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张春雪: 作品数：37 被引量：111H指数：7; 供职机构：暨南大学生命科学技术学院发育与再生生物学系更多>>; 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程自然科学总论更多>>

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人精子顶体反应3种检测方法的比较与评价被引量：11: 2005年; 目的:寻找简便和准确的精子顶体反应检测方法。方法:正常人精液标本液化后混合,分成6组,分别用金霉素染色法、考马斯亮蓝染色法和酸性磷酸酶检测法对孕酮诱导顶体反应前后的人精子进行形态学观察并且对顶体反应率进行数据统计。结果:经考马斯亮蓝和金霉素染色后,发生顶体反应的精子和没有发生顶体反应的精子均有明显的形态差异;经考马斯亮蓝染色、金霉素荧光染色和酸性磷酸酶测试法检验,孕酮诱导组与阴性对照组的精子顶体反应率均有明显差异(P<0.05)。结论:3种方法均可作为顶体反应的检测手段,但考马斯亮蓝染色更为简便和稳定。; 张韫谢琪璇潘善培张春雪肖銮娟彭雅林; 关键词：精子顶体反应酸性磷酸酶

人卵透明带蛋白3差异表达菌的鉴定及比较: 2009年; 目的:研究重组人卵透明带ZP3蛋白的差异表达情况。方法:构建8个重组rhZP3的差异表达质粒在毕赤酵母中进行诱导表达,研究跨膜区保留与否、潜在酶切位点突变与否及多聚组氨酸纯化标签设计的位置是否影响rhZP3的表达情况。结果:保留跨膜区会影响重组蛋白泌出胞外而使表达量降低,潜在酶切位点存在会导致重组蛋白被不完全降解,而多聚组氨酸纯化标签设计位置对表达也有一定影响。结论:从表达量和产物完整性综合考虑,以突变型成熟肽为佳,含跨膜区的蛋白则应选用pPICZaA质粒,以便富集得到完整的表达蛋白。; 周文燊熊波李文星谢琪璇肖銮娟张春雪潘善培; 关键词：跨膜区

人抗卵透明带抗体阳性血清对小鼠体外受精和早期胚发育的影响被引量：1: 2001年; 本研究在小鼠体外受精和早期胚胎发育中添加抗卵透明带抗体阳性不孕妇女血清 (n =11) ,结果显示 :与对照组相比较 ,6例完全阻断受精和发育 (P <0 .0 1) ;2例仅阻断受精 ,不明显抑制发育 ;3例则与对照组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。提示人抗卵透明带抗体的主要效应是阻断受精 ,并可以进一步抑制胚胎早期发育 ,但效应的程度表现出个体差异。; 钟瑜朱伟杰张春雪; 关键词：透明带抗体体外受精胚胎培养

建立人输卵管上皮细胞无血清培养被引量：3: 1998年; 人输卵管上皮细胞（HOEC）可以体外较长时间无血清培养，DMEM／F12培养液的培养效果优于Ham’sF10，在加有多种因子和胎球蛋白的培养液中，HOEC可贴壁生长，生长能力达到合质量分数15％FCS的对照组的30％～40％，一般可传代2次，最长培养可维持38d，细胞形态与有血清培养差别不大，虽然无血清培养HOEC的生长速度、密度、传代成功率远不及有血清培养，但能抑制成纤维细胞生长，维持较纯的上皮细胞。; 钟瑜张春雪潘善培; 关键词：人输卵管上皮细胞无血清培养

人LAK细胞的诱导及其体外抗肿瘤作用被引量：1: 1998年; 采用IL－2或IL－2＋PHA－P对人外周血单核细胞进行体外淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK、LI－LAK细胞）的诱导及对其体外抗肿瘤细胞活性进行研究，结果显示：300～500IU／mL．IL－2＋5μg／mLPHA－P，孵育时间8～10d为最适的诱导条件，最高可诱导细胞增殖100倍以上。诱导出的LAK及LI－LAK细胞对数种自然杀伤细胞（NK）敏感或不敏感的瘤细胞均有明显杀伤作用。实验还显示，PHA－P的主要作用可能是促进细胞扩增，而非肿瘤杀伤活性的诱导。; 钟瑜谢琪璇张春雪潘善培刘学高; 关键词：LAK细胞白细胞介素2 植物血凝素

