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黄新: 作品数：144 被引量：371H指数：10; 供职机构：新疆农垦科学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>

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抗牛结核分枝杆菌VHH抗体T7噬菌体库的构建与筛选被引量：4: 2019年; 为获得抗牛结核分枝杆菌的VHH纳米抗体,本研究利用牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白免疫双峰驼,免疫效价达到1∶8 000后采外周血分离淋巴细胞,提取RNA反转录成cDNA,利用巢式PCR方法扩增出编码单域抗体VHH的400 bp基因片段。将目的片段用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,与T7噬菌体载体臂T7Select 10-3RI Arms连接,再通过体外重新包装含目的片段的噬菌体。对建立的VHH噬菌体抗体库进行鉴定,原始文库库容为5.7×10~8 PFU,库阳性率为85.7%。通过4轮生物亲和淘选,筛选并表达出2株高特异性的VHH抗体,均对牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白具有特异性。本研究为进一步探讨VHH抗体在牛结核病的诊断和治疗奠定了基础。; 杨艳丽张齐张星星许龙黄新吴桐忠韩猛立钟发刚张小莺; 关键词：牛结核分枝杆菌

新疆食源性单增李斯特菌监测及血清型分析被引量：7: 2020年; 目的了解新疆食品中单增李斯特菌的污染状况,为食源性疾病的监测提供科学依据。方法按照GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》,共监测分析了2013~2019年的3329份样品。结果在3329份样品中共检出59份单增李斯特菌阳性样品,检出率为1.77%;共分离得到63株单增李斯特菌,分为4个血清型(1/2a、1/2b、1/2c和4b),优势血清型为1/2a,占57.14%(36株)。食品中存在不同血清型混合污染。在即食食品中监测到4b型。结论新疆食品中存在单增李斯特菌的污染,卫生监督部门尤其要加强肉制品和即食食品的监管力度。; 钱晶杜冬冬刘玉霞殷月兰王国红罗瑞峰黄新张星星康立超; 关键词：食源性致病菌单增李斯特菌血清型

多杀性巴氏杆菌分离鉴定及序列分析被引量：8: 2013年; 旨在了解新疆地区多杀性巴氏杆菌主要流行株的特性。通过病原的分离纯化、PCR扩增及测序,分析8株多杀性巴氏杆菌的血清型,16SrDNA基因、ompH基因和ompA基因的差异。结果表明,3株羊源、2株牛源和1株禽源分离株为荚膜A型,1株牦牛源分离株为荚膜B型,1株标准株为荚膜E型,均具有很强的致病性。分离株与GenBank公布的代表株的16SrDNA基因、ompH及ompA基因同源性分别为93%～100%、93%～100%、98%～100%。ompH基因的ORF氨基酸C端最后10个氨基酸变化较大,分离到5株ompA基因的ORF氨基酸序列N端多出6个氨基酸(M-K-R-I-I-Q)替代原先的起始位置。可见:新疆主要流行株为强致病性的荚膜A型,且有出现变异趋势。; 康立超黄新韩猛立王正荣何延华谭鹏飞薄新文钟发刚王新华; 关键词：多杀性巴氏杆菌 RDNA

牲畜体尺自动测量装置: 本实用新型提供牲畜体尺自动测量装置，涉及测量技术领域，包括：支撑板、连接板和皮尺，所述支撑板设置有两个，所述连接板固定安装在两个支撑板之间。本实用新型，在使用时，通过四个方位的弹性夹片将皮尺的位置限定，当牛的前蹄跨过皮尺...; 钟发钢韩猛立代蓉张宾汪保刘长彬黄新杨杨张星星张倩吴桐忠

牛IFN-α、IFN-β及IFN-γ mRNA实时SYBR GreenⅠ定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 2010年; 为建立灵敏度高、特异性强、能够快速检测牛α-、β-、γ-干扰素(BoIFN-α、BoIFN-β、BoIFN-γ)mRNA的实时荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的BoIFN-α、BoIFN-β和BoIFN-γ基因序列,分别在其保守区内设计并合成特异引物,以牛3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法。将BoIFN-α、BoIFN-β和BoIFN-γcDNA分别克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌DH5α内,经PCR及测序鉴定,将得到的阳性重组质粒制备成标准品,建立SYBR Green荧光定量PCR标准曲线并分析溶解曲线,进行灵敏性、特异性和重复性试验。结果表明:BoIFN-α、BoIFN-β、BoIFN-γ和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×101copies/μL～1×107copies/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.991。熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,特异性和重复性较好。本研究建立的检测牛IFN-α、IFN-β和IFN-γmRNA的实时荧光定量PCR方法,为牛IFN mRNA水平上的定量分析奠定了基础。; 韩猛立杨井泉姚守秀黄新薄新文钟发刚; 关键词：SYBR Β-干扰素

