单卿卿
- 作品数：11 被引量：30H指数：4
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- 冬凌草甲素抗Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病效应的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的探讨冬凌草甲素对Ph染色体阳性（Pb＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）的抗白血病效应及其机制。方法以Ph＋ALL细胞株SUP—B15为研究对象，应用改良MTT法测定冬凌草甲素对SUP—B15细胞增殖的影响，计算72h的半数抑制浓度（IC50）；光学显微镜下观察冬凌草甲素处理后SUP—B15细胞的形态学变化；用流式细胞术检测药物作用前后SUP—B15细胞的凋亡率；以K562细胞为对照，应用Westernblot法比较药物作用前后SUP—B15细胞Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5信号转导通路活化水平，以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果①冬凌草甲素呈浓度及时间依赖地抑制SUP—B15细胞增殖，作用72h的IC50值为（7．08±1．21）μmol／L；②冬凌草甲素处理24h后光学显微镜下SUP—B15细胞边界不清晰，部分细胞崩解；③0、5、10μmol／L冬凌草甲素作用24h后，SUP—B15细胞凋亡百分率分别为（6．67±0．83）％、（18．30±1．79）％、（37．63±7．12）％；④冬凌草甲素明显抑制SUP-B15细胞ABL酪氨酸激酶及其下游Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5多条信号转导通路的活化；下调SUP．B15细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论冬凌草甲素通过抑制ABL酪氨酸激酶及其下游Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5信号转导，以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗Ph＋ALL作用。
- 郭勇单卿卿龚玉萍林娟杨曦周睿卿
- 关键词：淋巴细胞急性费城染色体冬凌草素细胞内信号肽和蛋白质类
- SCL／TAL-1基因沉默对EPO诱导的K562细胞红系分化的影响被引量：2
- 2012年
- 目的通过RNA干扰技术降低SCL／TAL-1mRNA的表达，探讨SCL／TAL-1在K562细胞红系分化中的作用。方法以EPO诱导白血病细胞系K562细胞向红系分化为模型，将靶向SCL／TAL-1基因的特异性短发夹RNA（shRNA）慢病毒质粒pTRIP—dU3-RNAiTALh—EF1a—GFP转染K562细胞，RT—PCR检测其SCL／TAL—l和红系相关基因RhD、血型糖蛋白A（GPA，即CD253a）、CD47mRNA表达水平变化，流式细胞术分析红系分化抗原CD71、CD253a的表达，并以空载体质粒pTRIP—dU3-RNAi—luc—EF1-GFP转染的K652细胞为对照。结果①通过慢病毒转染系统将含SCL／TAL．1shRNA的质粒及空载体质粒转染K562细胞48h，绿色荧光蛋白（GFP）＋细胞占总细胞的95％以上，表明感染率达到95％以上。②RT—PCR结果显示转染特异性shRNA的K562细胞SCL／TAL-1mRNA表达水平比空载体对照明显下调（P〈0．05），红系抗原CIM7和RhDmRNA水平也比对照组明显下调（P〈0．05），GPA有所下降，但没有CIM7和RhD下降程度大。③流式细胞术检测到SCL／TAL-1低表达组红系分化抗原CD71、CD235a表达降低，表达率分别是10．4％、76．5％，而在对照组的表达率分别为94．3％、83．6％。结论研究结果提示转录因子SCL／TAL．1参与了红系定向分化。
- 周睿卿龚玉萍郭勇单卿卿杨曦
- 关键词：细胞分化RNA干扰
- 人工肝结合^(131)I治疗甲状腺危象合并重症肝炎1例报告
- 2014年
- 患者,女,28岁,因＂食欲亢进、消瘦1＋年,皮肤巩膜黄染10＋d＂入院。入院前1＋年,无明显诱因出现食欲亢进、消瘦。入院前10＋d,患者无明显诱因出现皮肤巩膜黄染,伴小便黄、乏力,无心悸、发热、腹痛等不适。近1年体质量下降约15kg。无用药史、输血史等,家族史无特殊。查体：生命体征平稳,急性病容,皮肤巩膜重度黄染,颈静脉搏动,甲状腺Ⅰ度肿大,质软,未触及结节,心肺无异常,肝区叩痛。
- 单卿卿陈立宇冯萍
- 关键词：甲亢危象重症肝炎人工肝治疗131I治疗
