何延华 作品数:64 被引量:137 H指数:8 供职机构: 新疆农垦科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室开放课题 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
马腺疫链球菌的分离鉴定与疫苗的研制 被引量:8 2013年 为了有效控制马腺疫的发病,通过无菌采集病马脓液进行细菌分离、纯化,生化鉴定和16SrDNA测序分析。结果表明:共分离、鉴定出5株马链球菌马亚种,1株马链球菌兽疫亚种,1株金黄色葡萄球菌;分离株均具有较高致病性;制备的灭活疫苗能够有效地预防马腺疫的发病。 康立超 陈新华 钟发刚 黄新 韩猛立 何延华关键词:马腺疫 链球菌 RDNA 疫苗 一种牛羊圈舍围栏的半自动门锁、畜牧圈养用门锁系统 本实用新型属于养殖设备技术领域,公开了一种牛羊圈舍围栏的半自动门锁、畜牧圈养用门锁系统,设置有滑动门,所述滑动门的侧面设置有安装孔;固定端通过支座固定安装在墙体上;把手通过旋转轴活动安装在固定端。与传统的插销和铁链相比,... 张星星 吴桐忠 黄新 李杰 韩猛立 钟发钢 何延华 张倩文献传递 RNA干扰及其在寄生线虫研究中的应用 2011年 RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)是一种基因沉默技术,它通过特异性降解靶序列的mRNA而引起转录后基因沉默(post transcriptional gene silence,PTGS),该技术现已广泛应用于基因组功能和某些疾病的基因治疗研究。作者就RNAi的产生机制、作用特点、研究策略及其在寄生线虫研究中的应用情况等方面作一阐述。 陈南颖 何延华 薄新文 王新华关键词:RNA干扰 寄生线虫 一起羔羊腹泻病病原调查及防治 被引量:1 2018年 本文就一起较为典型的由大肠杆菌引起的羔羊腹泻进行了病原调查和实验室检测诊断,并通过病畜的隔离饲养,改善养殖场的卫生条件,加强饲养管理,改善和提高兽医保健水平,以及使用敏感药物针对性治疗和自家灭活疫苗预防接种等防控策略,基本控制了该病的再次发生。 彭剑 吴桐忠 张星星 韩猛立 何延华 钟发刚 黄新关键词:大肠杆菌 羔羊腹泻 病原 布鲁氏菌疫苗(S2株)气雾免疫绵羊血清抗体阳性率优于口服免疫 被引量:1 2021年 本研究旨在检测经气雾和口服途径接种布鲁氏菌疫苗(S2株)后羊特异性血清抗体阳性率的变化以确定其相对免疫功效。布鲁氏菌阴性羊群分别通过口服(1×1010 CFU剂量)和气雾(1×1010、8×109、6×109、4×109、2×109、1×109 CFU和5×108 CFU共7种剂量)接种布鲁氏菌疫苗(S2株)。接种后30、60、90、120 d和320 d分别采集试验羊的血清样品,并用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)进行血清抗体检测。结果显示,口服免疫组接种后30d抗体阳性率达到最高(羔羊RBPT:38.00%,SAT:32.00%;成年羊RBPT:72.00%,SAT:68.00%),30~90 d抗体阳性率下降较快,90 d后抗体阳性率降到较低水平(RBPT﹤12.00%,SAT﹤10.00%);气雾免疫组,羔羊接种后30d,阳性率最高升至40.00%(RBPT:16.70%~40.00%,SAT:11.10%~30.00%),60d阳性率降至20.00%以内(RBPT:0~20.00%,SAT:5.60%~20.00%),90d阳性率降至10.00%以内,不同剂量气雾免疫羔羊阳性率变化差异不显著(P>0.05)。成年羊(除5×108 CFU组外),接种后30d阳性率升至84.81%(SAT:84.81%~88.50%),60d阳性率低于53.33%(SAT:44.30%~53.33%),90d阳性率低于24.39%(SAT:18.66%~24.39%),120d阳性率低于10.00%;5×108CFU组接种后30d阳性率较低(RBPT:48.70%,SAT:44.73%);成年羊气雾免疫组1×109~1×1010 CFU剂量同一时间点,阳性率结果变化差异不显著(P>0.05),与5×108 CFU组在30d和60d变化差异极显著(P<0.01)。口服免疫组抗体阳性率曲线变化趋势与气雾免疫组基本一致,接种后30d时都达到峰值,羔羊阳性率均较低,成年羊气雾免疫组阳性率高出口服免疫组18.84%。本试验表明,布鲁氏菌疫苗(S2株)气雾免疫在成年羊体内产生的特异性血清抗体阳性率优于口服免疫。 黄新 韩猛立 张星星 张宾 汪保 吴桐忠 晁旭东 何立雄 韩文国 蒲新竹 陈朝阳 罗文毅 彭剑 何延华 钟发刚关键词:气雾免疫 口服免疫 特异性抗体 扩展莫尼茨绦虫RNA结合蛋白基因的克隆及不同体节mRNA转录水平的分析 2013年 为研究RNA结合蛋白在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的功能,克隆了该基因的全长序列;同时以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR方法检测了该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段,即头节、幼节、成节、孕节中的mRNA转录水平。结果显示,扩展莫尼茨绦虫RNA结合蛋白基因全长为1 905bp,编码562个氨基酸。