程金平 作品数:9 被引量:54 H指数:5 供职机构: 河南农业大学牧医工程学院 更多>> 发文基金: 郑州市科技攻关计划项目 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
感染猪的肠球菌生物学特性研究 肠球菌为球形或卵圆形、呈链状排列的革兰阳性细菌,自从1984年单独成属以来,已由原来的两个种增加到41个种。肠球菌不但可引起医院内病人的腹膜炎、心内膜炎、尿道炎和脑膜炎等,也可引起猪、羊、鸡和鸭等动物的感染,感染动物的肠... 程金平关键词:肠球菌 生物学特性 病菌感染 文献传递 感染仔猪粪肠球菌不同分离株的鉴定及毒力基因检测 被引量:20 2010年 从近年来河南省各地感染发病猪群的肠球菌分离株中,选取来源不同且具有代表性的5株分离菌进行了包括致病性和毒力基因测定在内的系统鉴定。结果表明,引起本次河南省仔猪感染发病的病原体为粪肠球菌。各地分离菌的形态、培养特性与以及对极端环境的耐受性上表现较为一致,而对各种糖的发酵上存在着的差异;对药物万古霉素、替考拉宁、利福平和氨苄西林敏感,而对临床常用药物红霉素、卡那霉素和四环素完全耐药;经16S rRNA测定,它们与粪肠球菌ATCC29212同源性在99.6%~99.8%之间,与GenBank公布的NC_004668、AJ301831的核苷酸同源性为99.7%~99.9%和99.5%~99.7%;通过对它们2种毒力表型和携带的6种主要毒力基因以及与对小鼠的LD50测定,发现5株粪肠球菌携带毒力基因不尽相同,携带全部6种毒力基因的HE1和HE5的致病力最强,而仅携带4种毒力基因的HE41致病力最小。用HE1和HE5分离菌对20日龄的断奶仔猪分别进行攻毒,2菌株均能引起仔猪的感染发病。 王亚宾 陈丽颖 张红英 刘磊 程金平 崔保安关键词:粪肠球菌 感染仔猪 毒力基因 致病力 猪源肠球菌两种致病基因和表型的检测 被引量:5 2009年 为调查53株猪源肠球菌2种致病基因和2种表型的分布,应用聚合酶链反应检测53株肠球菌的2种致病基因,用50ml/L兔血平板和30g/L明胶平板检测β溶血和明胶溶解表型。检测结果表明,溶血素激活基因(cylA)明胶酶基因(gelE)为猪源肠球菌的主要致病基因;粪肠球菌2种致病基因和2种表型的检出率高于屎肠球菌;来源于新鲜猪肉中的粪肠球菌存在一定的致病力,提示注意食品卫生安全;在新鲜猪肉中检测到2株鸟肠球菌,基因型和表型检测说明其存在较弱毒力。 刘磊 王亚宾 程金平 王中明 郭敏 崔保安关键词:肠球菌 基因 溶血 明胶 一株致仔猪关节炎粪肠球菌的鉴定 被引量:9 2010年 对1株分离自关节炎病仔猪的肠球菌进行鉴定。选用常规方法进行染色特性、培养特性观察以及药物敏感性和致病试验,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并用PCR方法扩增分离株的16 S rRNA基因,克隆并测序,与GenBank上登录的相关菌株及3个粪肠球菌标准菌株进行16 SrRNA序列比较、同源性分析并构建系统发育树。结果显示,该分离株形态及染色特性与肠球菌一致,对仔猪具有一定的致病性,并对临床常用的7种药物产生了耐受性;Vitek-32生化鉴定和16 S rRNA基因同源性分析及比对结果均显示其为粪肠球菌(E.faecalis)。试验证实了粪肠球菌可导致仔猪关节炎。 王亚宾 胡清林 陈丽颖 程金平 陈小丽 崔保安关键词:仔猪 关节炎 粪肠球菌 VITEK-32 RRNA基因 猪肠球菌溶血素cylA基因原核表达载体的构建 2009年 以猪致病性粪肠球菌染色体DNA为模板,PCR扩增溶血素cylA基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET32a中,构建pET32a-cylA重组质粒,并将pET32a-cylA质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)。