陈琳玲
- 作品数：25 被引量：111H指数：6
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 巨噬细胞集落刺激因子对RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9分泌的影响
- 2006年
- 目的探讨巨噬细胞集落刺激因子致动脉粥样硬化作用是否与其影响基质金属蛋白酶表达和活性有关。方法应用酶谱法观察巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9活性的影响;逆转录聚合酶链反应检测巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9 mRNA表达的影响。结果与对照组相比,不同浓度(100、250和500μg/L)巨噬细胞集落刺激因子能增强RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9的活性,并呈一定的剂量依赖性;同时,250μg/L巨噬细胞集落刺激因子可增强RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9 mRNA表达。结论巨噬细胞集落刺激因子可诱导RAW264.7细胞基质金属蛋白酶9的表达,并可能通过这一机制影响动脉粥样硬化斑块的稳定性。
- 王春许灿新严鹏科陈琳玲李凯廖端芳
- 关键词：病理学与病理生理学酶谱法巨噬细胞集落刺激因子基质金属蛋白酶巨噬细胞
- 两种冰冻全血基因组DNA提取方法的比较被引量：2
- 2004年
- 目的比较挑取白细胞法和裂解红细胞法获得人冰冻全血中的白细胞，提取基因组DNA的方法。方法分别分析DNA的收获量和OD260／0D280比值，同时，用PCR/SNP敏感性分子开关技术对两种方法获得的模板DNA进行SNP分析。结果挑取白细胞法DNA收获率高，纯度高，裂解红细胞法得到的DNA的产量和纯度相对较低；用PCR/SNP敏感性分子开关检测表明挑取白细胞法和裂解红细胞法制备的DNA模板可进行有效的体外扩增，但挑取白细胞法目的条带特异，而裂解红细胞法有扩增条带但有非特异带。结论对冰冻全血推荐采用挑取白细胞法进行大规模血样DNA的提取，建立高质量的DNA库，用于复杂疾病的基因检测和疾病SNP相关性研究。
- 彭翠英陈琳玲李凯易岚刘运莲廖端芳
- 关键词：白细胞全血红细胞SNP血样
- 高保真DNA聚合酶在SNP检测中的应用被引量：12
- 2003年
- DNA测序技术 ,使人类步入了后基因时代 ;而后基因时代对DNA序列分析的新要求 ,尤其是有关单碱基多态性的检测 ,急需更高效和更特异的分析方法。作者介绍两种可靠性高且适应性广的单碱基多态性检测新方法。基于高保真DNA聚合酶对引物 3′末端错配碱基的校正机制 ,通过标记引物 3′末端 ,配对引物得到带标记信号的产物而不配对的引物则只能得到不含标记信号的产物。最近 ,我们新发现高保真DNA聚合酶具有通过聚合反应非成熟性终止以维持成熟性终产物保真度的能力。利用 3′硫化磷酸修饰的引物 ,可强化由不配对引物所激发的对聚合反应的终止作用。3′硫化磷酸修饰与高保真DNA聚合酶共同形成一种由单碱基多态性调控的分子开关。这一新的分子开关可与电泳等多种现有的技术联合使用 ,在分析单一或多个已知SNP位点时 ,具有极大的应用价值。
- 张佳廖端芳张旭陈琳玲李凯
- 关键词：SNPDNA序列分析
- SNP敏感性分子开关对神经性耳聋GJB3中C→T突变点的识别被引量：1
- 2003年
- 目的 利用硫化修饰的碱基特异性引物与高保真DNA聚合酶所构成的对SNP敏感的“开 关”系统识别神经性耳聋GJB3中C→T突变点。方法 以非耳聋志愿者染色体DNA为模板 ,采用配对及三末端不配对的 3′硫化修饰引物 ,使用不同保真度DNA聚合酶进行引物延伸反应。结果 该方法仅能使野生型基因相关的引物得以延伸 ,而耳聋基因相关引物则不能延伸。结论 本方法可在单碱基水平对遗传病相关基因进行特异性检测 。
- 彭翠英张佳郭紫芬陈琳玲廖端芳
- 关键词：神经性耳聋GJB3SNP单碱基突变单基因遗传病
- 核化线粒体的进化加速作用与转基因人模型分析被引量：4
- 2004年
