段卫明
- 作品数:64 被引量:166H指数:7
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金苏州市科技发展计划中华国际医学交流基金更多>>
- 相关领域:医药卫生政治法律农业科学理学更多>>
- 电穿孔法基因转染悬浮细胞条件优化
- <正> 目的以GFP为报告基因优化悬浮培养的人白血病细胞电穿孔转染条件,为进一步将目的重组质粒高效转入受体白血病细胞打下基础。方法通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等不同转染条件,采用不同条件组合,电压由200V...
- 沈慧玲陈子兴王玮段卫明傅建新
- 文献传递
- 电穿孔法基因转染悬浮细胞条件的优化被引量:17
- 2004年
- 目的 以绿色荧光蛋白 (GFP)为报告基因优化悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件。方法 通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等转染条件 ,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒GFP转入悬浮培养的人白血病细胞株K5 6 2和NB4 ,用流式细胞仪和荧光显微镜观察转染率。结果 ( 1)低电压、高电容能高效转染悬浮培养的人白血病细胞 ,细胞类型不同条件有所差异 ,K5 6 2细胞在 2 5 0V、95 0 μF得到最大转染率 4 0 .6 % ,NB4细胞在 35 0V、95 0 μF得到最大转染率 32 .9%。 ( 2 )良好的细胞生长状态能明显提高转染率。 ( 3)温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大。结论 电穿孔是一种高效的基因转染法 ,通过优化其条件 ,可提高转染率。
- 沈慧玲陈子兴王玮段卫明傅建新
- 关键词:电穿孔悬浮细胞基因转染
- 去氧氟尿苷联合亚叶酸钙及草酸铂治疗晚期胃癌20例疗效观察
- 2004年
- 采用随机分组的方法,将38例晚期胃癌患者分为去氧氟尿苷联合亚叶酸钙及草酸铂(5'-DFUR+CF+L-OHP)方案组(治疗组)与5-Fu持续静脉输注加亚叶酸钙和革酸铂(5-Fu+CF+L-OHP)方案组(对照组),观察两组的近期疗效和毒副反应。结果:治疗组20例有效率为44.5%(9/20),对照组18例有效率为38.9%(7/18),两组疗效无显著性差异(P>0.05);治疗组KPS改善率为60%(12/20),对照组为27.8%(5/18),治疗组高于对照组(P<0.05);两组的不良反应主要为骨髓抑制、恶心呕吐、口腔黏膜炎、末梢神经炎、腹泻和便秘。认为5'-DFUR+CF+L-OHP方案是治疗晚期胃癌的有效、安全的化疗方案,且对改善患者的生活质量有益。
- 陈凯王庆才殷红段卫明高远
- 关键词:晚期胃癌去氧氟尿苷亚叶酸钙草酸铂化学治疗
- 血清微小RNA-21在乳腺癌患者中的表达及其临床意义被引量:3
- 2016年
- 目的探讨外周血循环微小RNA-21(miR-21)在乳腺癌患者中的表达及其临床意义。方法收集76例乳腺浸润性导管癌患者及20名健康体检者的静脉血,血清分离后,运用实时定量PCR检测miR-21的表达。比较乳腺癌患者与健康对照者以及患者术前与术后miR-21表达差异。受试者工作特征(ROC)曲线法分析miR-21对乳腺癌的诊断效能。结果乳腺癌患者血清miR-21表达比健康人高(P〈0.001),乳腺癌患者接受手术治疗后血清miR-21表达量下降(P〈0.001)。随着乳腺癌分期的增加,血清miR-21表达水平逐渐上升(P〈0.001)。血清miR-21区分乳腺癌患者与健康者ROC曲线下面积为0.934。结论血清miR-21可能是诊断乳腺癌的一个无创标记物。
- 葛鑫鑫段卫明姚利李伟陈凯陶敏
- 关键词:血清微小RNA-21乳腺癌
- RbAP46基因转染白血病细胞系的实验研究
- 一.电穿孔介导的RbAp46基因稳定转移的白血病细胞系的建立.目的:优化悬浮培养细胞的转染条件,建立RbAp46基因稳定转染的白血病细胞系.方法:比较了两种电击缓冲液的转染效率,在低电压、高电容的条件下,应用电穿孔方法将...
- 段卫明
- 关键词:电穿孔增殖分化
- 文献传递
- 过表达的RbAp46基因在白血病细胞系U937中的功能研究
- <正> 目的RbAp46基因是WT-1调控的下游基因,为了解RbAp46基因在造血细胞中的功能1,优化悬浮培养细胞的转染条件,建立稳定转移RbAp46基因的白血病细胞株。2,研究过表达的RbAp46基因对白血病细胞系U9...
