谢奕
- 作品数：14 被引量：156H指数：9
- 供职机构：湖南医科大学肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼻咽癌染色体7q32区域微缺失的研究被引量：7
- 2000年
- 目的 进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法 采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7S5 0 0 - D7S5 0 9- D7S495是高频率缺失集中的区域 ,共同缺失区在 D7S5 0 9附近。结论 D7S5 0
- 唐湘娜阳剑波邓龙文江宁周鸣曾朝阳谢奕谭国林邱元正李桂源
- 关键词：鼻咽癌等位基因缺失抑癌基因
- 构建7q32区域鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞部分基因的表达图谱被引量：13
- 1998年
- 目的构建７ｑ３２区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞的部分基因表达图谱。方法通过差异ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方法检测定位于７ｑ３２区域的２０个ＥＳＴ在鼻咽癌细胞和鼻咽癌组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞ｍＲＮＡ的表达水平。结果８个ＥＳＴ在鼻咽癌细胞ＨＮＥ１和原代培养人正常鼻咽上皮细胞中表达量较一致，７个ＥＳＴ在两种细胞中均无表达，３个ＥＳＴ（Ｗ７２６８８、Ｈ１９８３０、ＡＡ１３０６３０）在鼻咽癌细胞株中表达上调，而２个ＥＳＴ（ＡＡ０７０４３７、Ｈ９０８８２）在原代培养人鼻咽上皮细胞中表达上调。在１３例鼻咽癌活检组织中３０．７％（４／１３）的ＡＡ０７０４３７表达下调，７７％（１０／１３）的Ｗ７２６８８和７７％（１０／１３）的Ｈ１９８３０表达上升。结论构建了７ｑ３２区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞部分基因表达图谱，并初步认为Ａ０７０４３７的表达下调和Ｗ７２６８８、Ｈ１９８３０的过表达与鼻咽癌的发生有关。
- 江宁湛凤凰谢奕曾朝阳周鸣邓龙文李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤
- 应用混合探针文库筛选法克隆多个肿瘤差异表达基因被引量：12
- 2000年
- 目的：进一步分离在鼻咽癌组织中表达下调／缺失的候选抑瘤基因。方法：采用PCR方法对有差异表达的cDNA序列（AF152605和AF091517）进行探针标记，Northern杂交确定其mRNA转录本大小，进而混合两种PCR探针对骨骼肌cDNA文库进行筛选，阳性克隆经PCR鉴定后直接测序。结果：克隆了转录本为2．2Kb、1．1Kb和1．4Kb三个基因，GenBank登录号分别为AF179285、AF170307和AF194971。结论：混合探针文库筛选法是同时、快速获得多个cDNA片段其全长序列的可借鉴实验手段。
- 余鹰谢奕朱诗国周鸣张必成李桂源public.cs.hn.cn
- 关键词：鼻咽肿瘤文库筛选抑瘤基因
- 鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究被引量：10
- 1998年
- 目的细胞遗传学研究表明，３号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明，染色体３ｐ在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）。本研究将进一步确定鼻咽癌３ｐ等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于３ｐ２１２６区域１６个微卫星多态性位点，对２４例低分化鼻咽癌患者进行了ＬＯＨ分析。结果２４例患者中有１６例存在杂合性丢失（６６．７％）。丢失频率最高的两个位点是Ｄ３Ｓ１５６０（５０％，１１／２１）和Ｄ３Ｓ１６２０（５０％，９／１８）。在具有丢失的１６例患者中，８例显示为１个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域，５例患者存在２个或２个以上的杂合性丢失区。病例１，３，４，７，８，１０，１６，１７，１８，１９和２２在Ｄ３Ｓ１５９７和Ｄ３Ｓ１２９７之间，表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于Ｄ３Ｓ１５６０Ｄ３Ｓ１６２０（３ｐ２５．３２６．２）之间，提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。
