刘海波
- 作品数：23 被引量：74H指数：5
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- miR-125a-5p在不同分化程度结直肠癌中表达水平的研究
- 2014年
- 目的 分析研究miR-125a-5p在不同分化程度结直肠癌（CRC）中的表达水平,探讨其对不同分化CRC的诊断意义.方法 采用实时荧光定量PCR分析miR-125a-5p在26例不同分化程度CRC患者肿瘤和瘤旁组织中的表达水平,比较miR-125a-5p在肿瘤和瘤旁组织中表达水平的差异.通过受试者特征曲线（ROC）分析miR-125a-5p作为诊断标志筛查CRC患者的特异性和敏感性.结果 相对瘤旁正常组织,miR-125a-5p在高、中分化CRC组织中的表达水平均明显下降,其中在高分化肿瘤样本中的表达水平下降了近300％（P=0.047）,在中分化CRC中下降超过500％（P=0.000）.miR-125a-5p对筛查中分化CRC具有较高的敏感度和特异度,分别达到80.00％、90.00％.结论 不同分化程度CRC中miR-125a-5p表达水平均明显下降,提示miR-125a-5p在CRC的分化发展中具有重要作用.miR-125a-5p具有作为CRC临床筛查指标的潜能.
- 吴小兵徐学虎伍尚标江庆萍刘海波陈戎孙嫣
- 关键词：结直肠肿瘤分化程度
- Turner综合征羊水干细胞的分离及特征被引量：1
- 2013年
- 背景:羊水干细胞的分离培养及生物学特性相关研究取得了明显进展,但未见45,X/46,XX(Turner综合征)羊水细胞建系的报道。目的:建立体外培养人羊水来源干细胞的方法,初步探讨羊水干细胞的生物学特性。方法:孕中期羊膜腔穿刺获得1例染色体核型异常(45,X/46,XX)羊水标本,采用梯度稀释后低密度种植的方法获得羊水干细胞,体外传代培养,倒置显微镜观察细胞的贴壁生长情况,细胞染色体检查确认核型,流式细胞仪检测羊水干细胞特异性表面标志和细胞周期,进行成骨诱导分化及碱性磷酸酶染色和茜素红染色鉴定。结果与结论:羊水干细胞在体外培养体系中增殖迅速,核型为45,X/46,XX,流式细胞仪检测羊水干细胞表达CD29、CD44、CD90和CD105间充质干细胞表面标志,不表达造血干细胞标志CD45和CD34;大部分细胞处于G1期,增殖能力强。羊水干细胞经成骨诱导分化后,碱性磷酸酶染色和茜素红染色阳性。结果可见该实验成功分离获得45,X/46,XX(Turner综合征)羊水干细胞,其增殖能力强,表现间充质干细胞的特性。
- 龚余骆玉梅田霖刘海波陈欣洁孙筱放陈耀勇
- 关键词：干细胞TURNER综合征羊水细胞染色体核型成骨分化
- miR-145下调与结直肠癌上皮间叶转化的分子机制探讨被引量：1
- 2013年
- 目的:研究miR-145通过靶向调节目的基因对结直肠癌(CRCs)上皮间叶转化(EMT)的影响。方法:通过实时荧光定量PCR检测不同进展CRC肿瘤患者组织样本,验证miRNA差异表达;利用划痕实验检测多株CRC细胞株过表达miR-145后细胞的转移能力;通过Western blot检测过表达miR-145后细胞EMT相关分子标志表达变化;结合生物信息学、Luciferase报告系统以及Western blot预测并验证miR-145的靶基因。结果:miR-145在高转移预后差的CRC肿瘤组织中表达明显上调,且过表达miR-145后CRC细胞株转移能力明显降低,间叶细胞多种分子标志显著下调,而上皮细胞多种分子标志显著上调,其转移能力明显降低。生物信息学预测microRNA靶基因以及实验证实miR-145可以直接靶向调节TGFBR2蛋白表达,是TFG-β信号通路的主要受体及信号分子。结论:miR-145直接靶向调节TGFBR2影响TFG-β通路,抑制EMT过程,进而抑制肿瘤的侵袭和转移。过表达miR-145能够抑制CRC细胞的转移。miR-145是临床诊断CRC的新靶标,对CRC的防治及预后分析具有潜在的临床意义。
- 全天一李伟明朱秋玲江庆萍孙嫣刘海波徐学虎
- 关键词：结直肠肿瘤MIR-145
