林秀梅
- 作品数：25 被引量：34H指数：4
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 胎儿骨髓基质细胞与细胞因子支持人脐血单个核细胞体外扩增的研究被引量：8
- 2005年
- 为了探讨胎儿骨髓基质细胞(FBMSC)联合细胞因子对脐血单个核细胞(MNC)体外扩增作用的影响及比较扩增前后脐血(CB)CD34+细胞上细胞表面趋化因子受体CXCR4和黏附分子CD49d+(VLA4)的表达情况,将从新鲜CB标本中分离出的MNC分别接种于已建立的无血清培养体系,该体系分4组:A组为培养过程中不加细胞因子和基质细胞;B组为单用胚胎骨髓基质细胞支持;C组为单用细胞因子支持;D组为细胞因子和胚胎骨髓基质细胞联合支持。在0、6、10及14天检测细胞总数、CD34+细胞数及集落形成单位(CFU)数,同时检测CD34+细胞上CD49d+及CXCR4的表达数。结果表明:在体外14天培养过程中,各时间点D组CD34+细胞、CFU数及CD34+CXCR4+细胞和CD34+CD49d+细胞扩增数均高于A、B、C组(P<0.05);B、C和D组在各时间点各测量指标与A组比较具显著性差异(P<0.05);6天后,B组各测量指标与C组比较具显著性差异(P<0.05)。结论:胚胎骨髓基质细胞联合外源性细胞因子不仅可以支持脐血MNC的有效扩增,而且扩增后与趋化作用和与粘附作用相关的造血细胞亦较扩增前明显增加。单用细胞因子扩增会造成造血细胞的耗竭,单用基质细胞支持可扩增或维持造血细胞的量,但难以实现造血细胞的大量扩增,FBMSC联合外源性细胞因子可能是扩增造血干祖细胞的较理想方案。
- 毛平王彩霞林秀梅杜庆华
- 关键词：胎儿骨髓基质细胞细胞因子单个核细胞
- 组蛋白去甲基化酶LSD1在急性白血病的表达及其临床意义
- ＜正＞目的:研究组蛋白去甲基化酶LSD1（Lysine speci?cdemethylase 1）在急性白血病的表达及其临床意义。方法:应用Western blot半定量检测不同病情（初诊、完全缓解、复发）的急性白血病（...
- 林秀梅钟文婷王顺清
- 文献传递
- 青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞株血管内皮生长因子及其受体表达的影响
- 2011年
- 目的研究青蒿琥酯对急性单核细胞白血病SHI-1细胞株血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR）的影响。方法酶联免疫吸附法检测非细胞毒性浓度（5、10、20ng／m1）青蒿琥酯作用SHI-1细胞后培养上清液VEGF浓度，流式细胞术检测有或无青蒿琥酯作用时，SHI-1细胞表面VEGFR-1及VEGFR-2阳性表达率。结果培养24、48h后，无青蒿琥酯作用的SHI-1细胞培养上清液VEGF质量浓度分别为（980．3±2．2）、（982．4±2．3）Pg／ml，VEGFR-1表达率分别为（5．40±3．11）％和（4．45±2．85）％，VEGFR-2表达率分别为（13．90±2．26）％和（13．95±1．96）％。5、10、20ng／ml青蒿琥酯作用24h后，SHI-1细胞培养上清液VEGF质量浓度分别为（234．6±1．8）、（114．9±1．6）、（108．8±1．5）Pg／ml，作用48h后分别为（62．3±1．7）、（60．9±1．6）、（32．7±1．7）Pg／ml，与培养相同时间无青蒿琥酯组相比，VEGF浓度明显下降（均P〈0．05），且相同浓度青蒿琥酯作用24h与48h间差异亦有统计学意义（均P〈0．05）。5、10、20ng／ml青蒿琥酯作用24h，VEGFR．1阳性率分别为（4．30±2．21）％、（4．20±1．37）％和（3．90±1．86）％，作用48h后分别为（3．80±2．87）％、（3．60±1．73）％和（3．00±1．82）％，相同作用时间不同浓度青蒿琥酯组间及相同浓度作用不同时间组间VEGFR-1阳性率差异均无统计学意义（均P〉0．05）；作用24h后，SHI．1细胞VEGFR-2阳性率分别为（4．40±1．15）％、（3．10±0．68）％和（1．104-0．72）％，作用48h后分别为（3．00±1．68）％、（2．20±0．93）％和（0．60±0．92）％，3个不同浓度青蒿琥酯作用相同时间后VEGFR-2表达率降低（均P〈0．05），相同浓度作用24与48h间差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论SHI-1细胞株高分泌VEGF，青蒿琥酯可下调VEGF分泌及VEGFR-2的表达，而对VEGFR-1表�
- 李庆山黄露迷林秀梅邓婷芬许艳丽莫文健杜庆华
- 关键词：血管内皮生长因子类青蒿琥酯
- 双色ES探针检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的应用研究被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨使用bcr/abl双色ES探针的荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybrid ization,FISH)应用于慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因检测的意义。方法:使用荧光原位杂交方法对2005年1月至2006年2月本院收治的12例慢性粒细胞白血病患者之骨髓细胞进行检测分析。结果:12例CML均检出bcr/abl基因的存在,其中2例伴ASS基因缺失。结论:使用bcr/abl双色ES探针进行荧光原位杂交能为bcr/abl融合基因的检测提供准确直观的依据。
- 杜庆华林秀梅应逸毛平
- 关键词：慢性粒细胞白血病荧光原位杂交BCR/ABL融合基因
- 细胞分化剂Ⅱ诱导HL-60细胞的分化及其机制
- 2013年
- 目的探讨细胞分化剂II（CDA-Ⅱ）对人类急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60分化的影响及其机制。方法CDA-Ⅱ作用HL-60后，采用瑞特染色法观察细胞的形态变化；流式细胞术检测CD11b阳性细胞比例；用表达谱芯片检测差异表达基因。结果瑞特染色显示CDA-Ⅱ可诱导HL-60细胞向髓系成熟阶段分化，且呈时间依赖性。HL-60细胞经CDA-Ⅱ处理后CD11b阳性表达率呈时间、浓度依赖性增高。CDA-Ⅱ可引起HL-60细胞基因表达变化，其中表达变化相差2倍以上的基因有113条上调基因及140条下调基因。上调基因主要参与矿物质吸收、补体与凝血系统等6条通路；下调基因主要参与嘧啶代谢、RNA聚合酶、嘌呤代谢等9条通路。结论CDA-Ⅱ可诱导HL-60细胞基因表达变化及细胞分化，CDA-Ⅱ具有用于诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病的可行性。
- 金国荣林秀梅许艳丽刘巍巍周昕唐燕申煌煊
- 关键词：细胞分化基因表达谱
- RYBP基因沉默对HL-60细胞对化疗药物敏感性的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:用RNA干扰技术探讨白血病HL-60细胞株RYBP基因沉默后对化疗药物敏感性的影响。方法:构建针对RYBP基因的shRNA干扰质粒并建立稳定沉默RYBP基因的白血病HL-60细胞株,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测确认RYBP基因在mRNA和蛋白水平的沉默效果。然后用DNA ladder及Annexin V标记的流式细胞术检测各组HL-60细胞凋亡的情况,用CCK-8法检测各组HL-60细胞对化疗药物阿糖胞苷和柔红霉素的敏感性。结果:成功构建的RYBP shRNA慢病毒载体能够有效沉默HL-60中RYBP基因的表达。在没有加入化疗药物时RYBP shRNA组凋亡率低于空载体对照组(NC组)(P<0.05);用阿糖胞苷处理时RYBP shRNA组凋亡率和抑制率均低于NC组(P<0.05);用柔红霉素处理时RYBP shRNA组凋亡率虽然低于NC组,但是抑制率差异不明显。结论:HL-60细胞RYBP基因沉默能抑制细胞的凋亡,明显降低对阿糖胞苷的敏感性,但是对柔红霉素敏感性的改变不明显。
- 曾丽华王顺清邓晖张玉平应逸陈小卫许士林林秀梅
- 关键词：HL-60细胞SHRNA阿糖胞苷柔红霉素药物敏感性
- shRNA下调LSD1基因表达对人急性髓系白血病细胞凋亡与细胞周期的影响
- 2017年