- 邓龙文江宁谭国林周鸣湛凤凰谢奕曹莉李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤染色体3P等位基因杂合性丢失
- 一个定位在7q32染色体区域的鼻咽癌负相关EST被引量：3
- 1999年
- 为了分离和克隆定位于7q32染色体区域的与鼻咽癌发病有关的抑瘤基因，检测了鼻咽癌活检组织及配对外周血标本中7q32微卫星DNA多态性位点的基因型，发现在7q32区域存在30％左右的杂合性丢失。从Internet中查询到定位于7q32区域的所有EST，对其中20个EST进行分析。RT－PCR和Northern杂交发现AA070437EST在鼻咽癌细胞株HNE1中表达微弱，而在正常鼻咽上皮原代培养细胞中表达强烈。差异RTMCR结果显示，鼻咽癌活检组织中有30．7％存在该EST表达下调或不表达。差异PCR和Southern杂交结果显示鼻咽癌活检组织DNA中存在该EST的29．1％等位基因丢失情况。与GeneBank等数据库比较表明该EST所代表的基因是一个新基因。结果表明AA070437EST在鼻咽癌发病中有明显负相关，是一个定位于7q32的鼻咽癌抑瘤基因候选者。
- 江宁邓龙文谭国林湛凤凰周鸣曹莉邱元正谢奕李桂源
- 关键词：鼻咽癌杂合性丢失EST基因表达
- 鼻咽癌、宫颈癌和肺癌中p53基因突变和表达的对比研究被引量：26
- 1997年
- 目的对比研究ｐ５３在鼻咽癌、宫颈癌、肺癌中的表达及其与ｐ５３基因突变的关系，为进一步研究ｐ５３在癌变过程中的作用奠定基础。方法应用免疫组化结合ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测２４例鼻咽癌、９例宫颈癌、１０例肺癌中ｐ５３基因的表达与突变。结果２３／２４例鼻咽癌、６／９例宫颈癌、９／１０例肺癌有ｐ５３的过表达，在两种发病与ＤＮＡ致瘤病毒有关的鼻咽癌、宫颈癌中未能检测到ｐ５３基因突变；而发病与化学致癌物有关的肺癌中有５／１０例检测到有ｐ５３基因突变，其中１例发生在外显子８，４例发生在外显子５。这５例均有ｐ５３的过表达。结论（１）鼻咽癌、宫颈癌、肺癌中存在着ｐ５３蛋白的过表达。（２）肺癌中ｐ５３的过表达大部分与ｐ５３基因突变有关，而鼻咽癌与宫颈癌中ｐ５３过表达与ｐ５３基因突变关系不大，其与致瘤性ＤＮＡ病毒的作用是否有关有待进一步研究。
- 谢奕姚开泰胡维新
- 关键词：鼻咽肿瘤宫颈肿瘤肺肿瘤P53基因突变
- 应用荧光原位杂交检测EB病毒BNLF-1基因在转基因小鼠子代染色体上的整合及其定位被引量：8
- 1998年
- 应用荧光原位杂交技术研究了EB病毒潜伏膜蛋白基因(BNLF-1)在转基因小鼠子二代染色体上的整合及其定位。结果在两只子二代转基因小鼠中,分别观察80个和60个分裂相,出现杂交信号的核型分别为27和18个,检出率为33.8％和30％。转基因分别整合在14号染色体和10号染色体上。提示转基因BNLF-1已稳定整合到转基因小鼠的染色体上,并通过生殖细胞遗传给子代;推测转基因原代鼠的转基因整合可能是随机的多位点整合。
- 苗聪秀卢光秀王庸晋谢奕
- 关键词：荧光原位杂交转基因小鼠EB病毒
- 两个鼻咽癌负相关新基因的分离与特性被引量：10
- 2000年
- 8个通过 c DNA代表差异分析法 ( c DNA representational difference analysis,c DNA RDA)分离的新 c DNA序列中 ,经 RT- PCR验证 ,发现其中一 c DNA序列 (登录号 :AF0 91 51 7)在 40 %的鼻咽癌活检组织中存在表达缺失和下调 .Northern杂交显示 ,AF0 91 51 7代表转录本为 1 .1 kb和 1 .4kb大小的两个基因 ,进而采用文库筛选 ,成功分离出 3′端完全不同的两个基因 ,命名为 NAG1 1和 NAG 1 2 (登录号分别为 AF 1 70 30 7和 AF 1 94971 ) .经过计算机预测 ,NAG 1 1编码 87个氨基酸组成的跨膜蛋白 ,NAG1 2编码 1 36个氨基酸组成的可溶性的核蛋白 ,两者无任何同源性 .NAG 1 1蛋白含有 3个 ATP结合区、两个蛋白激酶 C磷酸化位点和两个 N-肉豆寇酸化位点 ,NAG 1 2含有POU结构域和多个功能位点 .结果说明 NAG1 1和 NAG1 2的表达的缺失与下调可能参与了鼻咽癌的进程 ;NAG1 1基因产物可能与 ATP的跨膜转运有关 ;NAG1 2基因产物可能与转录翻译有关 .
