张伟伟
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 成人肾脏足细胞的原代培养和鉴定
- 张伟伟秦贵军赵亚兵
- 成人肾脏足细胞的原代培养和鉴定
- 目的建立一种重复性好、操作简便的成人肾脏足细胞原代培养方法。方法取肾脏肿瘤手术切除后远离患病部位的正常肾脏组织,通过差异筛选法分别通过80、40、80、120目细胞筛网,收集120目筛网上肾小球进行接种,利用植块法将接种...
- 张伟伟秦贵军赵亚兵
- 文献传递
- 危重病人的风险评估与管理
- 目的探讨如何通过加强对护理人员的执业风险意识宣传教育和风险管理,掌握护理不安全因素,采取控制护理风险的管理,避免护理风险的发生,为患者提供安全护理。
- 陈倩张伟伟
- 关键词：院内转运护理常规
- 白藜芦醇对波动性高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞脂联素受体表达的影响
- 目的:探讨白藜芦醇(Resveratrol,Resv)对波动性高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)脂联素受体(AdipoR1和AdipoR2)表达的影响及机制。方法:采用脂质体介导的方法将又头转录因子O1(FoxO1)...
- 吉鸿飞秦贵军张伟伟吴丽娜马晓君
- 叉头状转录因子01对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响被引量：7
- 2012年
- 目的通过激活和抑制叉头状转录因子01（Fox01）活性及表达，探讨其对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞（MCs）氧化应激的作用。方法采用脂质体转染法将FoxOl短发夹样RNA（Fox01shRNA）质粒载体稳定转染MCs；用高糖（30．0mmol／L）和白藜芦醇（Resv20．0txmol／L）培养稳定转染后的MCs。以5．6mmol／L葡萄糖培养的MCs为正常对照组（NG），将高糖培养的MCs分为5组：单纯高糖组（HG）、HG＋Resv组、HG＋Fox01shRNA转染组、HG＋Resv＋Fox01shRNA转染组、HG＋转染阴性对照组（shNC）。培养72h后，用荧光酶标仪检测各组MCs内活性氧（ROS）水平；逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测去乙酰化酶（Sirtl）、Fox01、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）mRNA表达；Westernblotting法检测Fox01及磷酸化Fox01（p-Fox01）水平。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果与NG组相比，HG组SirtlmRNA表达下降，p-Fox01水平升高，MnSODmRNA表达下降，ROS水平升高，差异均有统计学意义（t=12．38、13．27、14．13、8．36，均P〈0．05）。与HG组相比，HG＋Fox01shRNA转染组Fox01mRNA表达被抑制，MnSODmRNA表达更低，ROS水平更高，差异均有统计学意义（t=20．61、13．61、10．13，均P〈0．05）；HG＋Resv组SiitlmRNA表达升高，p-Fox01水平下降，MnSODmRNA表达升高，ROS水平下降，差异均有统计学意义（t=6．02、10．69、5．39、5．37，均P〈0．05）。与HG＋Resv组比较，HG＋Resv＋Fox01shRNA转染组，Fox01mRNA表达被抑制，MnSODmRNA表达降低，ROS水平升高，差异均有统计学意义（t=22．53、15．31、14．63，均P〈0．05）。结论Fox01是调节MCs内ROS水平的重要转录因子，其可能通过激活下游抗氧化靶基因MnSOD的表达，保护MCs对抗氧化应激。
- 吉鸿飞秦贵军张伟伟吴丽娜马晓君
- 关键词：叉头转录因子类氧化性应激肾小球系膜细胞高糖
- 成人肾脏足细胞的原代培养和鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的建立一种重复性好、操作简便的成人肾脏足细胞原代培养方法。方法取肾脏肿瘤手术切除后远离患病部位的正常肾脏组织，分离出肾皮质，剪碎研磨并通过差异过筛法分别通过80目（孔径220μm）、40目（450μm）、120目（125μm）细胞筛网，收集120目筛网上肾小球利用植块法进行接种，将接种培养面向上放置，4h后添加培养液并将培养瓶翻转过来正常放置培养箱内孵育。采用形态学观察和细胞间接免疫荧光染色法，对去氧肾上腺素、第八因子（F8）蛋白、波形蛋白、角蛋白和肾母细胞瘤蛋白（WT-1）进行鉴定；并用流式细胞仪分析足细胞纯度。结果接种3d后可见绝大部分肾小球贴壁；5d后几乎全部肾小球贴壁，少许肾小球周围有细胞爬出，体积中等，呈多边形，无突起伸出；7～10d可见所有肾小球周围大量多边形细胞爬出，细胞迅速生长至融合状态，呈铺路石样外观，符合去分化状态足细胞特征；此时胰蛋白酶差异消化去除成纤维细胞传代培养。消化传代后的足细胞胞体、胞核逐渐增大，自细胞体伸出明显树枝状突起，常见双核，符合分化状态足细胞特征。免疫荧光染色发现传代7d后细胞表达足细胞特异性蛋白WT-1、去氧肾上腺素，不表达F8蛋白、波形蛋白、角蛋白，排除内皮细胞、系膜细胞和壁层上皮细胞污染。流式细胞仪分析足细胞纯度为98．3％。结论应用差异过筛法分离人肾小球，并结合植块法进行接种可促进肾小球贴壁，简便、高效地培养出原代足细胞。
- 张伟伟秦贵军赵亚兵
- 关键词：足细胞细胞培养技术成年人
- 危重病人的风险评估与管理
- 目的探讨如何通过加强对护理人员的执业风险意识宣传教育和风险管理,掌握护理不安全因素,采取控制护理风险的管理,避免护理风险的发生,为患者提供安全护理。
- 陈倩张伟伟
- 关键词：院内转运护理常规
- 文献传递
- 叉头转录因子O1对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响
- 目的:通过激活和抑制叉头转录因子O1(FoxO1)活性及表达,探讨其对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞(MCs)氧化应激的作用及机制。方法:采用脂质体转染法将FoxO1短发夹样RNA(FoxOlshRNA)质粒载体稳定转染M...
