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刘昆梅

作品数:46 被引量:56H指数:5
供职机构:宁夏医科大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏医科大学校级科研项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>

文献类型

  • 27篇期刊文章
  • 19篇专利

领域

  • 21篇医药卫生
  • 12篇生物学
  • 3篇轻工技术与工...
  • 1篇农业科学

主题

  • 25篇幽门螺
  • 22篇幽门螺旋杆菌
  • 22篇螺旋杆菌
  • 21篇表位
  • 17篇多表位
  • 14篇疫苗
  • 14篇细胞
  • 13篇重组抗原
  • 10篇组件
  • 10篇核心组件
  • 9篇表位疫苗
  • 8篇靶向
  • 8篇M细胞
  • 7篇多表位疫苗
  • 7篇特异
  • 7篇基因
  • 6篇特异性
  • 6篇尿素酶
  • 6篇免疫应答
  • 6篇抗原

机构

  • 44篇宁夏医科大学
  • 8篇中国药科大学
  • 5篇苏州市药品检...
  • 3篇青海大学
  • 1篇宁夏大学
  • 1篇南京医科大学
  • 1篇烟台大学
  • 1篇苏州市立医院

作者

  • 46篇刘昆梅
  • 34篇郭乐
  • 11篇汤锋
  • 9篇刘宏鹏
  • 9篇杨华
  • 8篇奚涛
  • 7篇徐广贤
  • 6篇李元
  • 5篇秦玉红
  • 5篇廖国玲
  • 4篇张帆
  • 4篇张春
  • 4篇楚元奎
  • 3篇丁娜
  • 3篇孙涛
  • 2篇和祯泉
  • 2篇李润乐
  • 2篇崔建奇
  • 2篇王峰
  • 2篇贾伟

传媒

  • 7篇中国生物工程...
  • 3篇中国药科大学...
  • 2篇中国生物制品...
  • 2篇生物技术
  • 2篇中国细胞生物...
  • 2篇生物技术进展
  • 1篇药物生物技术
  • 1篇药物分析杂志
  • 1篇西北药学杂志
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇海峡药学
  • 1篇医学研究生学...
  • 1篇青海医学院学...
  • 1篇现代肿瘤医学
  • 1篇宁夏医科大学...

