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许静: 作品数：49 被引量：43H指数：4; 供职机构：山西大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>; 相关领域：生物学医药卫生文化科学环境科学与工程更多>>

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RanGTPase激活蛋白RanGAP在嗜热四膜虫细胞中的定位及功能被引量：2: 2015年; RanGTPase激活蛋白（RanGTPase-activating protein，RanGAP）和Ran相互作用，提高了RanGTPase水解GTP的效率．RanGAP参与细胞内核质运输、纺锤体组装、核膜重建和异染色质的组装．生物进化过程中，不同生物的RanGAP表现出结构和功能的多样性．本研究从嗜热四膜虫大核基因组中鉴定出1个保守的RanGTPase激活蛋白基因RanGAP（TTHERM_00766430）．实时荧光定量PCR表明，RanGAP在四膜虫营养生长、饥饿和有性生殖过程中均有表达，且在有性生殖4～6h表达水平最高．免疫荧光定位表明，在营养生长期、饥饿期及有性生殖的早期，RanGAP定位于细胞质中；在有性生殖后期，RanGAP定位于凋亡的大核中．过表达RanGAP的细胞增殖速率下降，大核分裂和胞质缢缩异常，产生无大核细胞．敲减RanGAP的细胞大核形态异常，细胞增殖速率下降，无丝分裂受到抑制，进而产生无大核细胞．RanGAP的过表达或敲除分别引起四膜虫RAN1，RanBP1和RCC1基因的表达下调或上调．结果表明，RanGAP通过Ran信号通路调控了嗜热四膜虫无性生殖过程中大核的无丝分裂，并可能参与了有性生殖过程中亲本大核的凋亡．; 任晓琦许静王伟; 关键词：嗜热四膜虫无丝分裂凋亡

驱动蛋白Kin11调控嗜热四膜虫生殖系小核的减数分裂: 2020年; 驱动蛋白(kinesin)是分子马达蛋白质超家族成员,主要参与囊泡与细胞器的运输、纺锤体组装、有丝分裂和减数分裂等过程。在减数分裂期,不同驱动蛋白发挥功能的调控机制并不十分清楚。嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)中含有14个驱动蛋白家族成员。其中,kinesin-6家族的唯一成员Kin11(TTHERM_00637750),在营养生长期低表达,饥饿期不表达,有性生殖期表达上调。Kin11编码1608个氨基酸,包含1个N端保守的马达蛋白结构域,C端卷曲螺旋(coiled-coil)结构域,并在N端和C端分别含有核定位信号NLS1和NLS2。Kin11在营养生长期和有性生殖期,定位在有丝分裂和减数分裂的小核和纺锤体上,并在有性生殖后期alignment阶段定位于小核上。Kin11与微管蛋白共定位于有丝分裂和减数分裂的纺锤体上。将Kin11的N端含有NLS1的1~400位氨基酸序列截短后,截断突变体定位在有性生殖减数分裂期的小核和纺锤体上。而将其C端含有NLS2的1008~1608位氨基酸残基截短后,截断突变体只能定位在有丝分裂和减数分裂后期的小核及有丝分裂的纺锤体上。敲除KIN11导致减数分裂过程中的纺锤体结构发生异常变化,小核染色体不均等分离与丢失,有性生殖发育停滞。结果表明,嗜热四膜虫驱动蛋白Kin11通过影响纺锤体结构,参与调控四膜虫生殖系小核在减数分裂过程中的正常分离。; 许静李晓雄薄涛王伟; 关键词：驱动蛋白减数分裂纺锤体嗜热四膜虫

嗜热四膜虫染色体浓缩调节因子(RCC1)的定位及功能被引量：1: 2014年; 真核细胞中染色体浓缩调节因子(regulator of chromosome condensation 1,RCC1)是RanGTPase唯一的鸟嘌呤核苷酸交换因子.染色质结合的RCC1和RanGTPase相互作用,催化细胞核内RanGDP向RanGTP的转化,进而调控了核质间的定向运送、有丝分裂期纺锤体的组装以及核膜的形成.本实验从原生生物嗜热四膜虫大核基因组中鉴定了1个新的RCC1(TTHERM_00530380)基因.该基因全长2 541 bp,包含2个内含子序列,开放阅读框为2 181 bp,编码726个氨基酸.实时荧光定量PCR表明,RCC1在四膜虫营养生长、饥饿以及有性生殖时期都有表达,且在有性生殖转录水平达到最高.免疫荧光定位分析表明,HA-RCC1在营养生长和饥饿时期,定位于大核和小核中;在有性生殖时期,定位于亲本大核、减数分裂的小核、新生成的大核和凋亡的大核中.过表达RCC1导致大核的无丝分裂异常,细胞增殖变慢,最终产生无大核的后代细胞.敲减RCC1导致了多小核的产生.结果表明,RCC1参与调控了四膜虫细胞核的分裂,RCC1的正常表达对核分裂以及细胞增殖起到重要的调控作用.; 段文靖许静王伟; 关键词：嗜热四膜虫细胞定位核分裂

