郭乐
- 作品数：66 被引量：77H指数：5
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 幽门螺杆菌的免疫学检测技术及其主要抗原表位
- 2021年
- 目的了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用,为临床诊断及生物技术药物开发提供参考。方法查阅相关文献并结合本课题组的研究,分析H.pylori的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用。结果基于抗原-抗体反应的免疫层析技术是H.pylori的主要体外检测技术。H.pylori特异性抗原是基于免疫反应H.pylori检测的关键,也是相关疫苗开发的关键。尿素酶(Ure)、细胞毒素相关蛋白A/L(CagA/L)、空泡毒素相关蛋白A(VacA)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)是H.pylori致病性关键表面抗原和病理学基础。结论基于多种抗原(或抗体)的组合表位同时具备了高灵敏度和高特异性的优点,其在H.pylori诊断和疫苗及抗体等生物技术药物开发方面具有广阔的前景。
- 景荣先刘昆梅徐铠琳邢以文薛满汤锋郭乐张国林
- 幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用
- 本发明提供了幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗GEM‑SAM<Sup>E</Sup>‑FVpE，主要是将含有核心组件SA...
- 刘昆梅郭乐杨华王淑娥张帆姜中佳
- 文献传递
- 乌索酸通过抑制miR-21表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制被引量：6
- 2015年
- 探讨乌索酸通过调控miR-21表达从而诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制。采用MTT方法检测乌索酸对肝癌细胞增殖的抑制作用;qPCR检测肝癌细胞中miR-21的表达水平及乌索酸对HepG2细胞中miR-21表达的调控作用;转染miR-21 mimics进HepG2细胞中上调miR-21的表达后,MTT、流式细胞检测法、RT-PCR方法分别分析miR-21在乌索酸对细胞的增殖、凋亡以及对凋亡相关基因的调控过程中的作用。结果显示,与肝正常细胞L-02以及肝癌SMCC-7721、Bel-7402细胞相比较,乌索酸对肝癌HepG2细胞的增殖抑制效果最强,且HepG2细胞中miR-21的表达水平最高。乌索酸可下调HepG2细胞中miR-21的表达,且在24 h的下调作用最强。miR-21的表达上调可以部分抵消乌索酸对HepG2细胞的抑制增殖及促进凋亡,部分抵消下调凋亡抑制基因Bcl-2、survivin表达和上调促凋亡基因Bax表达的作用。结果提示,乌索酸通过抑制miR-21的表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡。
- 刘昆梅郭乐奚涛
- 关键词：乌索酸肝癌细胞MIR-21增殖凋亡
- 靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统、重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用
- 本申请提供了靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统、重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统，作为一种黏膜免疫投递工具，可用于表达多种来源不同的疫苗抗原，制备...
- 郭乐刘昆梅李元王淑娥刘宏鹏姜中佳
- 治疗性单克隆抗体类药物分析技术及其应用被引量：5
- 2021年
- 治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用。单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高。单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域。根据生产技术和工艺的不同,单抗类药物发展已经经历了4代。我国最近批准上市的信迪利单抗注射液、特瑞普利单抗注射液、注射用卡瑞利珠单抗和替雷利珠单抗注射液等均属于第3代人源化单克隆抗体药物。单抗类药物分子结构复杂,容易发生二聚体、多聚体、末端氨基酸突变等不均一性变化,严重影响临床用药的安全性和有效性。对单抗类药物的原液和成品进行有效的质量控制是确保该类产品安全性和有效性的重要措施。目前,单抗类产品质量控制与分析的主要方法包括高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、毛细管区带电泳(CZE)法、毛细管等电聚焦电泳(cIEF)法、成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法和十二烷基硫酸钠-毛细管电泳(CE-SDS)法等。本文就单抗类药物质量控制分析方法及应用进行综述,为相关研究及产品质量控制提供参考。
- 张国林景荣先郭乐邢以文薛满
- 关键词：酶联免疫吸附测定法毛细管区带电泳法
- 幽门螺杆菌多价表位疫苗CWAE的表达及其免疫学性质的研究被引量：1
