宁其志 作品数:20 被引量:67 H指数:5 供职机构: 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省应用基础研究计划项目 四川省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
负载肺癌抗原DC疫苗抗肿瘤免疫实验 被引量:5 2008年 目的探讨负载人肺癌细胞株A549冻融抗原DC疫苗体外抗肿瘤免疫效应。方法自脐血分离单核细胞,经rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-α诱导树突状细胞(DC),负载人肺癌细胞株A549冻融抗原、LPS诱导成熟,利用免疫磁珠分选获得功能性肺癌DC疫苗(UbDC/AgL),ELISA测定UbDC/AgL培养上清中细胞因子浓度、LDH法测定特异性细胞杀伤(CTL)活性及MTT法检测自身混合淋巴细胞反应(AMLR)。结果UbDC/AgL细胞组IL-1、IL-12、IL-6和IFN-β含量明显高于UbDC/Ag和UbDC组(P<0.01);UbDC/AgL疫苗细胞能有效诱导肿瘤特异性CTL活性,对A549细胞有特异性杀伤作用(P<0.01),并能有效促进淋巴细胞增殖。结论负载肿瘤冻融抗原DC疫苗,能有效激活T淋巴细胞进而诱导肿瘤特异性杀伤效应。 张洁 林苹 陆燕蓉 王琪 宁其志关键词:树突状细胞 肿瘤抗原 疫苗 抗肿瘤免疫 胃肠道恶性肿瘤患者治疗前后血清CEA水平的动态分析 目的:探讨治疗前后不同时期胃肠道恶性肿瘤患者血清 CEA 水平的变化规律及临床意义。方法:采用 CEA 单克隆抗体酶联免疫检测试剂盒,检测患者血清 CEA 水平,用统计学方法对检测结果进行比较分析。结果:胃肠道恶性肿瘤患... 陆燕蓉 林苹 张洁 黄孝忠 宁其志关键词:胃肠道恶性肿瘤 CEA 文献传递 Lewis肺癌耐药细胞的诱导及其耐药性的初步研究 被引量:2 2002年 目的 建立肺癌耐药动物模型 ,诱导耐ADM的Lewis肺癌细胞株 ,并鉴定其生长特性、细胞内药物的释放特性及耐药谱。方法 用渐进式给药法诱导建立耐ADM的Lewis肺癌细胞株 ,绘制生长曲线 ,计算倍增时间 ;用IPP图象分析系统观察比较耐药细胞及其亲本细胞内ADM和Rh B的荧光光密度 ;荧光分光光度计法测定细胞内ADM含量并绘制ADM释放曲线 ;MTT法测定细胞的IC5 0 ,计算耐药指数。结果 经 14个月的诱导培养获得了能在 0 .4μg mlADM中稳定生长的Lewis肺癌细胞株———L3 8/ADM ,其在动物体内的成瘤率为 10 /10 ;在 0 .15mg/lADM和普通 164 0培养基中的倍增时间分别为 2 2 .0h和 2 1.8h ;在 4mg/lADM和Rh B中培养后 ,耐药细胞及其亲本细胞内的荧光光密度比分别为 2 .82∶1和 2 .65∶1,耐药细胞内的ADM含量仅为其亲本细胞的 64 .7% ,但其药物释放速度无明显差异。L3 8/ADM细胞除对ADM耐药外 ,对DNR、VCR、MIT和CDDP也有不同程度的耐药性。结论 L3 8/ADM是一株典型的MDR细胞株 ,其耐药作用可能是由于胞膜的药物渗透受阻所至。 陆燕蓉 林苹 张洁 王修杰 黄孝忠 宁其志关键词:LEWIS肺癌 多药耐药 MTT法 荧光分光光度法 高强度聚焦超声对人乳腺癌细胞的生长抑制作用及机理研究 被引量:12 2004年 目的 研究高强度聚焦超声 (HIFU)对人肿瘤细胞的杀伤作用 ,并探索其作用机理。方法 用不同强度HIFU处理人乳腺癌细胞 MCF- 7,用台盼蓝排斥法染色、细胞增殖试验 (MTT法 )、克隆形成实验研究 HIFU对癌细胞的杀伤和生长抑制作用 ;用流式细胞术检测 HIFU对癌细胞周期、凋亡及相关基因表达的影响。结果 用 HIFU处理后 ,癌细胞死亡率升高 ,增殖活性降低 (P<0 .0 5 ) ,克隆形成下降 (P<0 .0 0 1) ,G0 /G1 期细胞数增加 (P<0 .0 5 ) ,S期细胞数减少 (P<0 .0 1) ,凋亡指数升高 (P<0 .0 1) ,热休克蛋白表达升高 (P<0 .0 5 ) ,P5 3、BCL- 2、FAS表达阳性细胞数与对照组比 ,无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 HIFU对人乳腺癌细胞有明显的杀伤及抑制生长和克隆形成作用 ,其机理与抑制 DNA合成有关 ;HIFU具有诱导癌细胞凋亡作用 ,可能与 P5 3、BCL- 2、FAS的介导和调控无关。 