年份

  • 2篇2023
  • 7篇2022
  • 5篇2021
  • 6篇2020
  • 2篇2019
  • 6篇2018
  • 2篇2017
  • 1篇2016
  • 7篇2015
  • 2篇2014
  • 4篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2010
46 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
幽门螺旋杆菌重组尿素酶B亚基的纯化及其免疫学性质的研究(英文)被引量:2
2014年
目的:幽门螺旋杆菌(Hp)尿素酶是Hp重要的定制因子和致病因子,Hp尿素酶活性位点位于Hp尿素酶B亚基(Ure B),研发基于Ure B的Hp疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。方法:主要利用基因克隆技术从幽门螺旋杆菌标准菌株SS1(Hp SS1)获得Hp尿素酶B亚基基因,并构建含有重组Hp尿素酶B亚基(rU reB)基因的重组表达载体p ET-rU re B及其重组菌株;重组菌株经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAE Sepharose FF阴离子交换层析纯化重组尿素酶B亚基(rU re B),并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,研究rU re B的免疫学性质。结果:通过基因克隆技术成功获得了Hp尿素酶B亚基基因,并成功构建了重组表达载体p ET-rU re B及其重组菌株BL21(DE3)/p ET-rU re B,经蛋白表达优化及纯化,可获得高纯度(96.5%)的重组蛋白rU re B。重组蛋白rU re B辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA鉴定小鼠能够产生针对天然Hp尿素酶和Ure B的高滴度特异性抗体,且能够显著性抑制Hp尿素酶的活性。结论:重组Hp尿素酶B亚基能够在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,具有较高的免疫学特异性,其抗体能够有效抑制Hp尿素酶活性。为研究基于尿素酶的防治Hp感染的Hp疫苗奠定了一定的实验基础。
秦玉红刘昆梅廖国玲杨华徐广贤李秀萍郭乐
关键词:幽门螺旋杆菌尿素酶
幽门螺旋杆菌ATCC 43504感染BALB/c小鼠动物胃炎模型的建立及分析被引量:3
2015年
利用幽门螺旋杆菌标准菌株建立稳定可靠的幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染小鼠胃炎模型对Hp疫苗研制、Hp致病机制的研究及抗Hp药物的筛选具有重要意义。通过灌胃国际标准菌株幽门螺旋杆菌Hp ATCC 43504,构建了BALB/c小鼠动物胃炎模型。利用小鼠胃部Hp尿素酶活性检测、Hp的定量培养、PCR检测、组织病理学等多种方法鉴定BALB/c小鼠动物胃炎模型。通过Hp诊断试剂盒检测,造模组小鼠的胃组织能使Hp尿素酶试剂变色,呈现玫瑰红色,而健康小鼠的胃组织不能使Hp尿素酶试剂变色,依旧呈现黄色;通过小鼠胃组织匀浆液培养Hp,造模组小鼠的胃组织匀浆液均可在BHI血平板长出Hp菌落,而对照组小鼠的胃组织匀浆液不能培养出Hp菌落;利用PCR对造模组和对照组BALB/c小鼠的胃组织进行Hp检测,造模组小鼠胃组织可扩增出150 bp的DNA产物,而对照组小鼠胃组织无扩增产物;通过HE染色法观察小鼠胃部病理变化和炎症情况,与健康BALB/c小鼠比较,造模组小鼠胃粘膜和粘膜下层有大量白细胞浸润,胃部炎症明显。利用国际标准菌株Hp ATCC 43504菌株成功构建了BALB/c小鼠胃炎模型,为评价防治Hp感染药物的效果奠定了实验基础。
刘昆梅刘宏鹏郭乐
关键词:幽门螺旋杆菌胃炎模型小鼠
幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用
本发明提供了幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用,属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗GEM‑SAM<Sup>E</Sup>‑FVpE,主要是将含有核心组件SA...
刘昆梅郭乐杨华王淑娥张帆姜中佳
M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用
本申请提供了M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用,属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗,主要将幽门螺旋杆菌多表位肽WAE连接进靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统,转化进乳酸菌,制备出可...
刘昆梅郭乐姜中佳王淑娥张帆李元
文献传递
幽门螺杆菌的免疫学检测技术及其主要抗原表位
2021年
目的了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用,为临床诊断及生物技术药物开发提供参考。方法查阅相关文献并结合本课题组的研究,分析H.pylori的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用。结果基于抗原-抗体反应的免疫层析技术是H.pylori的主要体外检测技术。H.pylori特异性抗原是基于免疫反应H.pylori检测的关键,也是相关疫苗开发的关键。尿素酶(Ure)、细胞毒素相关蛋白A/L(CagA/L)、空泡毒素相关蛋白A(VacA)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)是H.pylori致病性关键表面抗原和病理学基础。结论基于多种抗原(或抗体)的组合表位同时具备了高灵敏度和高特异性的优点,其在H.pylori诊断和疫苗及抗体等生物技术药物开发方面具有广阔的前景。
景荣先刘昆梅徐铠琳邢以文薛满汤锋郭乐张国林
幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用
本发明提供了幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用,属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗GEM‑SAM<Sup>E</Sup>‑FVpE,主要是将含有核心组件SA...