- 余鹰张必成谢奕曹利周鸣朱诗国湛凤凰李桂源
- 关键词：鼻咽癌抑瘤基因基因克隆
- 一个定位于染色体3p25.3的新基因及在鼻咽癌中的表达分析被引量：11
- 2000年
- 目的 分离位于染色体 3p2 4- 2 6区域中鼻咽癌相关的新基因。方法 在染色体 3p2 4- 2 6鼻咽癌杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)高频区 ,用 RT- PCR及 Northern杂交 ,检测了 2 0个表达序列标记 (expressed sequence tag,EST)在鼻咽癌细胞株 HNE1和原代培养的正常鼻咽上皮细胞中的表达水平 ,并对其中一个在鼻咽癌细胞株 HNE1中表达下调的 EST,在 7个正常鼻咽活检组织和 19例鼻咽癌活检组织中的表达进行了检测。用 c DNA文库筛选方法获得其全长 c DNA序列 ,对该序列进行了初步分析。结果 获得了一个位于染色体 3p2 5 .3的新基因 ,命名为 NAG- 7基因 (Gen Bank收录编号 :AF0 86 70 9)。该基因在 2 6 .3% (5 / 19)的鼻咽癌活检组织中表达下调 ,全长 16 6 7bp,其开放阅读框 (open reading frame,ORF)编码一个含 94个氨基酸的碱性蛋白质 ,相对分子质量为 110 2 3870 ,预测为一跨膜蛋白质。它含有一个蛋白激酶 C磷酸化位点和肉豆蔻基位点。迄今为止 ,NAG- 7基因序列在基因库中未见任何同源性基因。结论 NAG- 7基因是一个在鼻咽癌中表达下调的新基因 ,它的改变可能参与了鼻咽癌的发生发展。
- 谢奕邓龙文江宁湛凤凰曹莉邱元正唐湘娜李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤染色体3P基因克隆
- cDNA代表性差异分析法分离鼻咽癌上皮细胞株HNE_1表达差异cDNA序列的初步研究被引量：31
- 1998年
- 目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因，包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用ｃＤＮＡ代表性差异分析法（ＲＤＡ），分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１中差异表达的ｃＤＮＡ序列，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交被用来分析差异性表达产物的来源，最后，将这些序列克隆到ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体中，并用链终止法测序。结果在第４轮杂交及扩增反应后，获得４条差异性条带。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证明，这些差异性片段来自作为“检测”扩增子的正常人鼻咽上皮，在鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１中不表达或表达降低。序列分析这些差异性片段的克隆，发现一些序列是与已知基因高度同源的基因，包括一些看家基因；另有一些基因则为新基因序列。结论鼻咽癌的发生是一个多基因参与的过程，所获得的差异性片段中，与之同源的一些已知基因具有抑瘤功能。
- 湛凤凰江宁曹利邓龙文谭国林周鸣谢奕李桂源
- 关键词：鼻咽癌抑瘤基因CDNA