王修杰 袁淑兰 张洁 陆燕蓉 王艳萍 陈晓禾 宁其志 傅玉瑞 刘柏涛 曾文富 何跃明关键词:乳腺癌 凋亡 人宫颈癌DNA与HPV16型核酸分子杂交的研究 1992年 本文以人乳头状瘤病毒(HPV)16型-PBR_(322)重组质粒,对大肠杆菌HB101进行转化实验。经筛选、扩增、酶切、电泳鉴定。获得满意的电泳图谱及kb值,HPV-16Bam HI DNA为7.2kb,其260/280O.D比值为1.9-2。纯度合乎要求,可用以制备探针。以HPV-16DNA7.2kb片段为探针,应用^(32)P(α)-dATP标记进行了点杂交及Southern印迹杂交实验。结果表明38例宫颈癌组织DNA,其点杂交阳性率为76.3%,Southern杂交阳性率为65.7%。点杂交与Southern杂交结果基本符合。上述结果说明了在人宫颈癌组织中,存在着HPV-16相关的基因组,Southern杂交表明其以整合形式存在。说明宫颈癌的发病可能与HPV-16型的感染有密切关系。从分子水平进一步探讨了宫颈癌的病毒病因。 黄光琦 李茵 黄一峰 毛婷 邓文杰 宁其志关键词:乳头状瘤病毒 宫颈癌 HGPRT缺陷型Lewis肺癌细胞株的筛选及其生物学特征 被引量:4 2001年 目的 为细胞融合等实验提供次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HGPRT)缺陷细胞株。方法 用 8 氮杂鸟嘌呤 ( 8 AG)对Lewis肺癌细胞株L3 8进行长期渐进式给药 ,从中克隆筛选出HGPRT缺陷细胞株 ,并观察其体内成瘤和肺转移特性。结果 经过 1年的筛选鉴定 ,获得了在 2 0mg/L 8 AG和 16 40培养液中能长期稳定生长 ,在HAT选择性培养基中不能形成克隆的AL990 1细胞株。AL990 1和L3 8的染色体众数分别为5 8和 6 2 ,在C5 7BL/ 6小鼠体内成瘤率均为 10 0 % ( 10 / 10 ) ,肺转移率分别为 30 % ( 3/ 10 )和 70 % ( 7/ 10 )。结论 HGPRT缺陷型AL990 1细胞株基本保持了L3 8细胞的生物学特征 ,可作为制备Lewis肺癌DC融合疫苗的亲本抗原细胞。 陆燕蓉 林苹 张洁 王修杰 周宏远 黄孝忠 宁其志 江映红 杨可关键词:HGPRT LEWIS肺癌 生物学特征 细胞融合技术 小鼠肺癌细胞与树突状细胞融合的研究 目的:为了改善肺癌细胞上的共刺激分子的表达,以期提高肺癌细胞作为疫苗的有效性。方法:将小鼠骨髓细胞在体外用 GM -CSF 和 TNF-α诱导为成熟树突状细胞(BmDC),再与小鼠 Lewis 肺癌 AL9901 进行融... 林苹 陆燕蓉 张洁 黄孝忠 宁其志关键词:树突状细胞 细胞融合 文献传递 突变K-ras基因修饰的肺癌树突状细胞疫苗的体内实验研究 被引量:7 2001年 周清华 赵峰 陆燕蓉 张洁 覃扬 孙芝琳 秦建军 王允 刘伦旭 宁其志 李潞 朱文 车国卫关键词:K-RAS基因 肺癌 免疫治疗 树突状细胞 Lewis肺癌耐药细胞的诱导及其耐药性的初步研究 肿瘤的多药耐药是化疗失败的重要原因之一,研究其耐药机制,通过各种途径逆转其耐药性可改善化疗的效果.小鼠肿瘤对抗癌药物的敏感性高于人类肿瘤,因此诱导耐药的小鼠肿瘤细胞、建立耐药动物模型,对于研究肿瘤耐药的相关机制和逆转耐药... 陆燕蓉 林苹 张洁 王修杰 黄孝忠 宁其志关键词:化疗 耐药细胞 多药耐药 动物模型 文献传递 表达B7分子的肺癌融合细胞刺激的主动免疫应答 近年来,对肿瘤疫苗的研究已成为肿瘤免疫治疗备受关注的热点之一.而多数肿瘤细胞低表达或不表达B7分子是逃逸抗肿瘤免疫作用的重要原因之一.为此,本文制备了小鼠肺癌细胞株与活化B淋巴细胞融合的细胞,研究了其融合细胞诱导的抗肿瘤... 林苹 张洁 陆燕蓉 黄孝忠 宁其志关键词:肺癌 细胞融合 文献传递