经HindⅢ、XhoI双酶切及测序鉴定,并与已发表的肠球菌溶血素cylA基因序列比较,同源性达99.8%。表明成功构建猪肠球菌溶血素cylA基因的重组表达质粒,为制备单抗、开发疫苗及其致病机制研究奠定了基础。 刘磊 王亚宾 程金平 王中明 段志刚 蔡京雷 崔保安关键词:粪肠球菌 溶血素 原核表达 临床感染猪肠球菌菌株的分离与鉴定 被引量:8 2008年 对分离自河南洛阳、济源、许昌、南阳等地送检病猪内脏的42份革兰阳性球菌分离纯化,根据细菌形态学、培养特性和生长耐性试验结果,初步确定为肠球菌,采用V itek-32全自动细菌鉴定系统对其进行鉴定,共鉴定出了34株肠球菌.其中,粪肠球菌(Enterococcus faecalis)10株、屎肠球菌(E.faecium)2株、铅黄肠球菌(E.casselifla-vus)22株.另有8株未鉴定到种的水平. 王亚宾 张红英 陈丽颖 程金平 刘磊 崔保安关键词:肠球菌 药敏试验 生化鉴定 应用16S rRNA基因序列分析鉴定猪源肠球菌 被引量:9 2008年 对河南省不同地区病猪分离的11株疑似肠球菌提取基因组DNA,PCR扩增16S rRNA基因片段,经克隆后测序,并与GenBank中注册的相关肠球菌菌株的16S rRNA基因序列进行比较、绘制系统发育树,进行鉴定。结果表明,4株临床分离株鉴定为粪肠球菌(E.faecalis),7株为屎肠球菌(E.faecium)。首次从分子水平上证实了猪肠球菌在河南省的存在,为临床诊断及分子鉴定提供依据。 程金平 王亚宾 刘磊 王珊 崔保安关键词:肠球菌 RRNA基因 同源性分析 16S rRNA与Vitek-32对临床感染猪肠球菌鉴定结果比较 被引量:9 2009年 旨在利用两种常用的细菌分型方法对感染猪的肠球菌的鉴定结果进行比较和分析。将从河南洛阳、济源、许昌、南阳等地送检病猪体内分离的42株革兰阳性球菌纯培养后,分别用16S rRNA基因序列比较和Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行鉴定。Vitek-32对42株分离菌中的34株鉴定到种的水平,分别是粪肠球菌(E.faecalis)10株、屎肠球菌(E.faecium)2株、铅黄肠球菌(E.casseliflavus)22株;另有8株未成功鉴定。16S rRNA基因序列分析对42株分离菌成功的鉴定结果是为粪肠球菌12株,屎肠球菌30株。经比较发现,Vitek-32鉴定的10株粪肠球菌中除1株被16S rRNA鉴定为屎肠球菌外,其余9株均相同;Vitek-32鉴定的2株屎肠球菌与16S rRNA鉴定结果相同;Vitek-32鉴定的22株铅黄肠球菌除了1株被16S rRNA鉴定为粪肠球菌外,其余全部被鉴定为屎肠球菌;8株未能被Vitek-32鉴定的肠球菌被16S rRNA方法分别鉴定为粪肠球菌(2株)和屎肠球菌(6株)。在感染猪的肠球菌分型鉴定中,Vitek-32对粪肠球菌鉴定结果与16S rRNA比较具有较高的一致性(75%);而对于屎肠球菌的鉴定结果与16S rRNA比较出现了较大的差异(93.3%)。 王亚宾 张红英 陈丽颖 程金平 刘磊 崔保安关键词:VITEK-32 肠球菌 一株致仔猪关节炎粪肠球菌的鉴定 对1株分离自关节炎病仔猪的肠球菌进行鉴定。选用常规方法进行染色特性、培养特性观察以及药物敏感性和致病试验,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并用PCR方法扩增分离株的16 S rRNA基因,克隆... 王亚宾 胡清林 陈丽颖 程金平 陈小丽 崔保安关键词:仔猪 关节炎 粪肠球菌 VITEK-32 文献传递