刘俊平
- 作品数：12 被引量：50H指数：4
- 供职机构：上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海出入境检验检疫局科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 小鼠肝炎病毒核酸快速检测方法的建立和应用被引量：11
- 2013年
- 为满足口岸对入境噬齿类动物快速检疫的需要,建立小鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus,MHV)快速核酸检测方法。方法使用引物和TaqMan荧光探针设计软件,针对MHV保守基因设计引物和探针,建立了RT-PCR和Real-time RT-PCR方法检测噬齿类动物临床样本中MHV的方法。结果本研究建立的RT-PCR和Real-time RTPCR检测MHV方法具有良好的特异性和敏感性,通过将建立的方法应用于MHV阳性鼠临床样品的检测,证实两种MHV核酸检测方法具有良好的稳定性。结论本研究建立的RT-PCR和Real-time RT-PCR检测MHV的方法,适用于动物粪便、尿液等易于获得样本的检测。
- 熊炜蒋静张强刘俊平魏晓锋黄忠荣李健胡建华
- 关键词：小鼠肝炎病毒RT-PCRREAL-TIMERT-PCR
- 进口奶牛中主要原虫病的疫情调查被引量：4
- 2008年
- 随着我国人民生活水平的提高．人均牛奶消费量不断提升．奶业对国民经济的贡献和保障人民健康方面越来越重要。尤其随着西部开发的加快．大量国外优质种牛被引入国门，但同时由于对外条款项目的不足．目前很少进行寄生虫检测．国外普遍存在的某些寄生虫就可能随之传入国境．对我国畜牧业和人类健康带来一定的威胁．因而奶牛寄生虫病的检测已经受到越来越多的关注。
- 李健刘俊平王巧全王权熊炜黄忠荣胡永强
- 关键词：进口奶牛疫情调查原虫病寄生虫病人民健康
- 仙台病毒核酸快速检测方法的建立和应用被引量：3
- 2014年
- 仙台病毒(Sendai virus,SeV)是一种常见的可引起啮齿类动物呼吸道疾病的病原,感染迅速,并且隐性感染率高,一旦感染较难从鼠群中清除,从而影响动物健康。为满足对入境噬齿类实验动物和野生动物仙台病毒快速检测的需要,本研究针对SeV编码基质蛋白和融合糖蛋白基因的保守序列设计引物和荧光探针,建立了仙台病毒RT-PCR和Real-time RT-PCR检测方法。将建立的方法应用于仙台病毒感染鼠不同临床样品和组织培养物的检测,证实两种核酸检测方法具有良好的特异性、灵敏性和稳定性,适合应用于出入境口岸实验和野生噬齿类动物仙台病毒疫情的快速检测。
- 熊炜林颖峥魏晓锋郭雨燕张强刘俊平李健胡建华黄忠荣
- 关键词：仙台病毒REAL-TIMERT-PCRTAQMAN探针
- 液相芯片分型检测猪传染性胸膜肺炎的研究
- 李树清王艳王巧全张强杜军陈志飞刘俊平李健
- 主要技术指标：1.可同步检测App血清1至血清7型抗体的方法，整个反应可在3小时内完成。2.检测猪蓝耳病、猪圆环病毒、猪副猪嗜血杆菌、猪支原体肺炎、猪口蹄疫、猪传染性胃肠炎、猪布氏杆菌病、猪弓形体、猪链球菌阳性血清，均为...
