张冬星
- 作品数：46 被引量：154H指数：7
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省重大科技攻关项目吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 被膜态与浮游态猪源乳杆菌上清液抑菌活性比较分析被引量：2
- 2019年
- 试验旨在比较分析猪源约氏乳杆菌L-76和嗜淀粉乳杆菌L-102被膜态和浮游态下其上清液对病原菌的抑菌活性。采用结晶紫染色法测定L-76和L-102的生物被膜形成能力,研究其被膜态和浮游态乳杆菌上清液及上清液与不同影响因素作用后的抑菌活性,并利用扫描电镜观察其两种状态下的上清液对指示菌形态的影响。结果显示,L-76、L-102乳酸菌具有较强的生物被膜形成能力,被膜态和浮游态乳杆菌L-76、L-102具有良好的抑菌活性,其上清液经蛋白酶作用后,被膜态L-76和L-102上清液的抑菌圈直径比浮游态明显变小;经过氧化氢酶和不同温度作用后,两种状态的乳杆菌上清液的抑菌活性无明显变化(P>0.05),但在pH 3.0作用下,两种状态的乳杆菌上清液的抑菌效果最好;扫描电镜结果显示,被膜态乳杆菌上清液对金黄色葡萄球菌的形态影响略大。综上所述,两种状态下乳酸杆菌上清液中均含有抑菌物质,且被膜态乳酸杆菌上清液中的抑菌物质含量略多或活性略高。
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- 关键词：乳杆菌生物被膜抑菌性
- 维氏气单胞菌OmpAⅠ基因重组植物乳杆菌的构建及其表达产物的免疫原性分析被引量：3
- 2017年
- 为构建维氏气单胞菌OmpAⅠ基因重组植物乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,将目的基因克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体p SIP409中,并电转至植物乳杆菌中,经诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,LP/p SIP409-OmpAⅠ重组植物乳杆菌出现一条约42 ku的印迹,与预期大小相符,表明重组蛋白具有反应原性。LP/p SIP409-OmpAⅠ重组植物乳杆菌免疫鲫鱼后,在第25天血清中Ig M水平达到高峰;RT-PCR检测发现免疫后鲫鱼肝、脾、肾及心组织中的细胞因子IL-8、IFN-γ与IL-1β表达水平均有不同程度提升;攻毒后LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫组的保护率在65%以上,高于对照组的存活率。结果表明,应用重组植物乳杆菌LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫鲫鱼能刺激机体产生免疫应答反应,为预防鱼类维氏气单胞菌感染的重组植物乳杆菌口服制剂的研发奠定了基础。
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- 关键词：维氏气单胞菌免疫原性
- 青虾源维氏气单胞菌胞外产物生物学特性及蛋白成分分析被引量：2
- 2017年
- 为了研究维氏气单胞菌胞外产物在青虾感染中的致病作用以及维氏气单胞菌的致病机理,本试验以青虾源维氏气单胞菌QXF0711B为研究对象,提取其胞外产物,采用打孔法测定其胞外产物的酶活性,并对溶血活性进行溶血谱分析,同时分析其致病性。应用液相质谱与串联质谱相结合方法(LC-MSMS)对其胞外产物蛋白成分进行鉴定,利用Gene Ontology(GO)对已鉴定蛋白进行生物学过程、分子功能和细胞组分的分类分析。结果表明:QXF0711B菌株胞外产物具有淀粉酶活性、脂肪酶活性、蛋白酶活性和溶血活性,不具有明胶酶活性;其可溶解多种动物红细胞,尤以对鱼类红细胞溶血性更强,但对鸡、鸭红细胞无溶血活性。通过对菌株胞外产物蛋白成分分析显示有90种蛋白:共参与45种生物学过程,主要涉及碳水化合物代谢过程、运输等;共有46种分子功能,主要涉及DNA结合、ATP结合、金属离子结合等;为12种细胞组分,主要包括膜的有机组成、细胞质、细胞外膜等。