- 输卵管结扎术对体外受精-胚胎移植临床结局的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨输卵管结扎手术对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的影响。方法:回顾性分析2008年1月至2011年4月因输卵管性不孕症于广州医科大学第三附属医院生殖医学中心行IVF-ET的516例患者的临床资料。A组(32l例):既往经子宫输卵管造影或腹腔镜检查证明有双侧输卵管阻塞,未进行任何处理直接行IVF-ET;B组(179例):曾开腹或腹腔镜下行双侧输卵管结扎;C组(16例)曾开腹或腹腔镜下行单侧输卵管结扎。分别比较3组Gn启动量、Gn总量、超排天数(Gn天数)、HCG日内膜厚度、HCG日直径>15 mm的卵泡数、HCG日E2值,获卵数、受精率、2PN率、>2PN率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、胚胎种植率。结果:与A组比较,B组Gn启动量和总量增加(P<0.05);其余指标比较,差异无统计学差异(P>0.05)。结论:双侧输卵管结扎增加了IVF-ET患者促排卵时Gn启动量、Gn总量,但对其他临床指标无影响。
- 王慧慧刘海波陈蕊刘见桥龙晓林
- 关键词：输卵管结扎体外受精-胚胎移植促排卵妊娠
- 应用QF-PCR技术快速诊断胎儿染色体非整倍体异常
- 李少英刘海波何文智马晓燕冼嘉嘉王燕超黎青
- 广东汉族人群H19基因上游差异甲基化区SNP被引量：1
- 2016年
- 目的 调查广东汉族人群中H19基因上游差异甲基化区（differentially methylated region,DMR）的单核苷酸多态性（SNP）及单倍型.方法 应用PIA分型法,以限制性内切酶McrBC、HpaⅡ消化基因组DNA分别获得个体单亲源DNA模板链,经测序,分别获得个体H19基因上游DMR单亲源SNP等位基因、基因型及单倍型数据.结果 共检出13个SNP（rs10840167、rs2525883、rs12417375、rs4930101、rs2525882、rs2735970、rs2735971、rs11042170、rs2735972、rs10732516、rs2071094、rs2107425、rs4930098）及1个突变点（g7351c）.所有位点经统计学分析均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0.05）.除rs12417375位点DP值为0.279,其余12个SNP DP值在0.446~0.614;g7351c突变点DP值为0.013,提示为南方汉族民族特异性位点.共检出8种单倍型（命名为单倍型1~8）,其中有3种为新发现的单倍型,其DP、PIC、PE及H分别为0.891、0.714、0.524和0.758.结论 PIA分型法获得的H19基因上游DMR SNP位点及其单倍型遗传标记系统具有较高的鉴别能力,在法医学鉴定中具有较好的实用价值.
- 马晓燕何文智袁天丽冼嘉嘉王晓蔓李少英刘海波黎青
- 关键词：法医遗传学DNA甲基化
- 血浆miR-1290在结直肠癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的:研究miR-1290在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者及健康体检者血浆中的表达差异,并探讨其与临床特征之间的关系.方法:采用实时荧光定量PCR检测检测219例CRC患者及年龄、性别相匹配的45例健康体检者血浆中miR-1290的表达情况,分析其与临床特点之间的关系.结果:在健康体检者与CRC患者两组中,CRC组血浆中miR-1290表达量增高,有统计学意义(P<0.05);以年龄分组(≥60岁,<60岁),高龄组人群中血浆miR-1290的表达水平较低龄组增高,有统计学意义(P<0.05);以性别(男、女)分组,血浆miR-1290的表达水平变化无统计学意义(P>0.05).结论:miR-1290在CRC患者血浆中表达上调,其高表达与CRC的分期相关,有望成为CRC诊断及治疗的指标之一.
