- CD226分子参与脐静脉内皮细胞的功能
- 2003年
- 目的 :观察人血小板T细胞活化抗原 1 (CD2 2 6 )分子所参与的内皮细胞的功能 .方法 :采用3 H TdR掺入、51 Cr黏附实验、PI染色结合流式细胞仪技术观测CD2 2 6分子对体外培养人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖、粘附、细胞周期及凋亡的影响 .结果 :CD2 2 6分子参与HUVEC的粘附功能 ,但CD2 2 6mAb(LeoA1 )对HUVEC的增殖、细胞周期及细胞凋亡均无显著影响 .结论 :CD2 2 6分子是活化HUVEC表面一种新的粘附分子 。
- 陈丽华李林张新海刘雪松金伯泉
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞增殖细胞周期细胞凋亡粘附功能
- 成纤维细胞生长因子18对体外培养兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响
- 2006年
- 目的:构建可稳定表达成纤维细胞生长因子18蛋白的真核表达载体,观察成纤维细胞生长因子18对体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响。方法:本实验于2002-10/2004-03在解放军第四军医大学全军骨肿瘤研究所及口腔医学院完成。①将pGEM-T-FGF18-3和pSecTag2B表达载体分别用KpnⅠ和NotⅠ酶切后重组pSecTag2B-FGF18质粒;ELISA检测转染后COS-7细胞上清的成纤维细胞生长因子18蛋白,以大于阴性对照A值2.1倍以上为阳性结果。②用细胞上清刺激骨髓基质干细胞,根据含小牛血清的DMEM不同比例稀释转染后COS-7细胞上清分为1∶2稀释组、1∶4稀释组、1∶8稀释组、1∶16组、1∶32稀释组;对照组∶用含体积分数为0.02小牛血清的DMEM培养液按1∶2稀释未转染的COS-7细胞上清。③通过酶动力法检测细胞碱性磷酸酶合成情况。结果:①成功构建了pSecTag2B-FGF18真核表达载体。②转染哺乳动物细胞COS-7用夹心ELISA法检测到了成纤维细胞生长因子18蛋白质的稳定表达,原液及1∶10稀释度细胞上清A值大于阴性对照A值2.1倍以上(P<0.01)。③用细胞上清刺激骨髓基质干细胞72h后,1∶2稀释组、1∶4稀释组、1∶8稀释组、1∶16组、1∶32稀释组骨髓基质干细胞A值较对照组明显增高(P<0.01),证实了成纤维细胞生长因子18对体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的促进作用。结论:成纤维细胞生长因子18有显著促进体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的作用,提示成纤维细胞生长因子18对于骨髓基质干细胞的分化及成骨表型的维持起着重要的调节作用。
- 田竞杨帆李秀岩李林项良碧祖启明范清宇
- 关键词：成纤维细胞骨髓细胞干细胞碱性磷酸酶
- 一种新的黑色素瘤相关抗原MAGE-C2的基因克隆及表达
- 2005年
- 目的：克隆人黑色素瘤相关抗原MAGE-C2的cDNA,构建真核、原核表达载体并转入相应细胞获得表达。方法：采用RT-PCR技术,从直肠癌细胞系SW480的总RNA中克隆了MAGE-C2 cDNA序列,并将开放读框分别插入质粒pEGFP-C1和pGEX-4T-3中,获得pEGFP-MAGE-C,2绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体和pGEX-MAGE-C2谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体,将pEGFP-MAGE-C2转染293T细胞,观察绿色荧光融合蛋白在细胞中的定位；将pGEX-MAGE-C2转化大肠杆菌B1221株,经IPTG诱导表达GST融合蛋白,并用谷胱甘肽亲和层析法纯化重组蛋白。结果：获得MAGE-C2开放读框并构建表达载体,测序结果与GenBank收录的序列相一致。真核表达载体转染293T细胞后显示MAGE-C2蛋白定位于细胞核；原核重组蛋白大部分以可溶性形式表达,亲和层析后,获得了较高纯度的MAGE-C2-GST融合蛋白。分析显示原核表达GS了融合蛋白的相对分子质量为70000,使用抗GST单克隆抗体进行Westem blot分析证实为目的蛋白。结论：成功的获得MAGE-C2基因,构建了其表达载体并获得表达,为进一步制备MAGE-C2特异性单抗及深入探讨MAGE-C2可能参与肿瘤发生发展的机制提供了重要条件。
- 庄然欧阳为明谢鑫张新海蓝天李林方亮金伯泉
- 关键词：基因
- 完善机制，积极引导，口腔内科学研究生临床教学有感
- ＜正＞研究生教育是高等教育的最高层次,包括对传统知识的积累及传承,以及对新知识的探索与发现。临床医学专业学位侧重于培养研究生临床技能,突出临床能力培养在研究生培养过程中的重要性。而口腔医学是一门实践性很强的学科,以往学生...