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- 关键词：维氏气单胞菌胞外产物酶活
- 猪源生物被膜乳酸菌的筛选与体外益生特性评价被引量：3
- 2019年
- 为了研制优良的猪用微生态制剂,从健康猪的新鲜粪便中成功分离获得1株抑菌效果较好、生物被膜形成能力较强的L-11乳酸菌,经16S rDNA分子生物学鉴定,确定该分离株为约氏乳杆菌。并进一步对其体外益生特性包括产酸能力,耐酸碱、耐胰蛋白酶、耐高温、生长曲线、抑菌性能、黏附性以及对小鼠的致病性进行了检测。结果表明,该菌株具有一定的产酸能力,对pH4.0~10.0、10 g/L胰蛋白酶、50和60℃高温环境具有耐受能力;并在MRS液体培养基中培养大约4 h后进入对数生长期,12 h后达到稳定期;此外,该乳酸菌分离株具有广泛的抑菌谱和一定的黏附性,安全、无毒性。这说明乳酸菌L-11分离株可作为猪用益生菌研制的菌株。
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- 关键词：乳酸菌生物被膜益生特性
- 维氏气单胞菌TH0426株外膜蛋白lamB基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：5
- 2017年
- 为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本试验对A.veronii的lamB基因进行了克隆,构建了原核表达质粒pET-30a(+)-lamB,并转化大肠杆菌BL21(DE3),将其表达后纯化重组蛋白Maltoporin,利用SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定。将灭活菌体+弗氏佐剂、纯化的Maltoporin蛋白、Maltoporin蛋白+弗氏佐剂及PBS分别免疫鲤鱼后,检测每周各试验组鱼体血清的免疫指标:酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力以及IgM抗体水平变化情况,并于加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护性试验。结果显示:重组蛋白Maltoporin免疫鲤鱼后能产生明显的免疫反应,保护率在84.2%以上;免疫后鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力较对照组有显著提高。结果表明,重组蛋白Maltoporin具有较好的免疫原性和保护作用,为进一步研究A.veronii外膜蛋白基因工程疫苗奠定一定的基础。
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- 关键词：维氏气单胞菌原核表达免疫原性
- 2株猪源乳酸杆菌的抗逆性和生长特性分析被引量：2
- 2021年
- 为分析猪源嗜淀粉乳杆菌L-102(Lactobacillus amylovorus)和约氏乳杆菌L-76(Lactobacillus johnsonii)的抗逆性和生长特性,为乳酸菌进一步的体外研究提供理论依据。分别对L-102、L-76乳酸杆菌的耐酸碱、耐胆盐、耐胰蛋白酶、黏附性、抑菌性、产酸能力、生长能力及对小鼠致病性进行了测定和分析。结果表明:乳酸杆菌L-102和L-76对pH 2~11的酸碱环境具有抵抗能力,可耐受生长介质中含0.1%~0.2%的胆盐和1%的胰蛋白酶;对IPEC-J2细胞有一定的黏附作用;能抑制大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的生长;L-102和L-76乳酸杆菌的产酸在pH 4.1~4.3;培养4 h后进入生长对数期;经50℃和60℃高温作用5~15 min,其活菌数可达到10^(7)CFU/mL;通过腹腔注射和灌胃小鼠发现,小鼠无死亡。表明嗜淀粉乳杆菌L-102和约氏乳杆菌L-76具有潜在的益生菌特性,有望发展成为用于养猪行业的饲用益生乳酸菌。
