张谷裕
- 作品数：9 被引量：16H指数：3
- 供职机构：广东医学院附属医院更多>>
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- 脱氧核酶抑制Bcl-2基因表达诱导人肝癌细胞凋亡的研究被引量：1
- 2013年
- 目的 研究利用脱氧核酶抑制Bcl-2表达对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的影响.方法 合成针对Bcl-2基因的“10～23”型脱氧核酶及其类似物；转染入肝癌细胞；RT-PCR检测脱氧核酶细胞内Bcl-2mRNA的切割作用；荧光免疫方法测定脱氧核酶对Bcl-2蛋白表达的影响；流式细胞仪检测脱氧核酶对肝癌细胞凋亡的影响.结果 “10 ～ 23”型脱氧核酶及其类似物成功转染入肝癌；非修饰脱氧核酶（DzT）和修饰的脱氧核酶（DzTi）在胞内能有效地切割Bcl-2 mRNA,DzTi比DzT的切割活性显著；荧光免疫法测的DzT和DzTi能显著地下调细胞内Bcl-2蛋白水平（P＜0.01）,抑制肝癌细胞的生长（P＜0.05）.流式细胞术结果提示,DzT和DzTi细胞凋亡率明显升高出现凋亡峰,与对照组细胞及脱氧寡核苷酸DzT和 DzTi凋亡率差异有统计学意义（P ＜0.05）；DzT和DzTi组细胞出现细胞周期阻滞,表现为G0/G1细胞所占比例上升,S期细胞所占比例下降.结论 脱氧核酶可以有效切割Bcl-2 mRNA,抑制Bcl-2蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡.
- 杨永光李明意林满洲张谷裕
- 关键词：脱氧核酶基因,BCL-2肝细胞癌
- 大鼠肝类固醇激素和异质素受体基因Nrli2过表达载体的构建和表达被引量：1
- 2013年
- 目的构建类固醇激素和异质素受体（SXR）基因Nrli2过表达质粒，并通过HEK-293细胞系验证其表达。方法大鼠肝组织中的总RNA逆转录后将含相应酶切位点的引物扩增到Nrli2编码框，并将Nrli2片段亚克隆至pcDNA3．1（＋），同时对其进行酶切和测序鉴定，挑选pcDNA3．1（＋）．Nrli2转染至293细胞系中，48h收集细胞进行荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR），72h后Westernblot法检测。结果成功扩增Nrli2编码区，并将其克隆至载体pcDNA3．1中。HEK-293细胞系、pcDNA-3．1（＋）、pcDNA3．1（＋）-Nrli2中SXR的FQ—PCR结果分别为1．00±0．09、4．88±0．94、473274．04±28784．24，后者分别与前两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论成功构建Nrli2过表达载体，并在HEK-293细胞中成功表达。
- 徐浩李明意胡敏张谷裕
- 关键词：类固醇激素基因克隆
- 分次与一次肝部分切除术建立大鼠肝再生模型的对比研究被引量：2
- 2012年
- 目的分别采用分次与一次肝部分切除术方法建立大鼠肝再生模型,通过对比研究以期为研究肝再生规律提供更合理技术平台。方法 SD大鼠随机分为3组:①分次肝部分切除组(A);②一次肝部分切除组(B);③对照组(C)。比较各组切除肝重、残肝重、全肝重与切肝比例,同时比较前两组胆漏、出血、腹腔感染及下腔静脉狭窄并发症发生率,对比分析不同手术方法对肝再生量化的准确性差异及手术建模成功率的影响。结果各组全肝重及肝脏指数其差异统计学上无意义(P>0.05),分次肝部分切除组与对照组比较,切除肝重、残肝重与切肝比例统计学上无意义(P>0.05),而一次肝部分切除组与分次肝部分切除组及对照组三组对比,切除肝重、切肝比例均比后者小(P<0.05)、残肝重则比后者大(P<0.05)。一次切除组胆漏、出血、腹腔感染及下腔静脉狭窄并发症发生率均比分次肝部分切除组高(P<0.05)。结论采用分次肝部分切除术建立大鼠肝再生模型,量化肝脏切除程度的准确性高,并发症发生率低,手术成功率高,是理想的手术方法。
- 刘国华戴东李明意张谷裕
- 关键词：肝再生肝切除术并发症
- 门静脉注射超声微泡促进肝脏EGFP质粒表达
- 2011年
