测结直肠癌细胞SW60中胶原三股螺旋重复蛋白6(CTHRC6)的表达。分别使用过表达体系和siRNA分别改变细胞系中Lnczc3h7a和CTHRC6)的表达,检测结直肠癌细胞的增殖和迁移能力。再采用CRISP-Cas9技术敲除Lnczc3h7a和CTHRC6),检测结直肠癌细胞的增殖和迁移能力。结果HT-29、HCT-116、SW-60、COLO320DM、Lovo和DLD-1中的Lnczc3h7a表达水平分别为0.65±0.02、0.67±0.02、0.84±0.04、0.58±0.02、0.70±0.02、0.52±0.30,均显著低于正常结直肠上皮细胞系(1.00±0.00,F=5.298、5.462、8.172、4.698、7.012、4.463,P值均<0.05),差异均有统计学意义。细胞转染后第3、4、5天,模拟物组(0.33±0.02、0.58±0.01、0.65±0.02)及对照组(0.41±0.05、0.71±0.02、0.90±0.04)结直肠癌细胞增殖能力均低于抑制剂组(0.51±0.03、0.88±0.04、1.07±0.08),且模拟物组结直肠癌细胞增殖能力低于对照组(F=5.104、6.873、8.284,P<0.05),差异均有统计学意义。细胞培养24、48 h时,模拟物组(184.92±34.82、157.71±27.47)及对照组(411.86±62.35、412.94±63.19)的结直肠癌细胞迁移能力低于抑制剂组(466.92±47.37、470.83±47.82),且模拟物组结直肠癌细胞迁移能力低于对照组(F=1.482、5.104,P值均<0.05),差异均有统计学意义。细胞转染24 h时模拟物组及对照组的CTHRC6蛋白表达分别为0.31±0.04�
- 任鹏涛郝英豪阮洪训秦晓宁张苑黄炜
- 关键词：结直肠癌增殖迁移
- Lnczc3h7a靶向CTHRC6对肠癌细胞的增殖和迁移的影响
- 2023年
- 目的探讨结直肠癌治疗的潜在靶点,研究Lnczc3h7a靶向CTHRC6对结直肠癌细胞的表达以及增殖和迁移能力的影响。方法选择结直肠癌细胞株(HT-29、SW-60、HCT-116、Lovo、COLO320DM和DLD-1)及正常结直肠上皮细胞FHC,采用荧光定量PCR法检测Lnczc3h7a在结直肠癌细胞株及正常结直肠上皮细胞株中的表达。根据结直肠癌细胞HCT-116转染方式分为Lnczc3h7a mimics组、Lnczc3h7a inhibitor组和使用空白blank plasmid进行转染的空白对照组。采用CCK8法和划痕实验分别检测并比较三组细胞的增殖能力和迁移能力,通过CRISP-Cas9技术敲除Lnczc3h7a后采用Western blot法检测Lnczc3h7a对CTHRC6蛋白表达的影响。结果HT-29、SW-60、HCT-116、Lovo、COLO320DM和DLD-1中的Lnczc3h7a表达水平分别为:0.64±0.02、0.67±0.03、0.59±0.04、0.68±0.03、0.72±0.04、0.62±0.05,均显著低于正常结直肠上皮细胞的FHC(1.00±0.00),转染后,Lnczc3h7a mimics组中的Lnczc3h7a表达水平为(1.36±0.05)明显高于Lnczc3h7a inhibitor组(0.57±0.04)和空白对照组(1.02±0.03),差异有统计学意义(P<0.05)。转染1~3d后,3组细胞增殖能力差异不显著;转染第4、5d,Lnczc3h7a inhibitor组(0.84±0.06、1.08±0.06)结直肠癌细胞增殖能力明显高于空白对照组(0.73±0.06、0.96±0.06)和Lnczc3h7a mimics组(0.67±0.05、0.91±0.04),同时,空白对照组结直肠癌细胞增殖能力高于Lnczc3h7a mimics组(P值均<0.05),差异均有统计学意义。细胞培养24 h、48 h时,Lnczc3h7a inhibitor组(447.96±46.19、467.23±45.36)的结直肠癌细胞迁移能力高于对照组(416.57±59.48、425.17±58.34)和Lnczc3h7a mimics组(416.57±59.48、425.17±58.34),同时,对照组结直肠癌细胞迁移能力高于Lnczc3h7a mimics组(P值均<0.05),差异均有统计学意义。对敲除的基因进行RT-PCR检测,结果显示在mRNA水平上,Lnczc3h7a的表达已大幅度下降(P<0.01),同时Westerm botting结果显示已经完全没有Lnczc3h7a蛋白的表达。Westerm botting结果�
