马海利
- 作品数:150 被引量:949H指数:15
- 供职机构:山西农业大学更多>>
- 发文基金:山西省科技攻关计划项目山西省青年科技研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 山西省部分地区猪圆环病毒2型基因遗传变异分析
- 2021年
- 为了解山西省猪圆环病毒2型(PCV2)基因的遗传变异情况,用特异性引物对山西省部分地区PCV2疑似病猪的病料进行了PCV2基因扩增,利用DNAStar和MEGA-X对PCV2全基因和ORF2基因进行遗传变异分析,并对ORF2基因推导的Cap蛋白进行变异分析。结果表明,获得6株完整的PCV2基因序列,基因全长1767 bp左右;6株PCV2全基因和ORF2基因之间核苷酸同源性分别为96.6%~99.9%和94.8%~99.9%,与GenBank上已发布的国内外参考毒株全基因间和ORF2基因间同源性分别为94.6%~99.8%和91.5%~99.9%。6株PCV2毒株ORF2基因推导的Cap蛋白氨基酸之间同源性为94.0%~100%,与GenBank上已发布的国内外参考毒株同源性为88.0%~100%。在鉴定测序的6株PCV2中,1株属于PCV 2d型,5株属于PCV 2b型,推断目前山西省PCV2流行毒株以PCV 2b型为主。
- 高宇孟玉凯王晨石玉节张甜岳伟东朱东阳马海利
- 关键词:猪圆环病毒2型基因同源性分析CAP蛋白
- 氟对小鼠肠道优势菌生长情况及其糖代谢酶活性的影响
- 2015年
- 试验选用6周龄左右的健康小鼠,取回盲肠部黏液进行大肠杆菌和乳酸杆菌的分离培养,在培养基中添加不同浓度(0、0.1、1、10、100mmol/L)的氟化钠(NaF)。分别测定不同浓度氟对大肠杆菌和乳酸杆菌的生长情况及其己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、柠檬酸合酶(CS)和乳酸脱氢酶(LDH)的代谢酶活性。结果显示,0.1 mmol/L和1mmol/L浓度的Na F在作用0-12h内,对大肠杆菌和乳酸杆菌菌液的生长OD变化值均有显著促进作用,而高浓度(10mmol/L和100 mmol/L)氟则显著抑制大肠杆菌和乳酸杆菌的生长OD变化值,但随时间推移,促进和抑制作用均减弱。此外,氟能够抑制大肠杆菌和乳酸杆菌糖代谢过程的HK、PK、SDH、CS和LDH的酶活性。由此推断,低浓度氟对大肠杆菌和乳酸杆菌的生长有促进作用,高浓度氟则抑制大肠杆菌和乳酸杆菌的生长。而且,氟对大肠杆菌和乳酸杆菌糖代谢过程中的HK、PK、SDH、CS和LDH的酶活性有抑制作用。
- 杨珊珊马海利张振威
- 关键词:氟大肠杆菌乳酸杆菌糖代谢酶小鼠
- 猪大肠杆菌血清型与药敏试验的关系被引量:7
- 1995年
- 从某猪场采集不同日龄不同窝腹泻仔猪的粪便,进行大肠杆菌的分离、鉴定和药敏试验.结果表明,血清型相同的大肠杆菌药敏试验结果相同,血清型不同的大肠杆菌药敏试验结果不同,这将对大肠杆菌血清型的筛选提供依据.
- 马海利杨百亮
- 关键词:猪病大肠杆菌血清型药敏试验
- 鸡源大肠杆菌耐药性分析及中药对大肠杆菌耐药性消除作用的研究被引量:57
- 2015年
- 研究鸡源大肠杆菌耐药性及中药对大肠杆菌耐药性消除作用。选择22种抗生素采用Kirby-Bauer法对山西省部分地区分离的20株致病性鸡源大肠杆菌进行耐药性检测,对分离菌株进行质粒分析和耐药质粒转化试验,并分析多种中药对大肠杆菌耐药性的消除作用。结果显示,20株试验菌对测试抗生素均存在不同程度的耐药性,其中5耐及5耐以上的菌株占分离菌株的90%,试验菌对青霉素耐药率最高(90%),其次为恩诺沙星(85%),而对黏杆菌素和呋喃妥因的耐药性最低;分离出12种质粒谱型,同一地区、同一鸡场菌株的质粒图谱相同或相似,不同地区菌株的质粒图谱不同,仅有部分相同或相近的流行质粒共存;对其中5株菌株进行耐药质粒的转化试验,发现同一质粒可编码1个至数个耐药性基因,不同质粒可以携带相同的耐药性基因;中药单剂或合剂对大肠杆菌的耐药性有一定的消除作用,其中黄芩的消除效果最好,中药处理后部分菌株质粒图谱无变化,只有黄连和双黄连造成2条质粒带丢失;对中药提取物作用后的消除子进行药敏试验,结果发现大肠杆菌对环丙沙星等多种抗生素恢复了敏感性。研究结果提示联合使用中药治疗鸡源大肠杆菌病有显著效果。
- 宁官保牛艺儒张鼎李宏全马海利高荣琨郝卫芳高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳田文霞
- 关键词:大肠杆菌耐药质粒中药
- 口蹄疫病毒3ABC基因截短体在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量:3
- 2008年
- 将长为525bp的口蹄疫病毒3ABC基因截短体克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建了重组表达质粒pPIC9K-3ABCt.用BglⅡ线性化后,电转化毕赤酵母菌GS115,经表型筛选,PCR鉴定,获得阳性重组菌(GS115/pPIC9K-3ABCt).然后进行诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.结果表明,重组菌株成功分泌表达了分子量为40000,具有免疫反应活性,且呈二聚体形式的目的蛋白.在96h时表达量达到最高峰,占分泌总蛋白的18%,达到23.4mg/L.为进一步研制口蹄疫免疫和感染动物鉴别诊断试剂奠定了基础.
