左建民
- 作品数：24 被引量：115H指数：6
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 系列鼠抗CD分子单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆和序列分析
- 2002年
- 目的 获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序。方法 采用RT－PCR技术，从WuT4、WUT3、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变区基因，进行克隆并作核苷酸序列分析。结果 以上几种抗体的轻重链可变区的 PCR产物大小均为 400bp左右，成功构建了pMD18－T－VL和 pMD18－T－VH克隆载体，经限制性酶切分析，其大小与预期结果相符，并按ABI PRLSM BigDye系统测序。结论 经与Kabat、Blast抗体基因同源数据库比较，所获基因片段均为抗体基因。
- 张爱华闭兰王志友张囡左建民赵良沈韬周玉柏孙可芳金玉玲陈敬史良如
- 关键词：CD分子单克隆抗体可变区基因基因克隆
- 去除致癌基因的EB病毒潜伏膜蛋白1的重组腺病毒的构建及其免疫效果被引量：1
- 2003年
- 为进一步研究利用EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)进行免疫治疗的可行性,构建了含有去除致癌基因的EB病毒LMP1片段(LMP1△)的穿梭质粒pAdTrack CMV LMP1△,将它与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1用电转染的方法共同导入大肠杆菌BJ5183中,在宿主菌重组酶的介导下进行同源重组。通过抗性筛选,获得含有重组腺病毒基因的质粒;然后再通过脂质体将重组腺病毒质粒导入腺病毒包装细胞HEK293细胞中,在HEK293细胞E1蛋白的反式作用下,病毒被包装。将包装病毒的细胞裂解上清进行PCR鉴定证实,病毒DNA中含有目的基因的特异性片段。RT PCR证明了外源基因在真核细胞中得以转录,免疫酶和Westernblot的结果也显示,LMP1△蛋白在真核细胞得到表达。将扩增后的病毒感染HeLa细胞,测定病毒滴度为3.0×109PFU/ml。为初步探讨其免疫效果,采用肌肉注射和滴鼻的方式感染Balb/c纯系小鼠,免疫酶检测其特异性抗体,LDH法检测特异性CTL的杀伤作用,结果发现,两种免疫途径均可诱发小鼠针对LMP1的特异性体液免疫和细胞免疫,而且Ad5作为免疫对照组的小鼠则没有引起相应的免疫反应。
- 贾俊岭周玲左建民王琦曾毅
- 关键词：致癌基因EB病毒潜伏膜蛋白1重组腺病毒免疫效果
- EB病毒潜伏膜蛋白2的研究回顾被引量：1
- 2003年
- 左建民周玲曾毅
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白2免疫抑制肿瘤免疫治疗
- 含密码子优化型HIV-1 gp120基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究被引量：4
- 2004年
- 目的 构建能表达野生型和密码子优化型人免疫缺陷病毒Ⅰ型 (HIV 1)B亚型中国流行株gp12 0基因的非复制型腺病毒。方法 按哺乳动物细胞偏好的密码子对HIV 1B亚型中国流行株Chgp4 2的gp12 0基因进行优化 ,合成优化基因。将野生型和密码子优化的gp12 0基因插入穿梭质粒 ,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共转化E coliBJ5 183,获得重组子 ,转染 2 93细胞后获得重组病毒。分别以两种重组腺病毒疫苗免疫小鼠 ,ELISA检测小鼠血清中的特异性抗体 ,乳酸脱氢酶法检测小鼠细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)反应。结果 获得两株重组腺病毒rAd wt gp12 0和rAd mod gp12 0 ,能正确表达Gp12 0。rAd mod gp12 0比rAd wt gp12 0蛋白表达水平明显提高。重组腺病毒免疫小鼠后能产生HIV 1特异性的抗体及CTL反应 ,rAd mod gp12 0组明显优于rAd wt gp12 0组。结论 成功构建了表达野生型和密码子优化的HIV 1gp12 0基因的重组腺病毒 ,能诱导HIV 1特异性体液和细胞免疫反应。
- 冯霞余双庆陈国敏左建民周玲曾毅
- 关键词：HIV-1GP120重组腺病毒免疫效果
- 含EBV-LMP2基因重组腺病毒修饰的树突状细胞疫苗体内外特异性抗瘤作用的研究
- 2005年
- 左建民周玲杜海军付华王琦曾毅
- 关键词：重组腺病毒LMP2CTL树突状细胞抗原呈递细胞
- 首次从新疆的蜱和病牛血清分离到新环状病毒被引量：14
- 1992年
