刘香利
- 作品数：41 被引量：190H指数：9
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- TaCYP78A5基因过表达小麦的遗传和功能初步分析被引量：3
- 2017年
- 为了验证小麦籽粒大小相关基因TaCYP78A5在小麦籽粒发育中的功能,对pINO启动子驱动的TaCYP78A5基因过表达的转基因小麦后代株系进行了鉴定,检测了T_0代植株目标基因拷贝数,定量分析了7个T_1代阳性植株的目标基因表达,并对其籽粒大小进行了统计。结果表明,利用Bar试纸条和目标基因特异PCR检测相结合的方法对21株转基因T_0代再生苗进行检测,共鉴定出14个阳性植株,除2个植株的目标基因拷贝数为3和1个植株为7外,其余11个T_0代转基因植株目标基因插入拷贝数均为1~2个,其中有6个单拷贝植株。与野生型相比,7个T_1代阳性植株目标基因表达量均极显著增加,粒厚和粒宽均有不同程度增加,粒重极显著增加。
- 陈之忍马猛申玉霞吴林楠刘香利赵惠贤
- 关键词：小麦BAR基因转基因株系
- 小麦TaGF14m基因的克隆及其盐胁迫响应分析被引量：1
- 2022年
- 14-3-3蛋白家族在真核生物中广泛存在且高度保守,可结合多种靶蛋白参与植物代谢、发育以及胁迫响应等多种生理过程和信号途径。TaGF14m基因是14-3-3基因家族成员之一。本研究以中国春为材料,对其进行了克隆和分析,并通过在拟南芥中过表达,分析该基因在盐胁迫下的功能。结果表明,TaGF14m基因含有5个外显子和4个内含子,开放阅读框为789 bp,编码262个氨基酸;小麦幼苗叶片中TaGF14m基因在盐胁迫下上调表达;与野生型拟南芥相比,过表达TaGF14m的转基因拟南芥在盐胁迫下生长受到明显抑制,根长也显著变短;SOS途径相关基因表达分析显示,TaGF14m基因可能通过SOS途径负调控盐胁迫耐受性。
- 刘佳月郭树娟郑昊元赵惠贤刘香利
- 关键词：小麦基因克隆盐胁迫
- 基因枪法介导的转KN2基因小麦的获得及鉴定被引量：1
- 2014年
- 【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织,经过除草剂(Phosphinothricin,草丁膦)筛选和愈伤组织分化获得再生植株,并对得到的再生小麦植株进行PCR检测。【结果】采用基因枪法共轰击小偃22的幼胚愈伤组织1 680个,共获得再生植株17株,移栽到花盆中成活15株;根据目标基因序列设计特异引物,对成活的小麦植株进行PCR检测,结果表明获得含有bar基因和KN2基因的转基因阳性植株分别为6株和4株,转化率分别为0.36%和0.24%,bar和KN2的共转化率为0.24%。【结论】KN2基因成功地转入到小麦品种小偃22中。
- 周鹏池青吕金洋刘香利赵惠贤
- 关键词：小麦基因枪法
- 小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因的花粉管通道法转化被引量：8
- 2008年
- 【目的】利用优质高分子量麦谷蛋白亚基对小麦进行遗传转化和品质改良。【方法】采用花粉管通道法,将小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因导入洛阳8716、陕354、陕893、小偃107和陕150 5种不含该亚基的小麦品种中,转化后代在大田播种出苗后,利用小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因特异性引物进行PCR检测,分析其转化率。【结果】不同品种、不同处理间转化率存在很大差异,其中以陕354授粉后切去柱头,滴加50 ng/μL DNA液处理的转化率最高,为1.01%,所有转化材料的平均转化率为0.56%。【结论】利用花粉管通道法对小麦进行遗传转化是可行的。
- 刘香利刘缙郭蔼光赵惠贤金伟波
- 关键词：小麦花粉管通道法转基因小麦PCR法检测
- 小麦遗传转化体系建立及高分子量麦谷蛋白14亚基基因的转化
- 小麦是世界上栽培面积最大的重要粮食作物。然而，小麦却是最后一个获得转化成功的重要禾谷类作物。主要原因就是目前常用的转化方法无论是基因枪法还是农杆菌介导法都依赖于组织培养技术，而小麦不同外植体组织培养受基因型影响很大，使其...