- 郑敏金宁一李昌鲁会军马鸣潇沈国顺霍晓伟马海利陈晓月屈勇刚
- 关键词:3ABC基因毕赤酵母分泌表达诊断抗原
- 福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡被引量:9
- 2017年
- 为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P<0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P<0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P<0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。
- 张宁李欣宁官保张鼎Ali Raza Jahejo李宏全马海利郝卫芳高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳高荣琨田文霞
- 关键词:福美双胫骨软骨发育不良软骨细胞细胞凋亡肉鸡
- 鸭源、鸡源NDV对DF-1细胞的致病性特征被引量:1
- 2016年
- 新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起多种家禽发病的急性高度接触性疾病、为了研究鸡源和鸭源NDV体外致病特点,本研究选取鸡源GM和鸭源YC两株强毒接种于DF-1细胞,通过测定TCID50、细胞病变的程度及最大病变时细胞上清液的浓度,结果显示鸡源NDV—GM株最早于22h检测到HA阳性,先于鸭源NDV-YC株2个小时,2株病毒接种后70h左右HA均达到峰值,其中NDV-GM株HA峰值为5log2,低于NDV-YC株6log2,实验表明鸭源病毒对鸡源细胞有致病性,为研究鸭源病毒体外致病性差异研究奠定基础.
- 高诗敏马海利邓瑞林化丽珍闫芳田文霞高文伟
- 兔抗猪肺炎支原体胞膜和胞浆抗原的抗体效价测定被引量:1
- 1992年
- 将猪肺炎支原体胞膜和胞浆抗原接种家兔后10~14天,可检出抗体,4周后血清抗体效价都达到一定高度,并维持到21周,以后逐渐下降,到23周时仍能检出抗体。
- 马海利杨兴周李绪英
- 关键词:猪肺炎支原体胞膜抗原抗体
- 口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗分子设计及其构建被引量:9
- 2007年
- 针对我国口蹄疫(FMD)流行情况,利用计算机软件模拟分析,构建了口蹄疫病毒(FMDV)复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT。该表达盒以O型、A型FMDV结构蛋白VP1全基因和AsiaⅠ型FMDV2个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因(其中2个抗原表位来源于FMDVIND63/7株,该毒株与我国新疆分离株属于同一基因拓扑型,其余3个抗原表位来源于FMDVYNBS/58株)作为主要免疫原基因,以非结构蛋白上的2个Th2细胞表位基因及结构蛋白上的1个Th2细胞表位基因作为辅助基因。将构建好的表达盒OAAT和猪IL-18基因分别插入到鸡痘病毒(FPV)表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子(ATI-P7.5×20)和单一启动子(P7.5)下游,构建了携带OAAT表达盒和猪IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-OAAT-IL18。应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经BrdU进行3次加压蚀斑筛选后,以不同代次的细胞mRNA为模板,利用FMDVVP1基因和猪IL-18基因特异引物进行RT-PCR和IFA检测,筛选出OAAT和猪IL-18基因共表达的重组鸡痘病毒rF-PV-OAAT-IL18,该重组鸡痘病毒的构建为新型FMDV活载体疫苗的研究奠定了基础。
- 马鸣潇金宁一刘慧娟沈国顺郑敏金明兰鲁会军霍晓伟马海利
- 关键词:鸡痘病毒
- 辛酸硫酸铵法提纯鸡抗新城疫病毒(NDV)IgG效果观察被引量:8
- 2008年
- 用辛酸硫酸铵法对鸡血清中的抗新城疫病毒IgG进行了提取和纯化。提纯后的抗体纯度较高,但仍有杂蛋白存在;紫外法测得纯化前血清的蛋白浓度为45.6042 mg/mL,纯化后为5.933 mg/mL;纯化前、后HI的效价分别为2-10、2-7。
- 石晓艳郭亮王彦辉马海利
- 关键词:鸡新城疫病毒IGGSDS-PAGE蛋白浓度