沈国俊
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 鸭乙型肝炎病毒YMDD突变株体外耐药模型建立被引量:3
- 2011年
- 目的构建鸭乙型肝炎病毒(DHBV)YMDD点突变的复制质粒,研究其在鸡肝癌细胞中的复制及拉米夫定抗性。方法以广东樱桃谷鸭DHBV分离株为模板,将3631 bp的片段克隆至载体pBluescript II KS(+)中,构建含1.2倍病毒全基因的重组质粒,经PCR定点突变获得YMDD突变株。将构建质粒经FuGENETM 6瞬时转染鸡肝癌细胞,分析变异株的复制能力及拉米夫定耐药性。结果 PCR鉴定、酶切鉴定及序列测定均证实成功获得1.2倍DHBV全基因YMDD突变质粒。Southern印迹杂交表明重组质粒转染细胞后可检测到病毒复制中间体;野生株的复制能力是突变株的2.7倍。拉米夫定对变异株的IC50=37.12±8.81 ng/ml,高于野生株的IC50=10.90±4.80 ng/ml。结论与野生株相比,YMDD突变株质粒体外复制活性减弱,对拉米夫定敏感性下降。
- 付喜花梁蔚芳吴小东沈国俊何海棠陈金军侯金林
- 关键词:鸭乙型肝炎病毒定点突变拉米夫定
- 单个肝细胞核内鸭乙型肝炎病毒DNA的水平及动态变化
- 研究背景、目的及意义:
共价闭合环状DNA(cccDNA)是乙型肝炎病毒(HBV)的复制模板,长期稳定的以微染色体的形式存在于受感染的肝细胞核内,虽其含量远低于HBV存在的一般形式松弛环状DNA(rcDNA),但对...
- 沈国俊
- 关键词:乙型肝炎病毒恩替卡韦肝细胞核染色体
- 鸭乙型肝炎病毒耐药株的慢性感染研究被引量:1
- 2011年
- 目的:建立鸭乙型肝炎病毒(DHBV)耐药株的慢性感染动物模型。方法:将DHBV野生株及耐药株质粒转染细胞,培养上清接种雏鸭。连续定量检测血清DHBV DNA;印迹杂交检测肝内病毒复制中间体;观察肝组织病理变化。结果:野生株组的病毒滴度和慢性感染率均高于耐药株组;肝组织中检测到DHBV的复制中间体与cccDNA,可见轻度炎症病理改变。结论:DHBV耐药株可形成慢性感染。
- 付喜花沈国俊孙春伟陈楚明陈金军侯金林
- 关键词:耐药动物模型