- 任鹏涛郝英豪阮红训秦晓宁张苑李猛
- 关键词：结直肠癌生物学行为
- Lnczc3h7a对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制被引量：2
- 2021年
- 目的分析Lnczc3h7a在结直肠癌细胞中的表达及其对结肠癌细胞增殖和迁移的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法选择6种结直肠癌细胞株SW620、SW480、HCT116、DLD-1、Caco-2、HT-29与正常结直肠上皮细胞株FHC,采用RT-PCR法检测Lnczc3h7a在结直肠癌细胞株及正常结直肠上皮细胞株中的表达。以Lnczc3h7a mimics、Lnczc3h7a inhibitor分别转染结直肠癌细胞SW620并分别命名为Lnczc3h7a mimics组、Lnczc3h7a inhibitor组,未转染细胞作为对照组。采用CCK8法和细胞划痕实验分别检测3组细胞增殖和迁移能力差异性,采用Western blot法检测Lnczc3h7a对结肠癌细胞中CTHRC6蛋白表达的影响。结果RT-PCR法检测结果显示,6种结肠癌细胞株中Lnczc3h7a的相对表达水平均低于正常结直肠上皮细胞株FHC,差异均有统计学意义(P<0.05)。CCK-8检测结果显示,转染4、5d后,Lnczc3h7a mimics组细胞增殖能力低于Lnczc3h7a inhibitor组和对照组(P<0.05),Lnczc3h7a inhibitor组细胞增殖能力高于对照组(P<0.05)。划痕实验结果显示,在培养24、48 h后3组的伤口愈合率比较的差异均有统计学意义(F=395.524、480.165,P<0.05);与对照组相比,Lnczc3h7a mimics组细胞迁移能力降低(P<0.05),Lnczc3h7a inhibitor组细胞迁移能力升高(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组相比,Lnczc3h7a inhibitor组中CTHRC6蛋白表达升高(P<0.05),Lnczc3h7a mimics组中CTHRC6蛋白表达降低(P<0.05)。结论Lnczc3h7a可能通过靶向作用于CTHRC6抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移能力。
- 任鹏涛郝英豪阮红训秦晓宁张苑黄炜
- 关键词：结直肠癌增殖迁移
- 肿瘤转移相关基因-1和血管内皮生长因子C在胃癌中的相关性被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨肿瘤转移相关基因-1（MTAl）和血管内皮生长因子C（VEGF-C）蛋白在胃癌发生发展中的相关性.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测48例胃癌组织、癌旁组织以及20例胃组织中两种基因蛋白的表达,对其相关性进行分析.结果 胃癌组织中的MTA1表达阳性率明显高于癌旁组织和正常组织（68.75％、52.08％和35.00％）,VEGF-C表达阳性率明显高于癌旁的组织和正常组织（85.42％、64.58％和45.00％）,并且两者的表达均与肿瘤浸润深度、淋巴结转移密切相关,两者的表达呈正相关（P＜0.05）.结论 MTA1可能通过VEGF-C信号途径参与胃癌的发生发展.