- 2019年
- 目的:利用生物信息学软件评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)多价表位疫苗CWAE的抗原结构,经原核表达获得高纯度CWAE蛋白,进而鉴定多价表位疫苗CWAE的免疫学性质。方法:通过生物信息学软件分析H. pylori多价表位疫苗CWAE的抗原结构;用人工合成的H. pylori多价表位肽融合基因WAE替换重组质粒pET28a-CUE中的UE基因,构建重组质粒pET28aCWAE。然后,将pET28a-CWAE转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并通过Ni-NTP镍离子亲和层析纯化抗原蛋白CWAE;利用GM1-ELISA鉴定CWAE中CTB组分的黏膜免疫佐剂活性。最后,通过ELISA和小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验检测CWAE激发BALB/c小鼠产生抗H.pylori抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答的能力。结果:通过生物信息学软件证实H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的结构;重组表达质粒pET28a-CWAE经PCR、双酶切和基因测序鉴定,融合基因CWAE与设计序列完全一致;重组基因工程菌株pET28a-CWAE/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,抗原蛋白CWAE主要以包涵体形式存在,经Ni-NTP镍离子亲和层析纯化,纯度约达93. 2%;GM1-ELISA实验证实,CWAE中CTB组分依旧保持有较好的黏膜佐剂活性;ELISA结果证实CWAE能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体,而小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验进一步证实CWAE能够激发针对H. pylori多种致病因子的淋巴细胞免疫反应。结论:H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的抗原结构,经原核表达可获得高纯度抗原蛋白,能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答。为研发防治H. pylori感染的多价表位疫苗奠定实验基础。
- 郭乐郭乐何萌张帆刘宏鹏刘宏鹏
- 关键词：幽门螺杆菌特异性抗体
- 杀螟硫磷检测用修饰电极、其制备方法及杀螟硫磷检测方法
- 本发明提供了一种杀螟硫磷检测用修饰电极，包括玻碳电极和修饰在所述玻碳电极上的修饰涂层，所述修饰涂层由功能化离子液体和氮掺杂介孔碳组成，所述功能化离子液体为1‑羟乙基‑3‑甲基咪唑四氟硼酸盐。以上述杀螟硫磷检测用修饰电极作...
- 李永红刘新胜杨惠芳郭乐李雨彤
- 地西他滨逆转人乳腺癌细胞中miR-5047基因甲基化状态的研究
- 2021年
- 目的探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047表达及其启动子甲基化状态的影响。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR法分别检测人乳腺正常MCF-10A细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中miR-5047的表达水平及miR-5047启动子区的甲基化状态。用5μmol/L和10μmol/L浓度的地西他滨分别处理MDA-MB-231细胞,MSP法检测miR-5047启动子区的甲基化状态,qRT-PCR法检测miR-5047的表达。结果与人乳腺正常上皮细胞MCF-10A相比,乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞中miR-5047呈低表达,而其启动子区均呈高甲基化状态;地西他滨处理后,MDA-MB-231细胞中miR-5047启动子区的甲基化水平明显降低,miR-5047表达水平则显著升高。结论地西他滨可通过降低乳腺癌细胞中miR-5047基因启动子区甲基化水平从而促进miR-5047的表达。
- 楚元奎路玉祥方丹丹杨丽李元郭乐杨华
- 关键词：乳腺癌地西他滨去甲基化甲基化特异性PCR
- 靶向M细胞的GEM颗粒表面展示系统、颗粒疫苗及制备方法与应用
- 本申请提供了靶向黏膜M细胞的GEM颗粒表面展示系统、颗粒疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的靶向黏膜M细胞的GEM颗粒表面展示系统，可表达多种来源不同的疫苗抗原，用于制备GEM颗粒疫苗，提高口服...
- 郭乐刘昆梅王淑娥何萌李欣楚元奎
- 文献传递
- M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用
- 本申请提供了M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗，主要将幽门螺旋杆菌多表位肽WAE连接进靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统，转化进乳酸菌，制备出可...
- 刘昆梅郭乐姜中佳王淑娥张帆李元