- 刘香利
- 关键词：小麦幼胚高分子量麦谷蛋白亚基
- TaNAC14转基因小麦外源目标基因拷贝数及遗传稳定性分析被引量：1
- 2020年
- 外源基因拷贝数是影响转基因植物遗传稳定性及其自身表达水平的重要因素。为了探析TaNAC14基因在小麦生长发育中的生物学功能,本研究通过农杆菌介导的遗传转化法获得了14个T0代TaNAC14转基因小麦植株,采用BASTA溶液涂抹和目标序列PCR检测相结合的方法,从14个转基因小麦植株中鉴定出9个阳性植株。通过TaqMan实时定量PCR方法,以小麦内源单拷贝基因Pinb为内参基因,对9个T0代转基因小麦阳性植株中外源目标基因拷贝数进行检测,结果表明,T0代转基因小麦再生植株中有5株为单拷贝,4株为双拷贝,其中单拷贝插入整合的比率接近55.6%。选取单拷贝转基因植株收获的种子进行种植,根据BASTA溶液涂抹鉴定对T0:1代小麦株系遗传情况进行分析,结果表明目标基因TaNAC14是可遗传的。此外,还对T1代转基因小麦目标基因表达水平进行测定,结果表明,与野生型JW1相比,各转基因小麦植株目的基因TaNAC14表达量均极显著增加。该研究结果为后续TaNAC14基因的功能研究奠定了基础。
- 张立坚池青杜琳颖郭利建李玉莲刘香利马猛马猛
- 关键词：小麦
- 热诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及烟草转化
- 2013年
- 选择标记基因安全性问题是限制转基因植物商品化种植的重要因素。为了从转基因后代中诱导性剔除选择标记基因,本研究克隆了拟南芥热激蛋白Hsp18.2基因启动子,并构建了Hsp18.2启动子诱导表达的CinH/Rs位点特异性重组删除植物表达载体。结果表明,利用农杆菌介导法进行了烟草转化,转化后的烟草经过除草剂筛选和PCR检测,得到转基因阳性植株。本研究为利用位点特异性重组建立植物无标记基因转化体系奠定了基础。
- 徐广博李政赵惠贤刘香利赵洁刘丹吴静
- 关键词：位点特异性重组选择标记基因
- 二穗短柄草成熟胚再生体系建立及农杆菌介导转化研究被引量：1
- 2016年
- 为建立二穗短柄草组织培养及遗传转化体系,以二穗短柄草BD21-3成熟胚为外植体,对成熟胚愈伤诱导、分化以及农杆菌侵染条件进行了研究。结果表明,在含有2.5mg·L^(-1) 2,4-D的培养基上,愈伤组织出愈率最高为93.83%;在含有0.2mg·L^(-1) KT的分化培养基上,分化率最高为38.18%;对二穗短柄草胚性愈伤组织农杆菌转化和GUS染色结果表明,侵染的过程中农杆菌菌液浓度OD_(600)为0.6、侵染时间为5min时转化率最高。
- 胡文祥杨帼一刘童赵惠贤刘香利
- 关键词：二穗短柄草成熟胚愈伤组织农杆菌
- 小麦遗传转化体系建立及基因转化
- 小麦是世界上最主要的粮食作物之一,应用生物技术对小麦进行品种改良是国内外学者研究的热点之一,而高效稳定的组织培养体系的建立是小麦遗传转化的基础。在小麦遗传转化中,幼穗和幼胚是使用最多的外植体。很多研究认为在小麦遗传转化中...
- 刘香利郭蔼光徐虹
- 关键词：高分子量麦谷蛋白外植体愈伤组织诱导再生率基因转化
- 醇溶蛋白酸性电泳及其在种质资源分析中的应用被引量：9
- 2001年
- 建立了 1个新的醇溶蛋白酸性电泳方法 ,并用此方法对不同倍性小麦品种及黑麦、小黑麦品种的醇溶蛋白组成进行了分析。结果表明 ,此方法不仅适用于小麦醇溶蛋白分析 。
- 刘香利郭蔼光李玉红
- 关键词：小麦醇溶蛋白
