陈颍
- 作品数：8 被引量：17H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-214-3p对人卵巢癌细胞顺铂耐药及EGR1表达的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨微小RNA-214-3p(miR-214-3p)与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系,并分析miR-214-3p对早期生长反应因子1(EGR1)表达影响。方法脂质体方法行瞬时转染,CCK-8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡率;实时定量PCR(qRT-PCR)分析miR-214-3p及EGR1表达;蛋白质印迹法检测细胞EGR1及着色性干皮病基因(XPD)蛋白表达。结果人卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008中miR-214-3p表达高于人卵巢癌顺铂耐药细胞C13K(P<0.001)。转染48 h,miR-214-3p在OV2008 inhibitor组细胞(0.11±0.09)、C13K mimics组细胞(22.42±4.27),与OV2008空白对照组细胞(7.92±2.22)及C13K空白对照组细胞(0.33±0.16)比较,差异有统计学意义(P<0.001);C13K mimics组细胞增殖减慢,细胞凋亡上升,细胞对顺铂敏感性增加,OV2008 inhibitor组细胞增殖加快,细胞凋亡下降,对顺铂敏感性降低(P<0.01);miR-214-3p上调后EGR1在mRNA及蛋白水平表达升高,XPD蛋白降低;miR-214-3p下调使EGR1在mRNA及蛋白水平表达降低,XPD蛋白升高。结论miR-214-3p与卵巢癌细胞顺铂耐药有关,EGR1蛋白可能是miR-214-3p的下游靶点。
- 李艳黄萱肖兰张英陈颍石小燕
- 关键词：卵巢癌顺铂耐药
- ADH1B基因甲基化对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2022年
- 目的探讨乙醇脱氢酶1B(ADH1B)基因甲基化对卵巢癌(OC)细胞增殖及凋亡的影响。方法生物信息学方法比较ADH1B在卵巢癌与正常卵巢上皮组织中表达情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测卵巢癌与正常卵巢组织中ADH1B相对表达量,对比两种研究结果的一致性。两株卵巢癌细胞OV2008及C13K经不同浓度甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dc)干预48 h,CCK-8法检测5-Aza-dc对两株细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡形态学改变;甲基化特异性PCR(MSP)、qRT-PCR及Western blot法分别检测药物作用前后两株细胞株中ADH1B甲基化状态、ADH1B在mRNA及蛋白水平表达。结果生物信息学分析及qRT-PCR结果均显示卵巢癌中ADH1B表达量明显均低于正常卵巢组织;中、高浓度5-Aza-dc作用48 h后,两株细胞增殖受到抑制(P<0.01);高浓度5-Aza-dc作用后,两株细胞均出现典型细胞凋亡形态学改变;ADH1B在两株细胞中均呈完全甲基化,高浓度5-Aza-dc处理后,ADH1B甲基化被部分逆转,两株细胞ADH1B mRNA和蛋白表达均增加(P<0.01)。结论5-Aza-dc可下调卵巢癌细胞中ADH1B启动子区甲基化水平,使ADH1B基因重新表达,从而抑制卵巢癌细胞增殖与促进细胞凋亡。
- 季维雪孙磊江玉陈颍李泽莲李敏肖兰
- 关键词：甲基化卵巢癌
- Toll样受体免疫性作用在妇科肿瘤中的研究进展
- 2011年
- Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)属于模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs),能直接识别并结合病原微生物或宿主凋亡细胞表面的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),主要表达于固有免疫细胞表面尤其是巨噬细胞和树突状细胞,激活天然免疫,调节适应性免疫。研究表明TLRs可在各种肿瘤细胞表面表达,但它在肿瘤免疫中的具体作用机制还不清楚。对TLRs的深入研究有助于了解TLRs在肿瘤发病机制中的作用,为肿瘤的分子靶向治疗提供新的思路。
