刘丹平
- 作品数：105 被引量：337H指数：11
- 供职机构：锦州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 经皮A1滑车松解术治疗糖尿病患者扳机指疗效观察
- 2011年
- 目的观察经皮A1滑车松解术治疗扳机指的疗效。方法采用经皮A1滑车松解术治疗糖尿病患者扳机指32例47指(观察组),采用类固醇局部注射治疗46例60指(对照组)。结果两组均顺利完成治疗。观察组发生术后感染1例,对照组未见并发症。观察组治愈45指、复发1指、无效1指,对照组分别为17、28、5指。两组治愈率相比P<0.05。结论经皮A1滑车松解术治疗糖尿病患者扳机指疗效优于类固醇激素局部注射。
- 张正刘丹平
- 关键词：扳机指糖尿病类固醇
- 人参二醇皂甙(PDS)对小鼠急性脑缺血损伤的保护作用
- 目的:观察人参二醇皂甙(PDS)对小鼠急性脑缺血损伤的影响,并初步探讨其作用机理。方法:采用部分结扎小鼠一侧颈总动脉连同迷走神经,完全结扎另一侧的方法,制备急性脑缺血模型,观察动物的活动情况,记录6h内的卒中指数。于缺血...
- 王国贤刘丹平
- 文献传递
- 骨形态发生蛋白-2局部基因治疗骨缺损的研究进展被引量：1
- 2005年
- 李晖刘丹平
- 关键词：骨形态发生蛋白-2局部基因治疗骨缺损区BMP-2大段骨缺损内源性
- 携带低氧诱导因子1α^(mu)和人源化海肾绿色荧光蛋白双基因真核表达载体构建及其在HEK293A细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 背景:低氧诱导因子1能够调控多种基因共同表达,在骨缺损部位可诱导成熟的血管生成,为各种细胞的成骨分化和成骨活动提供营养支持和代谢保证,促进骨愈合,但其真核表达载体的构建及表达却少见报道。目的:实验拟构建携带低氧诱导因子1αmu(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)目的蛋白和人源化海肾绿色荧光蛋白(human renilla reniformis green fluorescent protein,hrGFP)的双基因真核表达载体,并将其转染HEK293A细胞,观测其在细胞中的表达。方法:利用PCR技术定点突变目的基因供体质粒pCMV6-XL5-HIF1α携带的人HIF1α基因编码区的第402位、564位和803位氨基酸以及去掉其终止密码子,之后在基因序列前后添加新的酶切位点NotⅠ和PvuⅠ,酶切、测序检测突变情况,将正确突变的HIF1αmu定向连入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-IRES-hrGFP-1中。经测序鉴定、PmeⅠ酶切线性化后转化BJ5183-AD-1电感受态细胞,通过hrGFP基因荧光表达检测转染情况。结果与结论:经基因测序证实,HIF-1α基因编码区的第402位、564位和803位氨基酸均定点突变成丙氨酸,终止密码子成功去除。经酶切鉴定及测序证实,重组腺病毒表达载体构建成功。荧光显微镜下观察表明,感染重组腺病毒的HEK293A细胞内有大量绿色荧光表达证实通过Lipofectamine 2000途径可使得重组腺病毒载体成功转染HEK293A细胞。
- 张正李谌胡亮刘丹平
- 关键词：低氧诱导因子1Α腺病毒载体绿色荧光蛋白
- 常氧条件下同时表达突变型低氧诱导因子1α目的蛋白和人源化绿色荧光蛋白报告分子腺病毒真核表达载体的构建(英文)被引量：4
- 2010年
- 背景:低氧诱导因子1能够调控多种基因共同表达,在骨缺损部位可诱导生理功能完整的新血管生成。目的:构建能够同时表达突变型低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)目的蛋白和人源化绿色荧光蛋白(human renilla reniformis green fluorescent protein,hrGFP)报告分子的新型腺病毒真核细胞表达载体。方法:对目的基因供体质粒pCMV6-XL5-HIF1α携带的人低氧诱导因子1α基因进行测序和对其序列内部限制性内酶识别位点进行分析,利用PCR(poly-merase chain reaction,PCR)技术定点突变低氧诱导因子1α基因编码区的第402位、564位和803位氨基酸,酶切、测序检测突变情况,将正确突变后的低氧诱导因子1α基因(突变mutagenesis,突变后的HIF-1α基因写作HIF-1αmu)定向连入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-IRES-hrGFP-1中。携带HIF-1αmu基因的重组腺病毒穿梭载体经测序鉴定、PmeⅠ酶切线性化后转化BJ5183-AD-1电感受态细胞,利用细菌内同源重组机制将HIF-1αmu和人源化绿色荧光蛋白基因连同其顺势表达元件重组入腺病毒基因组质粒,通过PacⅠ酶切及测序鉴定获得重组体。结果与结论:经基因测序证实,HIF-1α基因编码区的第402位、564位和803位氨基酸均定点突变成丙氨酸。经酶切鉴定及测序证实,重组腺病毒表达载体构建成功。结果表明,成功构建了新型重组腺病毒突变型真核细胞表达载体pAd-HIF1αmu-IRES-hrGFP-1。