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- 关键词：抗逆性生物学特性
- 鲤鱼C5-I基因的克隆序列分析及原核表达
- 2019年
- 为进一步了解鲤鱼C5-I蛋白的生物学功能及其作为分子佐剂的可能,本研究扩增C5-I基因并通过同源性比对构建C5-I基因的系统进化树,利用相关软件对C5-I基因编码蛋白进行生物信息学分析,同时对其进行原核表达及其条件优化。结果显示,鲤鱼C5-I活性核心区基因全长468 bp,共156个氨基酸,经蛋白质理化特性分析表明,该蛋白以β折叠、无规则卷曲为主;诱导条件优化检测发现,在6 h,37℃下,采用0.4 mmol/L IPTG诱导效率最高;Western Blot分析显示,目的蛋白可与鼠抗C5-I蛋白血清特异性结合,表明表达的目的蛋白具有免疫原性,为研究鱼类补体的生物学功能及鱼类DNA疫苗中分子佐剂的开发奠定基础。
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- 关键词：克隆原核表达免疫原性
- 维氏气单胞菌胞外产物免疫反应蛋白的筛选被引量：1
- 2018年
- 为筛选维氏气单胞菌胞外产物的免疫反应蛋白,提取维氏气单胞菌TH 0426株胞外产物,利用双向电泳技术对其进行分离,比对蛋白胶与免疫印迹膜上的蛋白反应点,进行质谱鉴定。结果显示,应用免疫蛋白质组学方法筛选维氏气单胞菌胞外产物免疫反应蛋白,共得到24个免疫反应蛋白点,成功鉴定18个,经分析为11种蛋白,分别是肽酶S8、长链脂肪酸转运蛋白、溶血素样毒素、膜蛋白、主要外膜蛋白O mp AⅠ、麦芽糖、ABC底物结合转运蛋白和几种假定蛋白。本研究结果为维氏气单胞菌疫苗的研制奠定了基础。
- 单晓枫毕建飞张冬星陈龙康元环吴同垒孙武文钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌胞外产物
- 黄金鲫致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：3
- 2018年
- 为确定吉林省黄金鲫鱼发病死亡的原因，从患病黄金鲫体内分离到致病菌JLJ-1，对该茵进行形态学观察及生理生化特性的鉴定，并对16SrDNA和管家基因gyrB、rpoD、dnaJ序列、毒力基因携带情况及耐药性进行了分析。结果表明，该菌为革兰阴性菌，结合细菌形态学特征及其生理化生化特性与维氏气单胞菌（Aerornonas veronii，A．veronii）基本相同；16srDNA与gyrB、rpoD、dnaJ序列进化比对分析显示，该病原菌与A．veronii同属一个分支，且同源性较高。将分离菌人工感染黄金鲫，7d后黄金鲫全部死亡，且临床症状与自然病例相似。通过毒力基因检测发现。JLJ-1株可扩增出6种毒力因子：气溶素（aer）、细胞毒性肠毒素（act）、黏附素（Aha）、丝氨酸蛋白酶（set）、核酸酶（exu）及脂肪酶（liP）。药敏试验显示，该菌对氟苯尼考、头咆哌酮及头炮曲松等药物比较敏感。本研究为黄金鲫感染A．veronii的鉴定及治疗药物的选取提供科学依据。
- 贾俊鹏张冬星康元环张海月孙武文单晓枫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌黄金鲫毒力因子药敏试验
- 长春市售乌鳢携带嗜水气单胞菌情况调查被引量：2
- 2018年
- 为探讨乌鳢体内嗜水气单胞菌携带情况,本调查以长春市售表观健康乌鳢为研究材料,从其体内分离并鉴定嗜水气单胞菌,并对分离株携带毒力基因情况进行调查,同时选取代表株进行致病性试验。结果显示:共分离嗜水气单胞菌107株,其中56%以上分离株携带3种以上毒力基因,88.79%(95/107)的分离株携带Lux S基因;致病性试验结果显示,携带毒力基因菌株对小鼠、斑马鱼均有一定致病性,随着菌株携带毒力基因种类的增多,致病力也相应增强。研究结果对研发食用乌鳢的公共卫生安全具有一定意义。
- 单晓枫张冬星康元环孙武文吴同垒王桂芹钱爱东
- 关键词：乌鳢嗜水气单胞菌毒力基因