刘昆梅郭乐杨华王淑娥张帆姜中佳
文献传递
乌索酸通过抑制miR-21表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制被引量:6
2015年
探讨乌索酸通过调控miR-21表达从而诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制。采用MTT方法检测乌索酸对肝癌细胞增殖的抑制作用;qPCR检测肝癌细胞中miR-21的表达水平及乌索酸对HepG2细胞中miR-21表达的调控作用;转染miR-21 mimics进HepG2细胞中上调miR-21的表达后,MTT、流式细胞检测法、RT-PCR方法分别分析miR-21在乌索酸对细胞的增殖、凋亡以及对凋亡相关基因的调控过程中的作用。结果显示,与肝正常细胞L-02以及肝癌SMCC-7721、Bel-7402细胞相比较,乌索酸对肝癌HepG2细胞的增殖抑制效果最强,且HepG2细胞中miR-21的表达水平最高。乌索酸可下调HepG2细胞中miR-21的表达,且在24 h的下调作用最强。miR-21的表达上调可以部分抵消乌索酸对HepG2细胞的抑制增殖及促进凋亡,部分抵消下调凋亡抑制基因Bcl-2、survivin表达和上调促凋亡基因Bax表达的作用。结果提示,乌索酸通过抑制miR-21的表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡。
刘昆梅郭乐奚涛
关键词:乌索酸肝癌细胞MIR-21增殖凋亡
靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统、重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用
本申请提供了靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统、重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用,属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统,作为一种黏膜免疫投递工具,可用于表达多种来源不同的疫苗抗原,制备...
郭乐刘昆梅李元王淑娥刘宏鹏姜中佳
一种新型奥沙利铂衍生物5a的抗肿瘤活性研究及其机制探索
2013年
铂类配合物5a是从200多个新合成的铂类配合物中筛选得到。该文旨在研究其对多种肿瘤细胞的体外抗肿瘤作用,对正常细胞的毒性,同时对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。采用CCK8试剂盒检测5a对不同来源的肿瘤细胞的抑制作用。用透射电子显微镜观察5a作用后人结肠癌细胞HCT-116形态的变化。采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内活性氧水平的变化,并通过Western blot检测相关凋亡蛋白表达。结果显示5a可以抑制多种肿瘤细胞的增殖,呈剂量依赖性。透射电镜和流式细胞术检测结果表明,5a能诱导HCT-116发生凋亡,并使细胞内活性氧水平显著提高。5a作用后的HCT-116细胞呈现典型凋亡特征,并促使细胞色素C从线粒体释放到胞浆内,从而激活Caspase-9。总之,配合物5a在体外显示了良好的抗肿瘤活性,有成为一种新一代铂类抗癌药物的潜能,并能诱导HCT-116细胞发生内源性凋亡。
鲍维维王琰谢美娟刘昆梅邢莹莹奚涛
关键词:铂类药物抗肿瘤线粒体活性氧簇
幽门螺杆菌多价表位疫苗CWAE的表达及其免疫学性质的研究被引量:1
2019年
目的:利用生物信息学软件评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)多价表位疫苗CWAE的抗原结构,经原核表达获得高纯度CWAE蛋白,进而鉴定多价表位疫苗CWAE的免疫学性质。方法:通过生物信息学软件分析H. pylori多价表位疫苗CWAE的抗原结构;用人工合成的H. pylori多价表位肽融合基因WAE替换重组质粒pET28a-CUE中的UE基因,构建重组质粒pET28aCWAE。然后,将pET28a-CWAE转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并通过Ni-NTP镍离子亲和层析纯化抗原蛋白CWAE;利用GM1-ELISA鉴定CWAE中CTB组分的黏膜免疫佐剂活性。最后,通过ELISA和小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验检测CWAE激发BALB/c小鼠产生抗H.pylori抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答的能力。结果:通过生物信息学软件证实H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的结构;重组表达质粒pET28a-CWAE经PCR、双酶切和基因测序鉴定,融合基因CWAE与设计序列完全一致;重组基因工程菌株pET28a-CWAE/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,抗原蛋白CWAE主要以包涵体形式存在,经Ni-NTP镍离子亲和层析纯化,纯度约达93. 2%;GM1-ELISA实验证实,CWAE中CTB组分依旧保持有较好的黏膜佐剂活性;ELISA结果证实CWAE能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体,而小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验进一步证实CWAE能够激发针对H. pylori多种致病因子的淋巴细胞免疫反应。结论:H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的抗原结构,经原核表达可获得高纯度抗原蛋白,能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答。为研发防治H. pylori感染的多价表位疫苗奠定实验基础。
郭乐郭乐何萌张帆刘宏鹏刘宏鹏
关键词:幽门螺杆菌特异性抗体
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