细菌性牛呼吸道疾病的研究进展被引量：39: 2013年; 牛呼吸道疾病(BRD)是由多种病毒和细菌与外界环境相互作用而引起的一种严重的呼吸系统疾病,是引起舍饲牛发病和死亡的主要原因,给北美和世界养牛业造成巨大的经济损失。作者就引起BRD的主要细菌性病原体如溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、昏睡嗜血杆菌、牛支原体及其他相关病原体和临床症状、病理学变化、饲养管理和治疗药物的选择等进行了阐述,以期为该病的治疗和防控提供参考。; 韩猛立康立超钟发刚黄新谭鹏飞; 关键词：细菌病原体

羊源D型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及毒力基因检测被引量：16: 2019年; 为了确定石河子地区规模化羊场出现呼吸道症状死亡羊的细菌性病原,采用常规细菌分离鉴定方法、细菌16SrRNA序列分析以及多杀性巴氏杆菌特异性基因kmt,从病变肺组织分离鉴定细菌,利用5个荚膜血清型特异性基因确定其血清型,扩增分离株的16个毒力相关基因,分析分离菌致病性和对常用抗菌药物的耐药性。结果表明,从病羊的病变肺组织中分离鉴定到一株血清D型多杀性巴氏杆菌,具有较强的致病性;携带8个毒力相关基因,其片段序列与NCBI上己公布的多杀性巴氏杆菌参考株同源性在99%以上;分离株对青霉素、林可霉素、庆大霉素、复方新诺明耐药,对其他23种药物敏感。; 王蕾邬琴柴迎锦梅朱园郭强强黄新韩猛立张星星周霞钟发刚; 关键词：毒力基因

捻转血矛线虫Hc38基因保守结构域所在片段的克隆及原核表达: 2009年; 参照捻转血矛线虫Hc38基因核酸序列(登录号:AY749124)的保守结构域设计1对引物,采用RT-PCR方法从绵羊捻转血矛线虫雌性成虫中扩增出约429 bp的cDNA序列,将其克隆到pMD19-T中,经酶切鉴定证实,并进行序列测定。与AY749124序列同源性为99%。进一步将克隆基因与原核表达载体pPRO EX HTa构建重组表达载体,经IPTG诱导,能在DH5a细菌中表达了相对分子质量约17 000的融合蛋白。经Western blot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与捻转血矛线虫阳性血清发生特异性反应。; 赵军明荣光郑金海王新华薄新文刘志强黄新罗盘棋任耀军; 关键词：捻转血矛线虫基因克隆原核表达

高通量测序分析放牧夏洛莱牛与舍饲夏洛莱牛的肠道菌群结构: 引言肠道是动物体消化吸收营养物质的主要场所,起到关键作用的就是其中定殖的微生物,肠道微生物与生物体物质代谢、能量流动、信号传导等有重要的调控作用,并且对动物的饮食、营养、免疫、神经调节以及慢性疾病的产生有重要的影响,目前...; 张星星黄新韩猛立吴桐忠何延华钟发刚

卵巢打点注射质粒pIRES2-EGFP生产转基因兔的研究(英文)被引量：1: 2010年; 本研究以绿色荧光蛋白为报告基因,转染兔卵母细胞,探索建立操作方便、效率高、成本低、可定量生产转基因兔的可行性方法。选择14只成年新西兰雌兔,每侧卵巢内分别打点注射0.25 mL 0.5-0.8 mg/mL的质粒,注射后第3日、第16日和第31日进行人工辅助配种;卵巢注射后第3日、第16日和31日随机各取1只雌兔卵巢做冰冻切片,置荧光显微镜下观察绿色荧光;应用PCR和Southern杂交检测转基因新生仔兔阳性率。结果经荧光显微镜观察,卵巢注射后第3日配种的雌兔卵巢冰冻切片及48 h以后的胚胎呈现绿色荧光;卵巢注射报告基因后第3日配种的雌兔后代阳性率最高,PCR和Southern杂交检测结果分别为72.7%和45.5%;第31日配种的后代阳性率最低,分别为36.8%和15.8%;第16日配种、第3日配种和第31日配种雌兔的阳性后代数量呈递减趋势。卵巢注射后第3日配种,虽然后代阳性率较高,但是其产仔数最少。实验结果表明,用注射器直接对卵巢打点注射外源基因生产转基因兔的方法操作简便、高效,为日后大规模制备一些大型家畜的转基因后代奠定了基础。; 宋天增冯静曾宪垠杨剑波杨华韩猛立杨井泉黄新张红琳陈永耀贾斌石国庆; 关键词：卵巢转基因兔

黄新

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