人LAK及LI-LAK细胞对S_(180)荷瘤小鼠的治疗作用: 1998年; 用LAK和LI－LAK两种细胞进行S180荷瘤小鼠体内抗肿瘤试验。结果表明，人LAK细胞及LI－LAK细胞有明显的体内抗S180肉瘤作用，S180荷瘤鼠存活期显著延长，其平均存活时间分别为45．3和49．6d，且部分可完全治愈；而未用药的对照组鼠只平均存活21.1d，仅用IL－2治疗的荷瘤鼠平均存活时间为35．9d。同时可知，两实验组中两种细胞作用程度相差不大（P＞0．05）。; 钟瑜张春雪谢琪璇潘善培刘学高; 关键词：人LAK细胞

两种激素对小鼠初级卵泡体外成熟培养的实验研究被引量：4: 2002年; 目的 :探讨卵泡刺激素 (FSH)和人绝经期尿促性腺激素 (hMG)对小鼠初级卵泡体外培养成熟的作用。方法 :从小鼠卵巢组织人工分离所获的初级卵泡 ,在添加胎牛血清 (FBS)以及FSH或hMG的WaymouthmediumMB75 2 / 1培养液中比较培养。结果 :小鼠初级卵泡在添加 10 0 μg/LhMG的培养液中有 15 .94 % (n =6 9)发育成小囊腔卵泡 ,在添加 30 0 μg/LhMG的培养液中有 2 8.5 7% (n =5 6 )发育成大囊腔卵泡 ;在添加FSH的各培养组中 ,无囊腔卵泡的形成。结论; 张文红朱伟杰钟瑜张春雪; 关键词：卵泡刺激素尿促性腺激素体外成熟培养

慢病毒干扰小鼠附睾特异的meClps基因可降低精子的运动能力被引量：3: 2014年; 目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检测meClps蛋白的表达。针对meClps基因的序列设计并合成3对靶向干扰meClps表达的寡核苷酸序列,构建重组慢病毒载体pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251、224和286。将重组慢病毒干扰质粒分别与pDsRed2.0-C1-meClps共转染到NIH-3T3细胞,半定量PCR和Western blotting检测meClps基因在mRNA和蛋白水平的变化。将筛选得到的干扰效果最好的慢病毒载体包装慢病毒,注射到小鼠附睾头部组织后分析对附睾尾部精子运动性能的影响。结果构建了体外表达meClps蛋白的pDsRed2.0-C1-meClps表达载体和靶向meClps基因的慢病毒RNAi载体。靶向meClps的RNA干扰载体对转染pDsRed2.0-C1-meClps后的NIH-3T3细胞中的meClps的mRNA和蛋白表达都有抑制,但以转染pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251对meClps的抑制效果最明显。包装后的慢病毒注射到小鼠附睾头部后附睾尾部组织中的精子运动速率降低(P<0.05)。结论筛选出RNAi-251能有效干扰meClps表达,通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后精子运动性能降低。; 廉滋珍曹佐武陈冉陈雷薛樱子秦俊文齐绪峰张春雪禹艳红; 关键词：RNA干扰慢病毒精子运动

重组人卵透明带蛋白及其多克隆抗体对精子-透明带结合的影响被引量：1: 2006年; 为了探讨毕赤酵母表达的重组人卵透明带ZP3蛋白(recombinant human zona pellucida-3 protein,rhZP3)及其多克隆抗体对小鼠和人精卵结合的影响,采用不同浓度的rhZP3以及空白培养液分别处理小鼠精子,然后再与小鼠卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子对透明带黏附及体外受精率的影响;用rhZP3以及空白培养液分别处理人精子,然后再与人卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子对透明带黏附的影响;用抗rhZP3抗体与阴性血清分别处理小鼠和人卵子,再与精子进行结合实验,观察多克隆抗体对精子粘附以及小鼠体外受精率的影响。实验结果表明,rhZP3和抗rhZP3多克隆抗体既能抑制人的体外精卵结合,也能抑制小鼠体外精卵结合,提示rhZP3具有天然透明带的特性,有发展成避孕疫苗和作为检测透明带抗体检测试剂的可能。; 谢琪璇马丽潘善培张韫张春雪肖銮娟史卫卫李文星; 关键词：卵透明带多克隆抗体避孕疫苗

酶联免疫吸附法测定血清抗精子抗体: 1990年; 将酶联免疫吸附技术用于人血清抗精子抗体的检测,126例,临床检查结果所得,平均批内变异系数为6.5%,平均批间变异系数为7.1%,证实该法稳定性、重复性良好。44例正常供血者标本得正常值为 O.D(?)0.355。将其与目前临床上应用较广的精子浅盘凝集试验(TAT)结果比较,两者符合率达87.3%。; 张江兰谢琪璇张春雪; 关键词：酶联免疫吸附法抗精子抗体

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