- 陈颍周家德
- 关键词：TOLL样受体妇科肿瘤天然免疫肿瘤免疫
- 肿瘤相关成纤维细胞与上皮性卵巢癌顺铂耐药性的研究被引量：4
- 2021年
- 目的探讨卵巢癌相关成纤维细胞(CAFs)对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响及其可能作用机制。方法收取上皮性卵巢癌及正常卵巢上皮组织各10例,分离纯化培养CAFs和正常卵巢成纤维细胞(NFs),免疫荧光法鉴定CAFs;收集CAFs或NFs培养上清液与卵巢癌SKOV3细胞建立间接共培养体系;CCK8法检测细胞增殖及顺铂毒性、划痕实验检测细胞迁移能力;DCFH-DA法测定共培养体系中活性氧(ROS)含量;qPCR及Western blot法检测共培养体系SKOV3细胞耐药相关基因YAP、CTGF和Cyr61在mRNA及蛋白水平表达。结果成功分离培养CAFs或NFs,免疫荧光结果显示CAFs中平滑肌激动蛋白-α(α-SMA)与成纤维细胞活化蛋白(FAP)表达阳性;SKOV3细胞与CAFs间接共培养后其增殖能力(P<0.001)、顺铂半数抑制浓度(IC50)(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)均较SKOV3细胞单独培养或与NFs共培养组增加,差异有统计学意义;CAFs共培养体系细胞中ROS含量增加(P<0.01),差异有统计学意义;CAFs共培养SKOV3细胞中耐药相关基因YAP(P <0.01)、CTGF(P<0.05)、Cyr61(P <0.01)在mRNA及蛋白水平较单独培养或与NFs共培养SKOV3中表达升高,差异有统计学意义。结论 CAFs可促进SKOV3细胞增殖、迁移,降低SKOV3细胞对顺铂敏感性。其机制一方面可能与ROS促进SKOV3细胞自噬相关;另一方面与卵巢癌细胞中耐药基因YAP、CTGF及Cyr61表达上调有关。
- 江玉孙磊张英陈颍张晓慧颜士杰肖兰
- 关键词：肿瘤相关成纤维细胞上皮性卵巢癌顺铂耐药
- 上皮性卵巢癌肿瘤大小的临床病理特征及预后分析被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨肿瘤大小与上皮性卵巢癌的临床病理特征及预后差异。方法:收集我院收治120例上皮性卵巢癌患者,其中早期患者42例,晚期患者78例。采用χ^2检验分析肿瘤大小与各临床病理因素的关系,运用Kaplan-Meier法及Log-rank检验进行生存分析。采用Cox比例风险模型进行单因素及多因素分析。结果:早期卵巢癌患者42例,肿瘤平均直径13.5cm,晚期卵巢癌患者78例,肿瘤平均直径7.8cm,差异具有统计学意义。肿瘤≥10cm组与肿瘤<10cm组在患者年龄、组织学类型和CA125水平无明显相关性(P>0.05),而与FIGO分期以及病理分级有明显相关性(P<0.001);肿瘤≥10cm卵巢癌组3年生存率40.4%,显著高于肿瘤<10cm卵巢组3年生存率18.1%,(P<0.05)。单因素及多因素分析显示肿瘤大小是上皮性卵巢癌预后的独立影响因素。结论:肿瘤大小可作为卵巢TNM分期的重要补充,为评估卵巢癌预后提供重要参考价值。
- 陈颍李泽莲江玉张英颜士杰肖兰
- 关键词：卵巢上皮性肿瘤肿瘤大小临床病理特征预后
- FAT4的表达对人卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：5
- 2019年
- 目的研究FAT4在上皮性卵巢癌组织中表达及其对人上皮卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用免疫组化方法检测上皮性卵巢癌及正常卵巢上皮组织FAT4蛋白表达。FAT4-siRNA转染人上皮卵巢癌细胞A2780、qRT-PCR和Western blot方法检测FAT4基因沉默效果,CCK-8及Transwell实验分析FAT4基因敲除后细胞增殖及侵袭能力的改变。结果上皮性卵巢癌组织中FAT4为胞质和核分布,明显高于正常卵巢上皮组织(P<0.01),FAT4表达与患者年龄、月经情况和病理类型无明显相关性(P>0.05),而与上皮性卵巢癌肿瘤大小(P=0.020)、FIGO分期(P=0.002)以及病理分级(P=0.029)有明显相关性(P<0.05);FAT4干扰可显著抑制人卵巢癌细胞A2780增殖及侵袭能力(P<0.01)。结论FAT4高表达与肿瘤临床分期及分化程度相关,体外实验证实FAT4与卵巢癌细胞增殖及侵袭相关,为上皮性卵巢癌治疗提供了新的靶点。
- 陈颍周家德颜士杰肖兰
- 关键词：增殖上皮性卵巢癌