- 杨帆李林林媛余擎王捍国尤苏霞韩冰
- 文献传递
- PTA1酵母双杂交载体的构建被引量：3
- 1999年
- 李德敏金伯泉刘飞欧阳为明张建平李林
- 关键词：PTA1酵母双杂交
- 血小板T细胞活化抗原1分子在NK细胞上的作用研究被引量：12
- 2001年
- 目的 研究血小板T细胞活化抗原 1(PTA1)分子在NK细胞杀伤过程中的作用。方法 应用重导向细胞毒实验 ,探讨了PTA1分子对混合淋巴细胞反应中活化的NK细胞杀伤作用的影响。结果 在重导向细胞毒实验中 ,PTA1McAb能明显上调NK细胞及CTL的杀伤活性。结论 PTA1分子在NK细胞上具有刺激性受体的功能。
- 张贇金伯泉欧阳为明李林李德敏朱勇贾卫刘雪松李琦张新海
- 关键词：血小板NK细胞杀伤活性
- 9.1C3分子抑制杀伤性细胞的细胞毒作用及其机制被引量：6
- 2000年
- 探讨 9 1C3分子对杀伤细胞功能的影响。方法 :以新鲜分离的PBMC或混合淋巴细胞培养活化的淋巴细胞为效应细胞 ,采用重导向杀伤实验 (Redirectedkillingassay ,RKA)观察 9 1C3抗体对效应细胞杀伤P815细胞作用及其杀伤过程中TNF 浕分泌的影响?峁?:9 1C3抗体能显著抑制杀伤细胞对靶细胞的细胞毒作用 ,并使效应细胞分泌TNF 浕水平降低。结论 :9 1C3分子是一种抑制型杀伤细胞受体。
- 欧阳为明金伯泉李琦李林刘雪松韩卫宁李德敏夏海滨
- 关键词：细胞毒TNFΑ
- 完善机制,积极引导应用于口腔内科学研究生临床教学的体会
- 2007年
- 口腔医学研究生教育在侧重科研能力培养的同时还要注重临床实践技能的提高。为解决以往临床医学研究生"科研高,临床低"的问题,进一步提高研究生临床教学培养质量,我们在口腔内科学研究生临床教学中通过引入"主体参与"教学模式,建立完善的临床培养程序等一系列措施,进行了有益的尝试,效果显著。
- 杨帆李林林媛余擎王捍国尤苏霞韩冰
- 关键词：口腔内科学教学
- 人黑色素瘤抗原MAGE-A10的基因克隆及原核表达被引量：1
- 2004年
- 目的 :扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE A1 0(melanomaantigenA1 0 )cDNA ,构建原核表达载体并在大肠杆菌表达 .方法 :从人黑色素瘤细胞系LiBr中提取总RNA ,用RT PCR从中扩增出MAGE A1 0cDNA ,插入载体pMD1 8 T中 .测序正确后 ,克隆至原核表达载体pGEX 4T 3中 ,构建重组表达载体pGEX 4T 3 MAGE A1 0 ,转化大肠杆菌BL2 1株进行表达 .经IPTG诱导表达 ,谷胱甘肽亲和层析获得重组目的蛋白 .结果 :成功获得MAGE A1 0编码基因并构建原核表达载体 ,测序结果与GenBank收录序列相一致 .可以获得部分可溶性的原核重组蛋白 ,经亲和层析和分析 ,证实融合蛋白占总量的 5 8.9% .SDS PAGE分析其相对分子质量 (Mr)为 6 70 0 0 ,Westernblot证实为目的蛋白 .结论 :成功获得MAGE A1 0cDNA ,构建得原核表达载体并获得高效表达 .本研究为制备MAGE A1 0mAb及研究MAGE A1 0可能参与肿瘤发生发展的机制奠定了基础 .
- 李林欧阳为明陈丽华庄然谢鑫方亮杨安钢金伯泉
- 关键词：黑色素瘤抗原逆转录-聚合酶链反应基因克隆基因表达
- 黑色素瘤抗原-A10蛋白在肺癌中的表达及意义被引量：2
- 2004年
- 目的 :观察黑色素瘤抗原 (MAGE) A10在不同类型肺癌的表达分布和临床意义。 方法 :应用组织芯片技术、免疫组化S P法研究MAGE A10在 6 5例肺癌患者的表达情况 ,并分析其与病理类型、病理分级的关系。 结果 :MAGE A10蛋白在小细胞肺癌、肺鳞癌和肺腺癌的阳性表达率分别为 36 .4 %、76 .5 %和 4 0 .0 % ,在大细胞肺癌和支气管肺泡癌中未见阳性表达。MAGE A10蛋白在小细胞肺癌与非小细胞肺癌的表达率未见差异 ,与肺鳞癌、肺腺癌的病理分级也无明显关系。 结论 :MAGE A10分子在肺鳞癌中表达率最高 ,肺腺癌和小细胞肺癌次之 ,大细胞肺癌和支气管肺泡癌中未见表达 ,对鉴别诊断可能有辅助意义 ,并可能成为某些肺癌生物学治疗的潜在靶点。
- 李林陈丽华庄然方亮李琦刘雪松王薇杨安钢金伯泉
- 关键词：肺癌免疫组化组织芯片