- 刘丹平王国贤胡亮李谌
- 关键词：低氧诱导因子1Α重组腺病毒载体绿色荧光蛋白
- GFP示踪FLAG抗原表位标记BMP2转基因腺病毒穿梭质粒的构建被引量：1
- 2011年
- 目的构建同时表达具有抗原表位FLAG标记的重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP2)目的蛋白和示踪绿色荧光蛋白(GFP)报告分子的腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1。方法采用PCR技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因诱变,去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点XhoⅠ。测序检测诱变情况,将诱变后的BMP2基因定向导入pShuttle CMV-IRES-hrGFP-1,将质粒分别转染人胚肾细胞HEK293A和兔骨髓间充质干细胞(MSCs)。通过限制性内切酶酶切图谱分析该质粒;采用荧光显微镜检查和免疫组化SP法测定HEK293A中的GFP和MSCs中的BMP2,行重组腺病毒穿梭质粒鉴定。结果质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1经双酶切鉴定图谱分析构建正确,HEK293A、MSCs中均有GFP和BMP2表达。结论 pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1构建成功。
- 张正李谌陈峻江刘丹平
- 关键词：骨形态发生蛋白2重组腺病毒质粒抗原表位
- VEGF121和BMP2双基因共表达重组腺病毒载体的构建及其在HEK293中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的构建人血管内皮生长因子121(VEGF121)与人骨形态发生蛋白2(BMP2)双基因共表达腺病毒载体Adv-BMP2-IRES-VEGF121,并观察其在人胚肾细胞株(HEK293)中的表达情况。方法对腺病毒质粒pShuttle-CMV-BMP2的目的基因BMP2进行PCR扩增。腺病毒质粒pShuttle-CMV-VEGF121-IRES-hrGFP-1经Kpn I/Xba I酶切后,将BMP2片段定向导入pShuttle-CMV-VEGF121-IRES,构建pShuttle-CMV-V EGF121-IRES-BMP2,并注入大肠杆菌DH5a中扩增,提取质粒。通过酶切分析、PCR检测和序列分析进行鉴定。将构建所得的质粒转染HEK293,采用RT-PCR法检测HEK293中的BMP2、VEGF121 mRNA,Western blot法检测其蛋白。结果成功构建了Adv-BMP2-IRES-VEGF121。酶切分析及DNA序列测定证实重组质粒构建正确。质粒转染后的HEK293 BMP2和VEGF121表达阳性。结论成功构建了Adv-BMP2-IRES-VEGF121,其转染HEK293后,VEGF121、BMP2在HEK293中共表达阳性。
- 栗刚吴秀成钟声王巍李媛刘丹平
- 关键词：腺病毒载体质粒
- 开放性骨折清创前后创口细菌学定量分析及其意义被引量：8
- 1999年
- 刘丹平朱通伯杜靖远罗怀灿戴立人向友华
- 关键词：骨折开放性骨折清创
- 脱钙牛松质骨复合自体软骨细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究
- 目的:研究利用脱钙牛松质骨(DBCB)作为支架材料,接种自体软骨细胞构建组织工程学软骨修复兔全层关节软骨缺损。方法:制备脱钙牛松质骨。扫描电镜观察DBCB的超微结构,以及软骨细胞与DBCB体外联合培养5天的粘附情况。DB...
- 刘丹平郭威
- 文献传递
- 地塞米松预培养兔BMSCs促进腺病毒介导BMP2转基因的高效表达被引量：3
- 2007年
- 目前，骨形态发生蛋白2（BMP2）的基因治疗在骨组织工程中正成为广泛研究的热点。国外最新研究表明，以腺病毒为载体转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）表达BMP2的效率取决于细胞的分化状态，1μmol／L地塞米松诱导培养人BMSCs后再进行腺病毒转染，其BMP2的表达量是单纯转染组的20倍。在此基础上，笔者首次利用同时表达绿色荧光蛋白（GFP）和BMP2的AdCMV—hBMP2-IRES—GFP-1转染兔BMSCs，通过流式细胞仪等方法，
- 王栋梁刘丹平张正胡汉祥
- 关键词：BMSCSBMP2地塞米松骨髓间充质干细胞转基因