- 吉鸿飞秦贵军张伟伟吴丽娜马晓君
- 黄芪注射液对高果糖饮食诱导的大鼠胰岛素抵抗和氧化应激的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨黄芪注射液对高果糖饮食大鼠胰岛素抵抗和氧化应激的抑制作用。方法:SD大鼠经高果糖饲料喂养4周后,随机分为模型组,黄芪注射液高、低剂量(相当于生药量ip 5,2.5 g.kg-1)组、罗格列酮(3 mg.kg-1,ig)组,连续给药4周,继续给予高果糖饲料4周。同时设立正常组,普通饲料喂养。测定体重、空腹血糖、血浆胰岛素、胰岛素抵抗指数、氧化应激指标。结果:模型组体重与正常组无明显区别;空腹血糖、血浆胰岛素水平、胰岛素抵抗指数、丙二醛(MDA)含量明显高于正常组(P<0.05);过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著低于正常组(P<0.05)。与模型组相比,黄芪注射液组、罗格列酮组空腹血糖、血浆胰岛素水平、胰岛素抵抗指数、MDA含量降低,CAT,SOD,GSH-Px活性升高,高剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:黄芪注射液可减轻高果糖饮食所引起的胰岛素抵抗及氧化应激。
- 张伟伟秦贵军
- 关键词：黄芪注射液胰岛素抵抗氧化应激
- 白藜芦醇对波动性高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞脂联素受体表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨白藜芦醇（resveratro]）对波动性高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞脂联素受体（AdipoRl和AdipoR2）表达的影响及机制。方法采用脂质体介导的方法将叉头转录因子O1（FoxO1）短发夹样RNA（FoxO1shRNA）质粒载体稳定转染大鼠肾小球系膜细胞；波动性高糖（5．6mmol／L或30mmol／L，每隔8h轮换）培养转染后的大鼠肾小球系膜细胞，并用白黎芦醇（20μmol／L）处理。以葡萄糖浓度（5．6mmol／L）培养的大鼠肾小球系膜细胞作为正常对照组（NG），将波动性高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞分为5组：波动性高糖组（IHG）、IHG＋白黎芦醇组、IHG＋FoxO1shRNA转染组、IHG＋白黎芦醇＋FoxO1shRNA转染组、IHG＋转染阴性对照组（shNC）。培养72h后，用荧光酶标仪检测各组大鼠肾小球系膜细胞内活性氧簇（ROS）水平：RT—PCR检测去乙酰化酶（Sirtl）、FoxO1、AdipoRl、AdipoR2mRNA的表达，Western印迹检测FoxO1、磷酸化FoxO1（P—FoxO1）、AdipoR1和AdipoR2蛋白的表达。结果（1）与NG组相比，IHG组Sirtl mRNA表达下降，p-FoxO1水平升高，转录活性降低，AdipoRl表达下降，ROS水平升高（均P〈0．05）；（2）与IHG组相比，IHG＋FoxO1shRNA转染组，FoxO1表达被抑制，AdipoRl表达更低，ROS水平更高（均P〈0．05）；（3）与IHG组相比，IHG＋白黎芦醇组Sirt1 mRNA表达升高，p-FoxO1水平下降，转录活性升高，AdipoR1表达升高，ROS水平下降（均P〈0．05）；（4）与IHG＋白黎芦醇组相比，IHG＋白黎芦醇＋FoxO1shRNA转染组，FoxO1表达被抑制，AdipoRl表达降低，ROS水平升高（均P〈0．05）；（5）各组间AdipoR2表达无统计学意义（P〉0．05）。结论（1）白藜芦醇能显著上调波动性高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞内AdipoRl的表达。（2）FoxO1在白藜芦醇调节AdipoR1表达中发挥重要作用。
- 秦贵军吉鸿飞张伟伟吴丽娜马晓君
- 关键词：白藜芦醇波动性高糖脂联素受体