过表达周期蛋白Cyc28影响四膜虫的有性生殖进程被引量：1: 2017年; 真核生物的细胞周期通过连续的激活和失活特定的周期蛋白/周期蛋白依赖性激酶复合物活性进行调控。嗜热四膜虫含有34种周期蛋白,有性生殖期特异表达的周期蛋白Cyc2和Cyc17在四膜虫小核减数分裂中发挥重要功能。本研究从嗜热四膜虫中鉴定出一种新的周期蛋白CYC28(TTHERM_00082190)基因,预测编码266个氨基酸。实时荧光定量PCR表明,CYC28在有性生殖时期特异表达,且在4 h表达水平最高。通过同源重组构建获得MTT1启动子调控下的HA-CYC28突变体细胞。免疫荧光定位表明,HA-Cyc28定位在细胞质和凋亡的亲本大核中。分别构建CYC28敲除突变株和RNA干扰细胞株,对CYC28敲减突变体细胞的分析发现,营养生长和有性生殖期突变细胞发育正常。然而,过表达株Cyc28突变体引起原核染色体排列异常,原核不能完成有丝分裂形成配子核,有性生殖进程终止。结果表明,Cyc28参与细胞的有性生殖进程,它的正常表达和降解对原核有丝分裂的完成是必需的。; 张宇良许静王伟; 关键词：过表达有丝分裂嗜热四膜虫

一种长链金属硫蛋白基因及应用: 本发明公布了一种长链金属硫蛋白基因及其应用。通过PCR技术从四膜虫Tetrahymena？elliotti中扩增获得一种新的长链金属硫蛋白基因，突变密码子后获得突变基因Te-MTT2-L，连接到载体pSUMO中，获得含有...; 许静郭荣王伟梁爱华

RAN1基因过表达抑制嗜热四膜虫大核无丝分裂被引量：6: 2013年; Ran GTPase通过RanGTP/RanGDP循环的形式,参与调控多种细胞增殖方式:包括有丝分裂和减数分裂.敲减RAN1基因可导致嗜热四膜虫大核内微管组装紊乱,从而抑制大核无丝分裂.为进一步分析Ran1在无丝分裂中的功能,本研究将野生型Ran1以及模拟GTP(Ran1Q70L)和GDP(Ran1T25N)锁定形式的Ran1突变体在嗜热四膜虫中过量表达,均导致四膜虫细胞增殖速率下降,并引起大核无丝分裂异常,且这种核异常细胞比率与Ran1过表达量呈正相关.免疫荧光定位结果显示,过表达的HA-Ran1在整个细胞中弥散分布,破坏了正常的Ran1分布形式;而过表达的HA-Ran1Q70L明显集中在大核核膜和胞质中,HA-Ran1T25N则主要定位在大核和小核内,分别与Ran1GTP/Ran1GDP循环的辅助调节因子定位模式一致.以上结果表明,过表达Ran1及其突变体可能影响嗜热四膜虫细胞中正常的Ran1GTP/Ran1GDP循环,进而导致大核无丝分裂异常.; 梁海霞许静王伟; 关键词：RAN GTPASE 无丝分裂嗜热四膜虫

一种抗ProGRP纳米抗体及其应用: 本发明提供了一种抗ProGRP纳米抗体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的抗ProGRP纳米抗体的互补决定区CDR包括CDR1、CDR2和CDR3。本发明的抗ProGRP纳米抗体能够特异性结合ProGRP，该抗Pro...; 王伟王珂许静

抗沉默因子Asf1调控嗜热四膜虫细胞核的稳定性被引量：5: 2015年; 组蛋白H3/H4的分子伴侣Asf1（anti-silencing factor 1）,参与依赖DNA复制及不依赖DNA复制的核小体装配,同时参与转录调控、基因沉默以及DNA损伤修复等过程.在不同生物中,Asf1具有功能的保守性和多样性.嗜热四膜虫ASF1（TTHERM_00442300）基因编码的蛋白质含有保守的N端结构域和酸性的C端结构域.N端结构域同源序列进化树分析表明,Asf1进化与物种进化一致.实时荧光定量PCR表明,ASF1在四膜虫营养生长、饥饿及有性生殖时期均有表达,且在有性生殖4～6 h转录水平达到最高.免疫荧光定位分析表明,HA-Asf1在营养生长时期以及有性生长时期定位于功能大核和小核中,而在凋亡的大核中信号消失.过表达ASF1导致大核及小核变大,抑制细胞增殖.敲减ASF1后会导致大核形态异常,小核缺失.结果表明,ASF1表达对细胞核的形态和结构维持发挥重要的调控作用.; 陈波许静王伟; 关键词：嗜热四膜虫细胞定位

游仆虫中GARP基因的克隆、表达及光谱分析: 含有三核苷酸重复序列的基因编码的蛋白在细胞生命活动中具有重要功能。基因内三核苷酸重复序列拷贝数不稳定地异常扩展，可导致多种神经系统疾病。从低等单细胞酵母到多细胞哺乳动物都广泛存在该类基因，表明这些基因在细胞的生命活动中具...; 许静; 关键词：八肋游仆虫表达纯化; 文献传递

八肋游仆虫一种富含三核苷酸重复序列的新基因GARP的克隆与序列分析被引量：3: 2007年; 人类基因中三核苷酸重复序列拷贝数的异常扩增,可导致多种神经系统疾病。一种富含GAA三核苷酸的GARP(glutamicacid-richprotein)基因从八肋游仆虫(Euplotesoctocarinatus)大核文库中筛选获得。大核中该基因的染色体全长460bp,基因两端具有下毛类纤毛虫大核特有的端粒序列(C4A4C4A4C4A4C4),开放读框内含有一个TGA(88-90)密码子,在游仆虫中编码为半胱氨酸。经DNAStar软件分析,该基因编码的蛋白质由112个氨基酸组成,预测其分子量为13kDa,等电点为3.82,含有四个α螺旋和一个β折叠。小核中对应的该基因含有两个内部删除序列,IES1和IES2。IES1和IES2分别长41bp,IES1以GA二核苷酸直接重复为删除信号,IES2以TA二核苷酸直接重复为删除信号。RT-PCR证明该基因具有转录活性。; 许静王伟柴宝峰梁爱华; 关键词：八肋游仆虫三核苷酸重复

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