- 段卫明陈子兴王玮傅建新白霞
- 文献传递
- ^60 Coγ射线辐射致LyGDI断裂对K562细胞的延迟性凋亡作用
- 2010年
- 目的 采用不同剂量的60 Coγ射线照射人红白血病细胞系K562,探究鸟苷酸解离抑制因子-2(LyGDI)在细胞延迟性死亡中的作用以及其调控机制.方法 细胞流式仪PI单染检测细胞周期,藻红B染色观察细胞的凋亡,Western blot分析LyGDI和Rac1蛋白的表达,免疫荧光检测Rac1蛋白在细胞内的分布.结果 K562细胞被阻滞在G2/M期的百分率为71.3%,K562细胞早期凋亡率较低,8 Gy60Co γ射线照射后24 h,凋亡率为14%,呈现出延迟性的细胞凋亡;K562细胞在4 Gy的γ射线照射24 h后,可见LyGDI发生断裂,总的Rac1蛋白表达未发生明显变化,但其在细胞内的分布发生改变,Rac1转移至细胞膜上与少量核内分布,Rac1脱离LyGDI而激活.结论 LyGDI具有增加细胞延迟性凋亡的作用,其断裂使Rac1转移至细胞膜上,诱导Rac1的激活,从而促进了细胞的凋亡.
- 孙华丽段卫明邵彦彦肖海楠周新文
- 关键词:RAC1凋亡
- 胃癌组织中FOXP3在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性被引量:5
- 2020年
- 目的探讨FOXP3^+细胞在胃癌不同部位表达与临床病理特征的相关性及预后的影响。方法收集胃癌手术切除标本268例,制作组织芯片,采用免疫组化法检测FOXP3在癌周和癌巢的表达,分析FOXP3在癌周及癌巢表达与临床病理特征的相关性及患者生存期的关系,采用双色免疫荧光法检测FOXP3与CD4的共表达情况。结果癌周FOXP3高表达者病死率显著低于低表达者(P=0.01);癌周FOXP3表达与患者的生存期呈正相关(P=0.02)。癌巢FOXP3表达与患者的生存期无相关性;癌周FOXP3表达与CD4表达呈显著的正相关(P=0.001);双色免疫荧光检测显示癌周FOXP3^+细胞与CD4^+细胞存在共表达。结论FOXP3^+/CD4^+免疫细胞多出现在癌周,癌周FOXP3^+细胞可作为预测胃癌患者预后的生物学标志物。
- 郭天威张闽刘志菊郭凌川段卫明季月霞曹磊
- 关键词:肿瘤微环境FOXP3TREG组织芯片
- 稳定表达外源RbAp46基因的U937白血病细胞株的建立和初步特性分析被引量:4
- 2004年
- 为建立RbAp4 6基因稳定转染的白血病细胞株 ,对悬浮培养的白血病细胞的电穿孔条件进行优化之后 ,运用电穿孔介导的转基因技术 ,在低电压、高电容的条件下将含RbAp4 6基因cDNA的表达质粒转染白血病细胞系U937,经G4 18筛选获得稳定转染的克隆 ,用PCR检测RbAp4 6基因的整合 ,用Westernblot分析蛋白质的表达水平 ,然后筛选出表达外源RbAp4 6蛋白水平最高的亚克隆。用台盼蓝拒染法判定细胞活力 ,用细胞计数判定细胞生长速率。结果发现 ,转染RbAp4 6基因的U937细胞的生长速率比对照组低 5 0 %左右。结论 :在白血病细胞系U937中建立了稳定表达外源RbAp4 6基因的细胞株 ,并发现过表达的外源RbAp4 6基因能抑制U937细胞的增殖。
- 段卫明陈子兴王玮傅建新白霞赵小娟姚利
- 关键词:电穿孔白血病细胞
- 溶血磷脂酸受体-1在乳腺癌组织中的表达被引量:3
- 2006年
- 目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidicacid,LPA)受体的三种亚型(LPA1、LPA2和LPA3)在乳腺癌组织中的表达水平及与乳腺癌发生发展的关系。方法采用半定量RT-PCR方法检测乳腺癌组织(35例)、癌旁组织(14例)、乳腺纤维瘤组织(15例)和正常乳腺组织(8例)中的LPA受体的三种亚型mRNA的表达水平,并对乳腺癌组织中这些受体的表达水平与病理类型、肿瘤大小和临床分期等的关系进行分析。结果LPA1在乳腺癌组织中的表达水平显著高于乳腺纤维瘤组织(P<0.05)和正常乳腺组织(P<0.05);最大直径≥2cm乳腺癌组显著高于直径<2cm组(P<0.05);浸润性导管癌也显著高于其它浸润性乳腺癌(P<0.05)。LPA2与LPA3在乳腺癌、癌旁、乳腺纤维瘤和正常乳腺四种组织中的表达水平均无统计学差异。结论LPA1在乳腺癌组织中表达增高,可能在乳腺癌发生与发展的过程中有重要的作用。
- 涂福平陶敏白霞段卫明王振欣
- 关键词:乳腺癌溶血磷脂酸受体