高霞
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- N24p55γPI3K靶向抑制胃癌细胞增殖的研究被引量：15
- 2006年
- 目的探讨P13K的调节亚基p55γN端24个氨基酸-N24p55γP13K对胃癌细胞系MKN-28增殖及细胞周期的影响。方法通过免疫沉淀及Western blot检测胃癌细胞系MKN-28中Rb家族蛋白(p130/107,p110)和p55γP13K蛋白的表达。采用脂质体转染的方法,将质粒N24p55-GFP导入MKN-28,通过流式细胞仪分析细胞周期,通过BrdU掺入法,激光共聚焦及流式检测Cyclin D1,Cyclin A的表达以观察其对细胞增殖的影响。结果胃癌细胞系MKN-28含有Rb家族蛋白p130/107而无p110,也含p55γP13K蛋白,且p130/107与p55γP13K相结合。与对照质粒pEGFP-C1相比,转染了N24p55-GFP的MKN-28细胞增殖受抑制,G_0/G_1期增加,S期减少,Cy- clin D1和Cyclin A的表达明显降低。结论这种新的N24P55γP13K调节亚单位可通过p130/p107途径阻滞细胞周期进程,抑制细胞增殖,从而为胃癌的基因治疗提供了一个新的分子靶点。
- 王晶刘双又高霞罗学来夏献民陶德定龚建平胡俊波
- 关键词：胃癌磷脂酰肌醇-3激酶细胞周期DNA合成
- Cyclin B1的表达与结直肠癌病理学特征的相关性
- 2007年
- 目的探讨结直肠肿瘤中人类主要细胞周期蛋白Cyclin B1的表达与结直肠肿瘤病理学特征的相关性。方法用流式细胞术双参数标记法及免疫组织化学方法检测66例结直肠肿瘤标本的细胞周期素Cyclin B1表达,分析Cyclin B1的表达高低与结直肠肿瘤细胞分化程度,肿瘤细胞浸润深度以及淋巴结转移的相关性。结果Cyclin B1表达的高低与结直肠肿瘤的细胞分化程度相关(P<0.05),而细胞浸润深度,以及淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论Cyclin B1高表达的结直肠肿瘤中细胞明显高分化,随着Cyclin B1表达变化至Cyclin B1低无表达时,结直肠肿瘤中细胞呈明显低分化趋势。
- 龙浩成高霞许三鹏何小军夏耘胡俊波龚建平
- 关键词：CYCLINB1结直肠肿瘤流式细胞术
- 绿色荧光蛋白细胞的保存及细胞周期分析被引量：3
- 2007年
- 目的探讨在绿色荧光蛋白（GFP）质粒转染后的细胞中，既能最大限度地保存GFP阳性细胞又有利于细胞周期分析的固定方法。方法以胃癌MKN-28和乳腺癌MCF-7细胞为模型，脂质体Lipofectamine2000转染细胞，转染后的细胞分别用：①80％乙醇固定；②0．1％、0．25％、0．5％和1．0％的多聚甲醛固定；③0．1％、0．25％、0．5％、1．0％多聚甲醛4℃固定30min后再用80％乙醇固定等3种方法固定细胞，然后用含0．1％triton的PI染色，在流式细胞仪上检测GFP的自发绿色荧光及行细胞周期分析。结果单纯乙醇固定的细胞中GFP均消失。单纯0．25％～1．0％的多聚甲醛固定后的细胞不能得到有效的DNA直方图，单纯0．1％的甲醛固定的细胞虽可得到良好的直方图，但PI染液中的triton破坏了大部分的GFP。先甲醛再乙醇固定的细胞中，0．5％～1．0％的甲醛可较好地防止乙醇和triton对绿色荧光蛋白的破坏作用，保留下2／3的GFP阳性细胞，0．5％的甲醛固定的细胞可得到CV值〈8％的G0／G1期峰，而1．0％甲醛固定后的细胞CV值〉8％。结论在GFP质粒转染后的细胞中，先用0．5％的多聚甲醛固定细胞30min后再用乙醇固定，既能最大限度地保存GFP，又可得到CV值良好的DNA直方图。若不考虑保留GFP，或普通细胞作细胞周期分析时，单纯0．1％的多聚甲醛固定细胞，即可得到与传统的单纯乙醇固定细胞相似的CV值很小的DNA直方图。
- 刘双又李小兰肖薇陶德定罗学来高霞胡俊波龚建平
- 关键词：绿色荧光蛋白流式细胞术细胞周期多聚甲醛
- 信号传导途径p55PI3K-Rb在胃肠道肿瘤中的表达及意义被引量：10
- 2006年
- 目的检测磷脂酰肌醇3激酶-视网膜母细胞瘤基因(p55PI3K-Rb)信号传导途径在胃肠道正常组织、癌旁组织及癌组织中的表达,并阐述其意义。方法收集20例胃肠道肿瘤患者(胃癌6例,结肠癌5例,直肠癌9例)手术切除标本,每例均包括癌组织、相应的癌旁组织及正常组织。应用免疫沉淀(Rb单克隆抗体)和Western blot方法(p55PI3K多克隆抗体)检测p55PI3K与Rb在组织中的相互作用。结果8例胃肠道肿瘤标本(胃癌2例,结肠癌2例,直肠癌4例,均为腺癌)Rb与p55PI3K相互作用为阳性,阳性率为40%(8/20),且正常组织、癌旁组织及癌组织三者之间p55PI3K-Rb作用强弱差异无显著性意义(P>0.05)。结论在胃肠道肿瘤形成过程中,p55PI3K-Rb信号传导通路是存在的。通过阻断p55PI3K-Rb通路可能阻断肿瘤的发生,有望为临床胃肠道肿瘤的治疗开辟一条新的途径。
- 高霞龙浩成刘双又罗学来李小兰陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：磷脂酰肌醇3激酶视网膜母细胞瘤基因胃肠道肿瘤
- 磷脂酰肌醇-3激酶上的一段多肽对Jurkat细胞的周期阻滞作用被引量：8
- 2005年
- 刘双又王晶高霞罗学来谢大兴冯永东陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：JURKAT细胞磷脂酰肌醇-3激酶多肽视网膜母细胞瘤蛋白调节亚基RB蛋白