- 关键词：
- 关键词：胸膜肺炎
- 高效液相色谱/四极杆-飞行时间质谱测定神经性贝毒被引量：12
- 2004年
- 采用高效液相色谱/四极杆 飞行时间质谱(HPLC/Q TOFMS)联用技术对贝类样品中的短裸甲藻毒素PbTx 2进行了检测研究。样品经丙酮提取、C18小柱净化后,用ZorbaxXDB C18色谱柱(2 1mmi.d.×150mm,3 5μm)进行分离,流动相为甲醇 水(体积比为85∶15)溶液(含0 5mmol/LNH4Ac),流速0 20mL/min。电喷雾正离子模式,选择质子化PbTx 2分子离子[M+H]+作为前体离子进行TOFMS扫描、测定。结果表明,样品的平均加标回收率为91%～94%,相对标准偏差(RSD)为11%～12%,定量检测限为0 1μg/g,检测限为0 5ng(S/N=3)。由于Q TOFMS具有高分辨率,能进行精确质量测定而不降低灵敏度,因此该方法可作为确证分析方法。
- 方晓明唐毅锋刘俊平
- 关键词：高效液相色谱
- 检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立
- 针对猪圆环病毒2型ORF2的序列设计两对特异性引物及TaqMan探针,以猪圆环病毒2型的PK-15细胞培养物的DNA提取物为模板,分别扩增499bp和131bp的片段,成功建立了检测猪圆环病毒2型的TaqMan荧光PCR...
- 刘俊平陶琦单松华庄金山孙志张建武袁世山
- 文献传递
- 化妆品SIRC细胞短时暴露法试验被引量：8
- 2008年
- 邱璐李小林刘俊平蒋静熊炜李健中村 牧山口 能宏
- 关键词：眼刺激试验STE细胞生存率
- 双夹心ELISA检测猪传染性胸膜肺炎血清2型抗体方法的建立被引量：1
- 2009年
- 用胸膜肺炎放线杆菌血清2型(1536)菌液与弗氏不完全佐剂等体积混合乳化后免疫大白兔,制备兔高免血清,提纯抗体,建立检测猪传染性胸膜肺炎血清2型抗体的双夹心ELISA方法。方阵滴定确定最佳反应条件:包被纯化的兔抗App血清2型抗体为9.375μg/mL,抗原稀释度为1∶1 600,HRP-兔抗猪IgG稀释度为1∶20 000。特异性与敏感性试验结果表明,双夹心ELISA方法特异性好、敏感性高,与猪O型口蹄疫、猪传染性胃肠炎、蓝耳病等阳性血清以及App其他血清型阳性血清无交叉反应。检测样品结果与阻断ELISA比较,其相符率为99.54%,表明双夹心ELISA可用于猪传染性胸膜肺炎血清2型抗体的检测。
- 杜军张强李树清王巧全刘俊平王艳岳城
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎血清2型双夹心ELISA
- 检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立被引量：7
- 2007年
- 针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2的序列设计两对特异性引物及TaqMan探针,以感PCV2的PK-15细胞培养上清的DNA提取物为模板,分别扩增499 bp和131 bp的片段,建立了检测PCV2的TaqMan荧光PCR方法。结果表明:TaqMan荧光PCR检测PCV2的最佳探针浓度为0.5 pmol·μL-1;TaqMan荧光PCR两步法操作快捷,扩增131 bp的引物PCF1101/PCR1232检测敏感性高(3.17×102拷贝·μL-1),重复性好。在诸多检测样品中,除检测到PCV2检测指标出现阳性外,猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV),日本乙型脑炎病毒(JEV),猪伪狂犬病毒(PRV),猪瘟病毒(CSFV)及PK-15细胞等检测指标均为阴性,表明特异性强;与普通PCR的检测结果(2/10)比较,本法的敏感性和对临床样品的阳性检出率(3/10)更高。上述研究表明,本方法快速、敏感、特异,具有很高的重复性,且可实时监测,能有效检测PCV2。
- 刘俊平庄金山孙志张建武陶琦袁世山
- 关键词：猪圆环病毒2型TAQMAN荧光PCR
- 体外胞质分裂阻滞微核试验和体外染色体畸变试验检测甲基硝基亚硝基胍（MNNG）遗传毒性研究
- 目的应用体外胞质分裂阻滞法微核试验和体外染色体畸变试验研究MNNG的遗传毒性,并探讨其剂量效应关系,研究体外微核和染色体畸变试验应用于化学物遗传毒性检测的可行性。方法应用MTT试验检测不同浓度MNNG对CHL,细胞生存率...
- 李小林邱璐蒋静刘俊平李健熊炜卞俐娜
- 关键词：MNNG体外微核遗传毒性
- 文献传递
