罗玉子
- 作品数：67 被引量：286H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 血红蛋白β亚基对猪瘟病毒增殖的调控作用及其调节机制
- 病毒侵入后，动物机体对病毒感染最初反应是先天性免疫应答，如炎性反应、细胞凋亡和干扰素抗病毒应答等，通过这些机制，动物可以抵抗病毒的入侵，或者为动物机体特异性免疫反应的建立并最终清除病毒赢得时间。与之相对的是，许多病毒在长...
- 李丹董泓李素陈佳宁孙元罗玉子仇华吉
- 关键词：猪瘟病毒C蛋白
- 一种基于塞姆利基森林病毒复制子的新型复制子载体被引量：6
- 2004年
- RNA复制子是能自主复制的病毒RNA。基于RNA复制子的表达载体和基因疫苗比常规真核表达载体和DNA疫苗具有更大的优越性。以塞姆利基森林病毒RNA复制子衍生的真核表达载体pSFV1为骨架 ,插入CMV立即早期启动子和SV40晚期Poly(A)信号 ,构建了一种完全基于DNA的复制型表达载体pSFV1CS ,将增强型绿色荧光蛋白基因EGFP插入其中 ,构建了重组质粒pSFV1CS EGFP ,通过转染 2 93T细胞 ,证实外源基因能在其中高效表达。
- 仇华吉罗玉子李娜童光志
- 关键词：DNA基因疫苗
- 基于重组E^(rns)蛋白的猪瘟E^(rns)-ELISA的建立和优化被引量：7
- 2005年
- 将大肠杆菌表达的猪瘟病毒重组Erns蛋白经纯化后作为包被抗原,建立了检测猪瘟抗体的Erns-ELISA方法。经优化试验,确定了最适抗原包被量为0.15μg;血清最适稀释度为1∶100。经阻断试验、交叉反应试验和重复性试验证明,建立的Erns-ELISA简便、特异、稳定,与基于重组E2蛋白的E2-ELISA的符合率高达96.7%,与基于全病毒抗原的Dot-ELISA符合率为77.5%。可以用于猪瘟抗体的血清学监测以及用作基于E2蛋白的标记疫苗配套的鉴别诊断。
- 贾洪林仇华吉朱庆虎李国新李娜罗玉子刘永刚李艳童光志
- 关键词：猪瘟
- 表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其构建方法和应用
- 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其构建方法和应用。本发明首先公开了一株表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株，是以gE、gI及TK三基因缺失的重组伪狂犬病病毒变异株为载体构建的表达猪瘟病毒...
- 仇华吉孙元雷建林罗玉子
- 文献传递
- 表达萤火虫荧光素酶基因的重组猪瘟病毒及其应用
- 本发明公开了一株表达萤火虫荧光素酶基因的重组猪瘟病毒及其应用，属于表达萤火虫荧光素酶基因的重组猪瘟病毒的拯救和应用领域。本发明通过重叠PCR方法将萤火虫荧光素酶基因克隆到猪瘟病毒Shimen株全长感染性克隆pBRCISM...
- 仇华吉申梁李永锋孙元李素罗玉子
- 一种基于塞姆利基森林病毒复制子的新型复制子载体
- 以塞姆利基森林病毒RNA复制子衍生的真核表达载体pSFV1为骨架,插入CMV立即早期启动子和SV40晚期Poly(A)信号,构建一种完全基于DNA的复制型表达载体pSFV1CS,通过转染293T细胞和 BHK-21细胞,...
- 仇华吉罗玉子李娜童光志
- 文献传递
- 表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用
- 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用，属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ‑delgE/gI为基础，在rPRVTJ‑delgE/gI中插入猪...
- 仇华吉孙元罗玉子李素李永锋
- 文献传递
- 针对非洲猪瘟病毒MGF360-13L基因的TaqMan荧光定量PCR的建立被引量：8
- 2021年
- 【目的】建立一种以MGF360-13L基因为靶标的实时荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的方法,为非洲猪瘟(African swine fever,ASF)的诊断、MGF360-13L基因缺失毒株鉴别、病毒分离鉴定、基因功能研究提供技术支持。【方法】首先,以ASFV中国流行毒株(GenBank:MK333180.1)的MGF360-13L基因序列为靶标设计并筛选了1对特异性引物和探针,建立其荧光定量PCR检测方法。设计引物13L-F/13L-R,扩增MGF360-13L,并将其克隆至pOK12载体,挑取阳性克隆并测序验证,构建重组质粒标准品。将重组质粒标准品连续10倍梯度稀释,以稀释后的各梯度质粒标准品为模板,配制反应体系和设置反应条件后进行荧光定量PCR检测,建立标准曲线,并对其敏感性和重复性进行评价;其次,以连续10倍梯度稀释的重组质粒标准品为模板,利用引物13L-F/13L-R进行常规PCR检测,以比较荧光定量PCR的敏感性。最后,运用本检测方法和本研究组已建立的针对ASFV p72的荧光定量PCR检测方法同时对黑龙江某猪场发生ASF时采集的30份临床样品进行检测,以比较两种检测方法的符合率。另外,应用该方法对感染原代巨噬细胞的ASFV野毒株和MGF基因缺失毒株进行鉴别检测。【结果】利用引物13L-F/13L-R可扩增出一条800 bp左右的特异性目的条带,而阴性对照无条带,成功构建出标准品。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法在质粒标准品为1.56×10^(1)-1.56×10^(8)拷贝/μL时,呈现出良好的线性关系,线性回归方程为:y=-3.295 lg(x)+45.995,线性相关系数R2为0.997,对ASFV核酸最低检测限为15.6拷贝/μL。在特异性检验中,除ASFV核酸外,猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型等病毒核酸均未出现扩增曲线,表明该方法的特异性良好。与最低检测限为1.56×10^(4)拷贝/μL病毒核酸的常规PC
- 王涛韩玉潘力王冰孙茂文王翌罗玉子仇华吉孙元
- 关键词：非洲猪瘟病毒荧光定量PCR
- 等温扩增技术的原理及其在病原检测中的应用被引量：10
- 2017年
- 等温扩增技术(IAT)作为一种新型的体外核酸扩增技术,与PCR相比,该技术具有特异性强、敏感性高、简单便捷和成本低等优点。目前,等温扩增技术在病原检测方面得以应用,论文对环介导等温扩增(LAMP)、依赖解旋酶的等温扩增(HDA)、依赖核酸序列的等温扩增(NASBA)、链置换等温扩增(SDA)、交叉引物扩增(CPA)5种扩增技术的原理、特点及应用分别予以介绍,为该技术在病原检测的实际应用提供参考。
- 高瑶孟星宇罗玉子胡永浩仇华吉
- 关键词：病原检测
- 抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用
- 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组N<Sup>pro</Sup>、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，...
- 仇华吉申梁李永锋孙元李素罗玉子
- 文献传递