- 生物分子钟的应用在当代生物研究领域具有十分重要的意义。然而 ,分子钟仅能用于粗略估计不同种群生物间的进化时程 ,间接表明进化可能不是或不仅仅是由于中性突变通过遗传渐变所造成 ;相反 ,染色体DNA与外源性DNA之间 ,以及染色体DNA相互之间的大量基因重组 ,则可能是推动进化进程的更大动力之一。鉴于人体内的线粒体DNA是一种外源性环状DNA ,人类可认为是一种天然发生的整合了外源性线粒体DNA的转基因物种。本文引入转基因人分析法并应用这一方法探讨与人类进化过程相关的基因重组。通过对人、小鼠、大鼠进行核化线粒体组学分析 ,发现人类染色体基因组含有大量与线粒体DNA同源的核酸片段 ;人体基因组内核化线粒体基因在重组数与总碱基长度上均较小鼠和大鼠高出数倍。人体内大量存在的线粒体DNA介导的基因重组可能在促进人类进化中发挥了一定的作用。
- 李凯廖端芳张佳陈琳玲彭翠英王春
- 关键词：线粒体分子钟进化
- 一种可用于引物评价的多用途模板
- 本发明公开了一种可用于引物评价的多用途模板，该模板由三部分组成，(1)五末端为摇摆碱基，(2)中间为含有特定碱基的核苷酸序列，(3)三末端为摇摆碱基，五末端的摇摆碱基数为15～50个，三末端的摇摆碱基数为15～50个，中...
- 张佳胡应和廖端芳陈琳玲张旭孟博侯赛因·帕丁纳斯李凯
- 文献传递
- 比较全血DNA提取法适用单核苷酸多态性分析被引量：4
- 2005年
- 目的比较两种提取冰冻全血基因组DNA的方法,即分离白细胞法和裂解红细胞法所获得基因组DNA的质量。方法分别测定所获DNA的效率和纯度,同时,笔者用PCR/SNP敏感性分子开关技术,对两种方法获得的模板DNA进行单核苷酸多态性(single-nucleotidepolymorphism,SNP)分析。结果结果显示分离白细胞法DNA产量与纯度均高,裂解红细胞法获得的DNA产量、纯度相对较低;PCR/SNP敏感性分子开关检测表明:分离白细胞法和裂解红细胞法制备的DNA模板,均可在体外进行有效的PCR扩增,但分离白细胞法获得的目的DNA带特异性凸显,而裂解红细胞法获得的目的带特异性相对较差。结论预先分离纯化白细胞是从冰冻全血中获得较高纯度DNA和有效提高DNA产量的重要操作步骤。
- 彭翠英陈琳玲秦志峰胡卫民李凯廖端芳李国庆
- 关键词：SNP分析聚合酶链式反应
- 聚合酶3′外切活性对3′硫化修饰引物聚合反应的影响被引量：8
- 2003年
- 目的 探讨硫化修饰的次 3′末端不配对引物能否引发高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应的非成熟性终止 ,即所谓聚合反应的“关”效应。方法 采用配对及非末端不配对的 3′硫化修饰引物 ,研究其对不同保真度 DNA聚合酶引物延伸反应的影响。结果 非末端不配对的 3′硫化修饰引物也能引发高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应非成熟性终止 ,而对低保真 DNA聚合酶所介导的聚合反应则无明显影响。同时 ,3′硫化修饰的配对引物对不同保真度 DNA聚合酶引物延伸反应均无影响。结论 硫化修饰的次 3′末端不配对引物与 3′末端不配对引物对引物延伸的影响相似 ,同样能引起高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应的“关”的效应。显然 ,在单基因遗传病的诊断及单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism,SNP)的高通量分析等方面 ,硫化修饰的碱基特异性引物与高保真 DNA聚合酶所构成的对 SNP敏感的“开 /关”系统 ,具有广阔的应用前景。
- 郭紫芬陈琳玲张佳彭翠英杨向东张旭何淑雅廖端芳李凯
- 关键词：DNA单基因遗传病
- 单核苷酸多态性及其检测方法被引量：13
- 2004年
- 彭翠英廖端芳张佳陈琳玲李凯
- 关键词：单核苷酸多态性基因突变
- 几种新的FBN1 cDNA片段的克隆及其在马凡综合症基因诊断中的意义
- 2006年
- 报道3种新的FBN1片段的DNA序列,并分析这些新序列在1例非典型性马凡综合症基因诊断中的参考意义。
- 陈琳玲张佳廖端芳李凯
- 关键词：克隆
