袁方 作品数:7 被引量:6 H指数:2 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
DNA损伤修复蛋白XPF影响肾癌细胞顺铂耐药 被引量:2 2014年 目的探索DNA损伤修复蛋白XPF表达水平影响肾癌细胞顺铂耐药的作用与机制。方法 Western blot法检测不同肾癌细胞株的XPF蛋白水平;采用shRNA干扰技术,筛选稳定低表达XPF的细胞株;采用克隆形成实验及细胞凋亡检测实验,比较XPF低表达细胞株与XPF正常表达细胞株的顺铂敏感性;通过β-半乳糖苷酶染色法,检测细胞的衰老程度。结果在肾癌细胞786-0、ACHN和Caki-1中,ACHN细胞的XPF表达水平最高,其顺铂耐药程度也最高。shRNA干扰获得稳定低表达XPF的ACHN细胞,顺铂处理后,其克隆形成率低于对照(P<0.05),细胞凋亡率高于对照,衰老细胞比例也显著高于对照(P<0.01)。结论肾癌化疗不敏感可能与其高表达DNA损伤修复蛋白XPF有关,干预并下调肾癌ACHN细胞XPF表达,可增强顺铂的凋亡诱导效应并加速衰老,从而提高其顺铂敏感性。 张乔 袁方 黄亚琴 陈志文 杨劲关键词:肾癌 顺铂 XPF 细胞衰老 增殖细胞核抗原突变体的稳定高表达对HeLa细胞顺铂敏感性的影响 被引量:2 2008年 目的建立稳定高表达增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)或突变体PC-NA(mutant PCNA,mPCNA)目的蛋白的宫颈癌细胞系HeLa细胞,观察PCNA在顺铂诱导的DNA损伤修复中的作用。方法采用显性负突变策略,通过构建重组人PCNA或mPCNA的真核表达质粒pCDNA3.1/V5-His A-PCNA(His-PCNA)和pCDNA3.1/V5-His A-mPCNA(His-mPCNA),稳定转染到HeLa细胞中,G418筛选建立稳定高表达目的蛋白的HeLa细胞系;Western印迹法检测蛋白的表达情况;MTT法测定顺铂损伤后不同细胞系的细胞存活率。结果真核表达质粒经酶切、测序分析与实验设计完全一致;稳定建系后,Western印迹结果显示在相应位置可见清楚的目的条带;MTT结果显示稳定高表达突变体PCNA的细胞系与对照组相比,其细胞存活率呈明显下降趋势。结论成功构建了真核表达质粒His-PCNA和His-mPC-NA;建立了稳定高表达该质粒的HeLa细胞系;稳定高表达突变体PCNA的细胞系对顺铂损伤更敏感。 位全芳 曾益军 杨劲 周虎传 刘洋 徐志刚 袁方 赵友光关键词:增殖细胞核抗原 稳定转染 HELA细胞 顺铂 MST1促进细胞凋亡机制方面的研究 背景与目的:
蛋白激酶MST1(mammalian Sterile 20-like kinase 1)在其氨基端有一个Ste20相关的激酶催化域,羧基端有一个调节区。MST1在细胞增殖、分化、形态和细胞骨架重排方面... 袁方关键词:细胞凋亡 P53 信号转导 SIRT 文献传递 肿瘤细胞XPF表达量与顺铂耐药的相关性研究 目前,顺铂广泛应用于临床抗肿瘤治疗中,但肿瘤耐药的出现严重制约其抗肿瘤效果.因而,寻找克服顺铂耐药的有效方法成为当前抗肿瘤研究的一个新方向.DNA损伤修复能力的增强是肿瘤耐药的重要机制之一. 张乔 袁方 余瑾 黄亚琴 石家仲 王志 王欢欢 杨劲关键词:XPF 肿瘤 顺铂 耐药 肿瘤细胞XPF表达量与顺铂耐药的相关性研究 目前,顺铂广泛应用于临床抗肿瘤治疗中,但肿瘤耐药的出现严重制约其抗肿瘤效果。因而,寻找克服顺铂耐药的有效方法成为当前抗肿瘤研究的一个新方向。DNA损伤修复能力的增强是肿瘤耐药的重要机制之一。通过研究DNA损伤修复系统中的... 张乔 袁方 余瑾 黄亚琴 石家仲 王志 王欢欢 杨劲关键词:XPF 肿瘤 顺铂 耐药 文献传递 膀胱癌患者着色性干皮病F蛋白的表达水平及其临床意义 2010年 目的检测膀胱癌患者着色性干皮病F蛋白(XPF)的表达水平,并探讨其临床意义。方法Trizol法提取25份膀胱癌组织及10份癌旁正常组织总RNA,经RT-PCR扩增后,以扩增产物为模板,经实时荧光定量PCR法检测XPF的表达水平。结果各基因扩增效率近似相等,且具有很好的特异性,膀胱癌组织中XPF基因的表达水平明显低于癌旁正常组织。结论XPF可能参与了膀胱癌的发生和发展过程,对膀胱癌的转移潜能及预后具有一定意义。 赵友光 杨劲 曾益军 位全芳 徐志刚 刘洋 袁方 陈志文关键词:膀胱癌 实时荧光定量PCR 膀胱癌中DNA聚合酶Polι转录调控机制及其作用初步研究 膀胱上皮细胞癌是世界上发病最高的肿瘤之一,其在发达国家泌尿系统恶性肿瘤中发生率仅次于前列腺癌,在我国则居于泌尿系统肿瘤的首位。大量研究显示,具有高复发和高异质性的膀胱上皮细胞癌,在遗传性和表观遗传性方面存在众多异常。这对... 袁方关键词:JNK信号通路 膀胱癌 转录调控机制