- 徐学虎李勇江庆萍陈戎李志发刘海波黎淑玲伍尚标
- 关键词：MIRNA结直肠癌血浆生物标志物
- 人脂肪干细胞的分离培养与生物学特性被引量：19
- 2012年
- 背景:高效、稳定地获得大量较高纯度的人脂肪干细胞,是其在组织工程学及再生医学中广泛应用的基础和前提。目的:探索体外培养脂肪干细胞的适宜条件,从而提高其增殖能力。方法:采用胶原酶消化的方法,从人腹部皮下块状脂肪中分离出脂肪干细胞,经贴壁筛选法纯化细胞、低糖培养基体外培养扩增。Giesam染色后观察细胞形态;绘制细胞生长曲线并进行细胞周期分析,观察分析传代后染色体核型改变;选取第3代脂肪干细胞做流式细胞鉴定、EdU细胞增殖能力检测以及克隆形成实验。结果与结论:分离培养的原代脂肪干细胞形态不一,经传代后的细胞形态趋于长梭形,排列紧密呈漩涡状生长。细胞生长曲线呈S形,细胞周期分析及EdU掺入法结果显示体外培养的脂肪干细胞具有较强的增殖能力。经染色体核型分析结果提示,体外培养不会引起脂肪干细胞的核型改变。第3代脂肪干细胞经流式细胞仪检测CD29,CD44,CD90,CD105均呈阳性表达,而CD34和CD45呈阴性;克隆形成率为8.8%;在一定的诱导条件下,脂肪干细胞能够向脂肪细胞及成骨细胞分化。结果说明采用胶原酶消化法可成功分离培养人脂肪干细胞,且具有较强的增殖能力。
- 田霖孙筱放刘海波骆玉梅陈欣洁黄东健
- 关键词：人脂肪干细胞染色体核型生物学特性
- 229例流产绒毛染色体核型分析及两种长期培养方法比较被引量：7
- 2014年
- 目的:探讨早期自然流产绒毛染色体核型分析在自然流产病因检测中的应用价值,并比较两种长期培养方法的差别。方法:选择孕早期自然流产的孕妇229例,在无菌条件下,从宫腔内取出绒毛,同时或单独经胰酶消化法与切碎贴壁法进行细胞培养,传代之后常规进行G显带,在显微镜下做核型分析。结果:229例流产胎儿绒毛,培养成功206例,成功率为89.96%。异常核型105例,异常率为50.97%,数目异常者101例,占异常核型的96.19%,以16三体最为多见。胰酶消化法的培养成功率及收获时间都显著优于直接贴壁法,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:自然流产绒毛染色体核型分析对流产查因具有实用价值。胰酶消化法较切碎贴壁法对流产绒毛长期培养及染色体核型分析更具实用性。
- 刘海波王慧慧郑育红王鼎孙筱放
- 关键词：自然流产绒毛染色体核型分析细胞培养
- 三核苷酸重复引物PCR和甲基化特异性多重连接探针扩增技术在脆性X综合征产前诊断中的应用被引量：4
- 2017年
- 目的探讨脆性X综合征(FXS)产前基因诊断的方法。方法采用三核苷酸重复引物PCR法(TP-PCR)及甲基化特异性多重连接探针扩增技术(MS-MLPA)检测2个FXS家系及30例正常对照胎儿样本FMR1基因CGG重复数、AGG排布及FMR 1基因Cp G岛甲基化状态。结果正常对照FMR1基因(CGG)n重复数介于23~40之间,频数最大的重复数为29,AGG排布式以9A9A9最为常见。2个FXS家系中前突变等位基因向子代遗传过程中均发生了CGG扩展。正常对照及前突变携带者FMR1基因Cp G岛均为低甲基化状态,全突变患者Cp G岛为高甲基化状态。结论 TP-PCR和MS-PCR联合应用能够检出胎儿FMR1基因CGG重复数和Cp G岛甲基化状态,从而判断胎儿是否为脆性X综合征患儿,为优生干预提供可靠的依据。
- 何文智李少英王晓蔓王燕超马晓燕冼嘉嘉刘海波王鼎黎青
- 关键词：产前基因诊断