- 张国建秦晓宁阎庆辉王凤安吴爱须南新华
- 关键词：血管内皮生长因子C胃癌
- 白介素-22基因多态性与结肠癌相关性的研究被引量：6
- 2019年
- 目的:白介素-22(interleukin-22,IL-22)是由 T 细胞和固有淋巴细胞产生的一种白介素-10(interleukin-10,IL-10)家族细胞因子,与炎症形成和肿瘤的发生密切相关。本研究旨在探讨 IL-22 基因多态性与中国人群结肠癌的关系。方法:采用病例对照研究的方法,收集结肠癌患者 540 例和健康对照组 540 例,用 5’端核酸外切酶法分析 IL-22 基因 3 种常见多态性(-429 C/T、+1046 T/A 和+1995A/C)。分类变量间的差异采用 Pearson 卡方检验,Student’s t 检测连续变量间的差异。结果:结肠癌患者中IL-22-429 TT 基因型出现频率明显增高(OR=1.69,95%CI=1.24~2.30,P=0.001),-429T 等位基因(OR=1.35,95%CI=1.14~1.60, P=0.001)。此结果经过 Bonferroni 校正依然有统计学意义(P<0.017)。进一步分层研究后发现分化低的结肠癌患者相对于中高级别分化的结肠癌患者 IL-22 -429 TT 基因型频率较高(OR=1.45,95%CI=1.02~2.07,P=0.040),而-429 C/T 基因多态性与结肠癌的部位、肿瘤大小、生长方式和 TNM 分期无关。 IL-22+1046 T/A 及 IL-22+1995 A/C 基因多态性与结肠癌无关(P=0.980,P=0.750)。结论:IL-22-429C/T 基因多态性可能与结肠癌有关。
- 林林秦晓宁阮洪训赵晶郝英豪阎庆辉
- 关键词：IL-22结肠癌基因多态性病例对照研究
- MTA1和VEGF-C在胃癌中的表达及临床意义
- 目的:胃癌在我国是最常见的恶性肿瘤之一，它起源于胃壁表面的粘膜上皮细胞，可在胃的各个部位发生其中以胃窦幽门区最多见、胃底贲门区次之、胃体部最少，根据侵犯胃的深度和广度可以分为早期胃癌和进展期胃癌。如果癌灶仅仅局限在胃粘膜...
- 秦晓宁
- 关键词：胃癌MTA1基因血管内皮生长因子-C淋巴结转移
- 文献传递
- TGF-β1对结直肠癌细胞株侵袭转移及IL-22表达的影响被引量：6
- 2019年
- 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对结直肠癌细胞株侵袭转移及白细胞介素22(IL-22)蛋白表达的影响。方法以结直肠癌HCT116细胞株为研究对象,以不同浓度(0、5、10、15、20、30、50μg/L)TGF-β1处理24、48 h后,CCK-8法检测结直肠癌HCT116细胞体外增殖情况;将结直肠癌HCT116细胞株分为对照组和10μg/L TGF-β1处理组。Transwell侵袭迁移实验和划痕实验检测TGF-β1对HCT116细胞侵袭迁移能力的影响;采用RT-PCR检测TGF-β1对HCT116细胞TGF-β1、IL-22 mRNA表达的影响;免疫细胞化学染色和Western blot检测HCT116细胞中TGF-β1、IL-22、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果 CCK-8结果显示,0、5、10、15、20、30、50μg/L TGF-β1溶液刺激24、48 h后,不同TGF-β1浓度处理组结直肠癌HCT116细胞光密度(OD)值差异均无统计学意义(均P>0.05)。10μg/L TGF-β1处理HCT116细胞48 h后,细胞侵袭能力、迁移能力和迁移距离均明显升高(均P<0.01);TGF-β1处理组TGF-β1 mRNA表达水平明显高于对照组,而IL-22 mRNA表达水平明显低于对照组(均P<0.01);免疫细胞化学染色和Western blot结果显示,TGF-β1处理组TGF-β1、STAT3蛋白表达水平明显高于对照组,而IL-22、E-cadherin蛋白表达水平明显低于对照组(均P<0.05)。结论 TGF-β1可能促进HCT116细胞侵袭和迁移,但对HCT116细胞的增殖影响不明显,结直肠癌HCT116细胞中TGF-β1可能抑制IL-22蛋白的表达。
- 阮洪训秦晓宁黄炜李猛赵晶任鹏涛郝英豪林林
- 关键词：肿瘤侵润转化生长因子Β1白细胞介素22