- 丹参酮ⅡA对白血病细胞株K562增殖抑制及机制研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨丹参酮ⅡA（TAT）对人白血病细胞株K562的生长抑制作用及其可能机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测TAT（终浓度1、10、15、30、50μmol／L）对K562细胞的增殖抑制作用，光学显微镜观察TAT（30μmol／L）作用24h后K562细胞的形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡率，Westernblot法检测凋亡蛋白BCL-2、BAX的表达和蛋白激酶AKT／mTOR信号通路的变化。结果终浓度为10～50μmol／L的TAT对K562细胞的生长具有抑制作用，与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05），TAT作用K562细胞96h的半数抑制浓度（IC50）值为（7．75±2．47）μmol／L。30μmol／LTAT作用K562细胞24h后显微镜下显示细胞破坏明显，部分细胞裂解成碎片。流式细胞仪检测发现30μmol／L TAT作用组凋亡细胞明显增多（P〈0．05）。Western blot结果提示，30μmol／LTAT作用K562细胞后AKT、mTOR、p70S6K、4-EBP1等信号通路关键点蛋白磷酸化表达水平减低，凋亡抑制蛋白BCL-2下调，而促凋亡蛋白BAX上调。结论TAT通过抑制AKT／m—TOR信号通路，下调BCL-2和上调BAx的表达，促进细胞凋亡，抑制白血病细胞株K562的生长。
- 单卿卿郭勇龚玉萍
- 关键词：白血病细胞株K562凋亡AKTMTOR信号通路
- 六种中药提取物对白血病细胞株的体外抑制作用研究被引量：7
- 2012年
- 目的研究中药有效成分丹参酮ⅡA、粉防己碱、和厚朴酚、姜黄素、冬凌草甲素和丹皮酚对白血病细胞株SUP-B15、K562、CEM、HL-60、NB4的抗增殖作用。方法采用改良MTT法测定6种中药有效成分作用于上述5种白血病细胞株96h后细胞增殖活性的变化,利用线性回归方法计算药物对细胞作用的半数抑制浓度(IC50)值。结果丹参酮ⅡA对SUP-B15、K562、CEM、HL-60、NB4均有一定的增殖抑制作用,但是对HL-60细胞株的抑制作用明显低于其它白血病细胞株。粉防己碱、和厚朴酚、姜黄素、冬凌草甲素对5种细胞株均有增殖抑制作用,且作用相似,抑制作用差异无统计学意义。丹皮酚对5种肿瘤细胞株的增殖有一定的影响,但作用最弱。结论粉防己碱、和厚朴酚、姜黄素、冬凌草甲素对5种白血病细胞株SUP-B15、K562、CEM、HL-60、NB4均有增殖抑制作用,且差异并无统计学意义,证明它们抗白血病作用具有广谱性。丹参酮ⅡA对SUP-B15、K562、CEM、NB4的增殖抑制作用明显优于HL-60细胞株,说明它的抗白血病作用在不同细胞株中有差异性。丹皮酚对5种白血病细胞株的作用最弱。
- 单卿卿龚玉萍郭勇林娟周睿卿杨曦
- 关键词：粉防己碱和厚朴酚冬凌草甲素丹皮酚白血病细胞株
- 冬凌草甲素抗T细胞急性淋巴细胞白血病效应的实验研究被引量：5
- 2014年
- 目的探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病的抗白血病效应及其机制。方法以T细胞急性淋巴细胞白血病细胞株CEM为研究对象,应用改良MTT法测定不同浓度及不同时间冬凌草甲素对CEM细胞增殖和生存率的影响,计算72h的半数抑制浓度(IC50);显微镜下观察5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素处理24h后CEM细胞的形态学变化;流式细胞术检测0.5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后CEM细胞的凋亡百分率;应用Western blot法检测7.5μmol/L冬凌草甲素作用后细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白水平,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 1冬凌草甲素呈浓度及时间依赖性抑制CEM细胞增殖,作用72h的IC50值为(7.37±1.99)μmol/L;2 5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后CEM细胞边界不清晰,部分细胞崩解,且浓度越高,细胞形态改变越明显;3 0、5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后,细胞凋亡百分率分别为(4.8±2.11)%、(19.03±2.54)%、(40.27±3.31)%;(57.23±6.69)%;4冬凌草甲素明显抑制CEM细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白的活化;下调CEM细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论冬凌草甲素可能通过抑制mTOR/P70(4EBP1)、RAF/ERK、STAT5信号蛋白的活化,以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗白血病作用。
- 郭勇单卿卿龚玉萍林娟杨曦
- 关键词：抗白血病效应冬凌草甲素AKT/MTORSTAT5
