柴虹
- 作品数：4 被引量：27H指数：2
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项青岛市科技发展计划项目更多>>
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- 伪狂犬病病毒gE囊膜糖蛋白主要抗原表位区基因的原核表达被引量：1
- 2007年
- 参照GenBank上公布的伪狂犬病病毒gE基因序列设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含gE主要抗原表位编码区的564 bp的片段,扩增产物克隆于pMD18-T vector中,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游,构建的原核表达质粒pET-gE在大肠杆菌BL21中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示:表达产物分子质量为38 ku,以包涵体的形式存在,表达产物用His亲和层析柱进行纯化。Western blotting分析表明:该蛋白能与标准阳性血清发生特异性反应。结果证明该表达产物具有生物学活性,可作为鉴别诊断的抗原。
- 柴虹范忠军陈义平王志亮
- 关键词：伪狂犬病病毒主要抗原表位
- 美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：19
- 2007年
- 参照美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列,设计引物和探针,并建立其荧光RT-PCR检测方法,以检测严重危害我国养猪业的此型PRRSV。该法能检测到1 TCID50的PRRSV。用此法检测猪瘟病毒、乙脑病毒、伪狂犬病毒、马动脉炎病毒、圆环病毒Ⅱ型和MARC145细胞的RNA,结果均为阴性。对126份临床样品进行检测应用,检测结果(7份阳性,119份阴性)与病毒分离完全符合。此法中的阳性对照为体外转录的dsRNA,具有高度的稳定性,解决了此类检测方法所用的RNA阳性对照所普遍存在的易于降解的难题。
- 范忠军柴虹陈继明吴延功孙承英王志亮
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR体外转录DSRNA
- 猪伪狂犬病血清抗体gE-ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2007年
- 以纯化的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接gE-ELISA方法。最佳反应条件为,抗原包被浓度为1.7μg/mL,待检测血清1∶40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性,与猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和猪伪狂犬病gE缺失疫苗接种的猪免疫血清及SPF猪阴性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数分别不超过5%和9%。用该方法与Ingezim ELISA试剂盒和HerdChek ELISA试剂盒同时对172份血清进行了平行检测,总符合率分别达93.6%和83.7%。试验结果表明:猪伪狂犬病血清抗体间接gE-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病野毒感染猪的血清抗体检测。
- 柴虹范忠军陈义平王志亮徐天刚
- 关键词：猪伪狂犬病抗体试剂盒
- 猪伪狂犬病血清抗体gE-ELISA检测方法的建立
- 以纯化的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接gE-ELISA方法。最佳反应条件为，抗原包被浓度为1.7μg/mL，待检测血清1：40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性，与猪瘟阳性血清、猪细小病毒...
- 柴虹范忠军陈义平王志亮
- 关键词：猪伪狂犬病试剂盒免疫抗体血清抗体
- 文献传递