- 1990年3～8月从新疆北部和西部地区采集全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)、银盾革蜱(Dermacentor niveus)、森林革蜱(D.silvarum)、边缘革蜱(D.marginatus)、草原革蜱(D.nuttalli)、刻点血蜱(Haemaphysalis punctata)、残缘璃眼蜱(Hyalomma detritum)等共2132只,分离病毒17株;采集病牛血清3份,分离病毒1株。从两地区共分离病毒18株。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科(Togaviridae)、黄病毒科(Flavirdae)、布尼亚病毒科(Bunyavirdae)某些病毒的免疫腹水及免疫血清都不发生反应。与新环状病毒(BANNA)的免疫腹水、免疫血清及酶标单克隆抗体(McAb)发生反应,中和指数为4.22～5.03。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径为63～69nm,核衣壳直径为49～54nm。超薄切片在感染细胞中见到大量颗粒状包涵体,磷钨酸负染可见到排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。新分离的病毒对酸、氯仿、胰蛋白酶及热敏感;抵抗乙醚和5-碘脱氧尿苷。该病毒可引起白纹伊蚊(Aedes albopictus)传代细胞 C_6l_(36)细胞收缩、融合、脱落及颗粒增多等病变;感染传代细胞Vero株及BHK-21株未见明显的细胞病变。感染2～4日龄乳小白鼠及2～4周龄小白鼠,均无明显发病症状。初步鉴定证实,新分离病毒属新环状病毒(BANNA)。
- 李其平谢杏初郅琦马丽刘永德乌守巴特.党正阿不力克木.阿布都热西提也尔肯.哈山张云君王诚斯拉木江.哈马太于心叶瑞玉梁国栋何英赵子江陈伯权徐普庭左建民
- 关键词：牛病
- 抗四个型登革病毒单克隆抗体的研制及在诊断和抗原分析中应用
- 左建民
- 关键词：登革病毒单克隆抗体抗原分析
- 含HIV-1 gp120基因的重组腺相关病毒和重组腺病毒疫苗联合免疫的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨含HIV 1gp12 0基因的重组腺相关病毒 (rAAV)和重组腺病毒 (rAdV)疫苗在BALB c小鼠中联合免疫的效果。方法 将密码子优化的HIV 1gp12 0基因分别插入腺相关病毒(AAV)和腺病毒 (AdV)载体质粒 ,构建含该基因的rAVV和rAdV载体疫苗。将两种疫苗以不同的联合方式免疫BALB c小鼠 ,ELISA检测小鼠血清中的gp12 0特异性抗体 ,细胞内细胞因子染色法检测小鼠的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)应答。结果 两种重组病毒均可表达目的基因gp12 0 ;在小鼠体内两种重组病毒联合免疫可诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应 ,但用rAAV初免 2次 ,再用rAdV加强 3次所诱发的CTL和血清IgG反应最强。
- 冯霞余双庆陈国敏吴小兵左建民董温平周玲曾毅
- 关键词：GP120联合免疫HIV-1重组腺相关病毒载体疫苗抗体反应
- EBV-LMP2多肽激活的特异性CTL抑制同HLA-I亚型的鼻咽癌移植瘤形成被引量：6
- 2004年
- 目的:研究异体的EBV-LMP2表位多肽所激活的特异性CTL对具有相同HLA-Ⅰ类分子亚型鼻咽癌细胞(CNE2) 移植瘤的抑制作用,探讨异体间的免疫治疗。方法:先将CNE2细胞接种于Scid鼠背部皮下建立移植瘤模型;然后通过SSP- PCR确定CNE2的HLA-Ⅰ类分子亚型,并选取与CNE2有相同HLA-Ⅰ类分子亚型的外周血淋巴细胞;实验再将3组不同细 胞分别接种于Scid鼠北部皮下,(1)对照组:仅接种CNE2细胞;(2)T细胞组:接种未激活的淋巴细胞与CNE2混合细胞。 (3)CTL组接种经EBV-LNP2多肽激活的特异性CTL与CNE2混合细胞。观察EBV-LMP2多肽激活的CTL对CNE2移植瘤生 长的影响。结果:CNE2于一周左右在Scid鼠背部形成肿块,病理学鉴定为低分化上皮癌;SSP-PCR显示CNE2含有HLA-A11 基因位点;含有相同基因位点的DC负载LMP2-A11多肽所激活的CTL,明显抑制CNE2移植瘤生长。结论:EBV-LMP2多肽 所激活的特异性CTL抑制HLA亚型相同的CNE2移植瘤的形成。
- 杜海军周玲左建民付华王琦李红霞曾毅
- 关键词：CNE2移植瘤特异性CTL多肽
- 树突状细胞EBV-LMP2疫苗免疫鼻咽癌病人效果的初步研究
- 鼻咽癌(NPC)在东南亚地区尤其在我国南方地区发病率非常高,为20-50/100,000人/年。目前最好的治疗方法是体外放疗,早期病例有80-90%的治愈率,然而,晚期病例仅10-40%存活可以超过5年。一旦发生转移,8...
- 左建民周玲曾毅
- 文献传递