- 目的:观察慢病毒载体介导shRNA靶向沉默组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)基因对人急性髓系白血病细胞凋亡与细胞周期的影响。方法:利用慢病毒载体构建人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞和急性单核细胞白血病SHI-1细胞LSD1基因干扰的稳定细胞系。设置空白对照组、空载体对照组和LSD1-shRNA干扰组,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法分别检测LSD1的mRNA和蛋白表达水平;Annexin V-PE/7-AAD染色后利用流式细胞术检测细胞凋亡;PI染色后检测细胞周期。结果:HL-60细胞和SHI-1细胞LSD1-shRNA干扰组LSD1 mRNA和蛋白表达水平相较于空白对照组及空载体对照组均显著下调(P<0.01)。干扰LSD1后,HL-60细胞和SHI-1细胞凋亡率明显增加(P<0.01),细胞周期阻滞于G_0/G_1期(P<0.01)。结论:shRNA下调LSD1表达使人急性髓系白血病细胞凋亡增加并发生细胞周期G_0/G_1期阻滞。
- 林秀梅曾丽华许世林王顺清毛平
- 关键词：HL-60SHI-1细胞凋亡细胞周期
- 下调LSD1表达对HL-60白血病细胞增殖、周期和凋亡的影响
- 目的 利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立LSD1基因稳定干扰的HL-60白血病细胞系,观察下调LSD1表达对HL-60白血病细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 人工合成shLSD1基因干扰序列,构建LSD1 shRNA慢...
- 林秀梅王顺清毛平
- bmi-1原癌基因在不同来源CD34^＋细胞的表达被引量：2
- 2008年
- 目的:Bmi-1是一种属于PcG家族的原癌基因,它直接参与细胞生长、增殖的调节,是成体干细胞和白血病干细胞自我更新所必需的。检测原癌基因bmi-1在不同来源CD34+细胞中的表达,探讨其与细胞增殖的关系。方法:实验于2007-03/11在广州医学院生化教研室完成。①实验材料:白血病细胞株SHI-1由苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所薛永权教授惠赠;脐血由广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科提供,实验经产妇知情同意,并经医院伦理委员会批准;外周血采自健康成年自愿捐献者。②实验方法:以CD34免疫磁珠标记急性单核细胞白血病细胞株SHI-1,上柱分选CD34+细胞,脐血单个核细胞以同样的方法标记CD34免疫磁珠标记和分选CD34+细胞,应用流式细胞仪分析分选后CD34+的富集度;将分选前后的CD34+、CD34-SHI-1细胞以相同的密度接种于24孔板,分不同的时间点计数细胞,并绘制生长曲线。选用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞。以正常脐带血和外周单个核细胞为对照,采用半定量RT-PCR法检测bmi-1基因在不同来源CD34+细胞中的表达。结果:①SHI-1细胞分选前后标记CD34-PE、CD38-FITC流式分析显示,分选后CD34+细胞的富集度为99%以上。②SHI-1-CD34+细胞呈缓慢生长趋势,不同于分选前细胞的指数生长状态。③RT-PCR检测显示,bmi-1mRNA在SHI-1-CD34+细胞中的表达高于其在脐血-CD34+与外周血单个核细胞中的表达(P<0.05)。bmi-1mRNA在SHI-1、SHI-1-CD34+、SHI-1-CD34-细胞中表达差异不显著,在脐血-CD34-细胞中弱表达或不表达。结论:bmi-1基因在SHI细胞株CD34+与CD34-细胞中均高表达,说明其与血液细胞的高增殖能力密切相关。
- 张雅容魏亚明许艳丽林秀梅汪云霞王晓华
- 关键词：BMI-1基因CD34^+细胞免疫磁珠流式细胞仪干细胞
- 胚胎骨髓基质细胞协同细胞因子对人脐血单个核细胞体外扩增作用的研究
- ＜正＞目的探讨胚胎骨髓基质细胞（FBMSC）联合细胞因子对脐血单个核细胞（MNC）体外扩增作用的影响及比较扩增前后脐血（CB）CD34+细胞上细胞表面趋化因子受体CXCR4和粘附分子 CD49d+（VLA-4）的表达情况...
- 毛平王彩霞林秀梅杜庆华
- 文献传递