进化分析表明,该基因与人类DAZ基因有一定的同源性;mRNA转录水平分析显示,目的基因和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99。熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。结果表明,此RNA结合蛋白在虫体各发育阶段中的表达丰度存在明显差异,在虫体成节的表达水平最高,其次为幼节、孕节和头节,初步推测该基因可能与人类DAZ基因有相似的功能,对扩展莫尼茨绦虫生殖细胞的发育具有一定的调控作用。 王正荣 薄新文 赵文娟 何延华 康立超关键词:扩展莫尼茨绦虫 RNA结合蛋白 克隆 一种家畜免疫消毒装置 本实用新型公开了一种家畜免疫消毒装置,包括箱体,其特征在于:所述箱体(1)上设有进口端和出口端,所述进口和出口设有可开合的门体(16),所述箱体(1)内设有喷雾装置和喷淋装置,所述喷雾装置至少包含气雾喷头(2),所述喷淋... 黄新 钟发刚 韩猛立 张宾 张星星 吴桐忠 何延华 王建文献传递 转IGF-1基因超细毛羊与非转基因羊肠道粪便菌群多样性及组成差异分析 被引量:3 2020年 旨在探究超细毛羊转入IGF-1基因后是否会引起超细毛羊肠道微生物菌群群落改变而导致转基因羊生物安全存在隐患的问题。本研究在同一羊场随机选取临床健康羊3组,其中转IGF-1基因阳性组(GP组)41只(24母(GDF),17公(GPM)),转基因阴性羊(GN组)43只(25母(GNF),18公(GNM)),非转基因超细毛羊(NG组)29只(18母(NGF),11公(NGM))。取直肠粪样,应用IIlumina HiSeq高通量测序技术测定粪便样本中细菌的16S rRNA V3-V4区序列,分析转基因超细毛羊与非转基因羊间肠道粪样细菌群落组成。结果表明,共计得到17个门,32个纲,56个目,94个科,228个属及185个种;LEfSe分析显示,GPF组有10个生物标记物;GPM组有5个,均是反刍动物肠道菌群的常见定植菌;NGF组的生物标记物为拟杆菌BS11科;NGM组为厚壁菌门。均为反刍动物肠道菌群的主要优势菌。3组肠道菌群的共享菌分析显示,在门纲目科属种6个分类水平拥有共享菌比例高达91%~94%。本研究证实,转入IGF-1基因并未改变超细毛羊肠道菌群的整体结构分布,转基因羊具有生物安全及环境安全性。 王新华 张星星 王立民 黄新 韩猛立 张译元 郭延华 唐红 何延华 钟发刚 周平关键词:IGF-1基因 超细毛羊 细菌多样性 转基因生物安全 捻转血矛线虫Hc38基因部分功能域的原核表达与鉴定 2012年 为原核表达捻转血矛线虫Hc38基因的保守结构域,本研究参照GenBank中Hc38基因序列设计引物,扩增出Hc38基因的保守结构域序列,命名为HcP,将其克隆到表达载体pET32a中,并转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和western blot结果表明,HcP基因在大肠杆菌中高效表达,表达的重组蛋白分子量约为49.4 ku,并且表达产物能够与感染捻转血矛线虫的山羊血清产生特异的免疫印记条带,具有良好的反应原性。 陈南颖 何延华 王新华 薄新文 张兴亚关键词:捻转血矛线虫 原核表达 保守结构域 表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析 被引量:5 2021年 试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E 2基因克隆后测序,根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化,再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中,并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞,构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000,经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后,对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛,在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清,用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示,PCR扩增到了1149 bp的目的片段,乳酸菌密码子偏嗜性优化后,GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符,在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带,与预期蛋白大小一致,且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明,表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应,该重组菌具有较好的免疫原性。 吴桐忠 努尔赛力克·努素甫 黄新 韩猛立 张星星 张倩 王新华 何延华 钟发刚关键词:乳酸乳球菌 免疫原性