- 冬凌草甲素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1的作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨冬凌草甲素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1的抗白血病效应及其作用机制。方法以急性单核细胞白血病细胞株THP-1为研究对象,应用改良四甲基偶氮唑盐法测定4、6、8μmol/L浓度冬凌草甲素处理72 h后THP-1细胞的增殖抑制率,以及计算2、4、6、8、10μmol/L冬凌草甲素处理24、72、120 h后的细胞生存率并绘制生长曲线;显微镜下观察4、6、8μmol/L冬凌草甲素处理24 h后THP-1细胞的形态学变化;采用流式细胞术检测0、4、6、8μmol/L冬凌草甲素处理24 h后THP-1细胞凋亡率;采用Western blot法检测6μmol/L冬凌草甲素处理THP-1细胞0、12、24 h后Akt/m TOR、Raf/MEK/ERK细胞信号转导通路的变化,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 14、6、8μmol/L冬凌草甲素处理72 h后细胞增殖抑制率分别为(20.02±11.15)%、(45.99±12.76)%、(86.39±9.18)%,与4μmol/L冬凌草甲素比较,6、8μmol/L冬凌草甲素处理后细胞增殖抑制率均升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);冬凌草甲素处理72 h后细胞半抑制浓度为(6.12±1.48)μmol/L;细胞生长曲线显示,冬凌草甲素对THP-1细胞的生长抑制作用呈时间和浓度依赖性。2冬凌草甲素处理24 h后,THP-1细胞出现凋亡,形成凋亡小体,浓度越高细胞凋亡小体形成越多。30、4、6、8μmol/L冬凌草甲素(分别设为对照组及4、6、8μmol/L组)处理24 h后,THP-1细胞凋亡率分别为(3.7±1.1)%、(16.2±3.3)%、(30.1±4.3)%、(49.5±6.7)%,对照组与各浓度组凋亡率比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与4μmol/L组比较,6、8μmol/L组凋亡率均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。4经Western blot法检测6μmol/L冬凌草甲素处理THP-1细胞24 h后可抑制细胞内Akt/m TOR、Raf/MEK/ERK信号转导通路的活化,并下调Bcl-2、上调Bax的表达。结论冬凌草甲素通过抑制Akt/m TOR、Raf/MEK/ERK信号转导通路的活化,以及调节凋亡调节蛋白Bax和Bcl-2的表达而发挥抗
- 郭勇单卿卿龚玉萍林娟杨曦
- 关键词：冬凌草素白血病抑制因子凋亡调节蛋白质类
- 雷帕霉素联合柔红霉素对Ph+急性淋巴细胞白血病细胞株SUP-B15的抗肿瘤效应及机制探讨
- ＜正＞Ph染色体是9号染色体的abl基因与22号染色体的bcr基因相互易位形成的染色体异常,形成的融合基因bcr/abl编码的BCR/ABL蛋白,是导致Ph阳性白血病发生的主要机制。Ph阳性白血病包括95%以上慢性粒细胞...
- 龚玉萍杨曦林娟周睿卿郭勇单卿卿何光翠
- 文献传递
- 转录因子SCL/TAL-1在K562细胞向红系分化中的作用
- ＜正＞目的:本研究以EPO诱导白血病K562细胞为红系分化细胞模型,通过慢病毒转染系统干扰SCL/TAL-1的表达,探讨转录因子SCL/TAL-1在K562细胞红系造血分化中的作用。方法:通过慢病毒载体系统将下调SCL/...
- 龚玉萍周睿卿郭勇单卿卿杨曦
- 文献传递
- 多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病伊马替尼耐药细胞株SUP-B15/RI耐药形成中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的研究多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病〔Ph(+)ALL〕伊马替尼(IM)耐药细胞株SUP-B15/RI耐药机制中的作用。方法 RT-PCR技术检测敏感细胞株SUP-B15和IM耐药细胞株SUP-B15/RI MDR1mRNA表达,改良MTT法测定IM、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊甙(VP-16)单药及联合维拉帕米作用于SUP-B15细胞和SUP-B15/RI细胞72h后增殖活性的改变,计算抑制率为50%时的药物浓度(IC50),DNR药物外排实验检测MDR1表达产物P-gp功能。结果 MDR1基因在SUP-B15/RI中的表达是敏感细胞SUP-B15的(2.02±0.04)倍(P<0.05)。IM、DNR、VCR、VP-16单药作用于SUP-B15/RI细胞的IC50值较SUP-B15细胞增高(P<0.05),相对耐药倍数(RF)分别为(20.52±2.34)、(10.33±1.88)、(9.78±1.27)、(3.84±0.69)倍。IM、DNR、VCR、VP-16与维拉帕米联合作用于SUP-B15/RI细胞后IC50值较单药时降低(P<0.05),耐药逆转倍数分别为(1.44±0.43)、(3.20±0.17)、(1.44±0.12)、(1.33±0.14)。P-gp蛋白功能在SUP-B15/RI细胞强于SUP-B15细胞,DNR泵出率分别为10.27%、3.43%。结论 MDR1基因在SUP-B15/RI细胞中表达增加,其表达产物P-gp功能增强,P-gp抑制剂维拉帕米可以部分逆转IM耐药。说明MDR1参与SUP-B15/RI细胞IM耐药机制的形成。
- 林娟邢宏运龚玉萍杨曦郭勇单卿卿周睿卿
- 关键词：伊马替尼耐药MDR1/P-GP