- Toll样受体9在宫颈癌细胞中的表达及抗凋亡作用被引量：2
- 2015年
- 目的研究宫颈癌Hela细胞中Toll样受体9(TLR9)的表达情况及TLR9对宫颈癌Hela细胞抗凋亡能力的影响,寻求宫颈癌免疫治疗的新途径。方法体外培养宫颈癌Hela细胞株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hela细胞中TLR9mRNA的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测不同浓度人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对Hela细胞生长抑制情况;流式细胞术(FCM)检测Cp G-ODN预刺激对Hela细胞抗TRAIL诱导凋亡能力的影响。结果 1TLR9 mRNA在Hela细胞中表达,应用Cp G-ODN刺激24 h后,TLR9 mRNA的表达增加,与PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。2MTT比色法检测显示,TRAIL蛋白可抑制Hela细胞生长,随着TRAIL蛋白浓度增加,抑制率增加。并且计算半抑制浓度IC50(223.092±3.850)ng/m L。3流式细胞术检测显示,TLR9特异性激动剂Cp G-ODN刺激Hela细胞后,TRAIL诱导细胞凋亡率为(15.32±2.46)%,与无Cp G-ODN预刺激组[(43.49±2.04)%]相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR9特异性激动剂Cp G-ODN能够增强Hela细胞抵抗TRAIL诱导的细胞凋亡能力,提示TLR9在肿瘤的恶性进程中发挥作用,为宫颈癌的免疫治疗提供新的思路。
- 陈颍周家德
- 关键词：宫颈癌HELA细胞TOLL样受体9CPG-ODN
- PI3K信号通路介导的Cyr61表达对卵巢上皮性癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞增殖和凋亡中磷脂酰肌醇3激酶（P13K）信号通路与富半胱氨酸蛋白61（Cyr61）的关系。方法对卵巢癌细胞株OV2008及OVCAR-3用人重组Cyr61（rhCyr61）预处理，并分组：阴性对照组（不进行rhCyr61预处理）、rhCyr61预处理组（100ng/ml rhCyr61预处理24h），分别再用P13K信号通路抑制剂——LY294002（20umol／L）干预24h。激光共聚焦显微镜检测Cyr61蛋白的表达；流式细胞仪、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法分别俭测细胞凋亡率、细胞存活率、Cyr61mRNA及蛋白激酶B（PKB）、磷酸化PKB、Cyr61蛋白的表达。结果rhCyr61预处理组OV2008、OVCAR-3细胞凋亡率减少，分别为（1．4±0．9）％和（2．1±1．0）％，与各自的阴性对照组的（4．0±1．1）％、（3．8±1．3）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；细胞存活率明显增加，分别达（124．0±1．8）％和（133．0±2．2）％，与各自的阴性对照组的（95．0±2．2）％、（97．0±1．8）％比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；细胞中磷酸化PKB、Cyt61蛋白的表达均增加。LY294002干预后，rhCyr61预处理组OV2008、OVCAR-3细胞凋亡率明显增加，分别达（21．1±1．6）％和（26．4±1．5）％，与各自相应的阴性对照组细胞凋亡率（5．4±0．7）％和（5．8±0．7）％比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；rhCyr61预处理组OV2008、OVCAR-3细胞存活率分别为（59．0±2．3）％和（51．0±2．0）％，相比较于各自的阴性对照组的（95．0±2．2）％和（97．0±1．8）％，差异均有统计学意义（P〈0．01）；细胞中Cyr61mRNA的表达水平降低，OV2008细胞降至3．2±0．8、OVCAR-3细胞为6．2±1．1，与各自相应的阴性对照组（分别为0．9±0．5、1．5±0．6）比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；细胞中磷酸化PKB及Cyr
- 肖兰何婵李欣陈颍周家德
- 关键词：1-磷脂酰肌醇3-激酶细胞增殖