- 目的探讨门静脉注射超声微泡对肝脏增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒表达的影响。方法 48只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为3组,每组16只。A组经尾静脉注射EGFP裸质粒,B、C组分别经尾静脉和门静脉导管注射微泡与EGFP质粒混悬液,同时按设定参数和时间超声辐照肝区。转染后第1、3、7、11天每组随机处死4只大鼠,肝组织冰冻切片,荧光显微镜观察EGFP表达。结果 3组大鼠转染后第1天发现少量荧光,第3天达高峰;A组于第7天荧光基本消失,B、C组第7天仍持续表达。第3、7天,B、C两组转染率较A组明显增加(P<0.05),第3天C组的转染率较B组也有增加(P<0.05)。结论门静脉注射超声微泡可显著提高肝脏EGFP质粒转染率,可作为一种安全、有效的靶向基因体内转运载体。
- 吴桂林李明意孙丕绛徐晓红林满洲杨永光张谷裕刘国华徐浩
- 关键词：超声微泡增强型绿色荧光蛋白转染
- 两种肝再生模型肝切除术后肝再生指数和肝再生度的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨大鼠肝细胞增殖介导肝再生和卵圆细胞增殖介导肝再生两种不同大鼠肝再生模型肝切除术后肝再生指数和肝再生度变化的情况。方法 SD大鼠随机分为2组:肝细胞增殖介导肝再生模型组(PH),卵圆细胞增殖介导肝再生模型组(2AAF/PH)。计算两组模型肝切除术后4d、8d、12d、16d、20d残肝肝再生度及肝再生指数。结果两组肝再生度、肝再生指数均在第4天明显升高,12天左右达到高峰,超过再生总量的2/3以上,至20天基本达到原肝重。在4d、8d、12d天同一时间点内,PH组肝再生度比2AAF/PH组高(P<0.05),而到16d时,2AAF/PH组肝再生度则比PH组高(P<0.05)。在4d、8d天同一时间点内,PH组肝再生指数比2AAF/PH组高(P<0.05)。在12d、16d、20d同一时间点内,两组肝再生指数无显著性差异(P>0.05)。结论肝再生度与肝再生指数是评价肝再生质量变化较直观和准确的指标,肝再生度在反映肝再生规律方面要比肝再生指数更准确。
- 刘国华张谷裕林满洲李明意杨永光徐浩
- 关键词：肝再生肝切除术
- 大鼠门静脉置管并体外留置模型的建立被引量：3
- 2011年
- 本研究旨在建立大鼠门静脉置管并体外留置模型，现报道如下。
- 孙丕绛李明意林满洲杨永光吴桂林张谷裕
- 关键词：门静脉置管留置体外
- 维生素K2促进大鼠肝再生模型肝切除术后肝功能恢复的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:通过建立大鼠肝卵圆细胞增殖肝再生模型,探讨维生素K2对大鼠肝再生模型部分肝切除术后肝再生过程中肝功能恢复的影响。方法:180只SD雄性大鼠随机分为6组,实验组5组:(1)2AAF+VLVK2/PH,(2)2AAF+LVK2/PH,(3)2AAF+MVK2/PH,(4)2AAF+HVK2/PH,(5)2AAF+VHVK2/PH;对照组:2AAF/PH。分别于术后第4、8、12、16、20天采血检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)的动态变化情况。结果:2AAF/PH组第4、8天ALT、AST与5组维生素K2不同剂量实验组相比较明显升高(P<0.01),而血清ALB含量在第4、8天与5组维生素K2不同剂量实验组相比较明显降低(P<0.05)。5组维生素K2不同剂量实验组中2AAF+MVK2/PH组第4、8天与2AAF+VLVK2/PH、2AAF+LVK2/PH相比较血清ALT、AST明显降低(P<0.01),而血清ALB含量在第4、8天相比较明显升高(P<0.01)。2AAF+MVK2/PH组与2AAF+HVK2/PH、2AAF+VHVK2/PH组比较,ALT、AST、ALB差异无统计学意义(P>0.05)。结论:维生素K2对大鼠肝再生模型术后肝功能恢复有明显的改善作用;当剂量低于20mg/kg时,肝功能恢复呈剂量依赖性。
- 张谷裕刘国华林满洲李明意杨永光许浩
- 关键词：维生素K2肝再生肝功能肝切除
- 抑制survivin表达对肝癌细胞阿霉素化疗敏感性的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨survivin基因沉默对人肝癌耐药株阿霉素化疗敏感性的影响。方法:针对人survivin基因设计并合成3条siRNA序列,分别用脂质体法转染人肝癌BEL-7402细胞(3组)。以未转染的BEL-7402细胞为对照,分别用RT-PCR法,免疫细胞化学技术及MTT法检测各组细胞survivin mRNA与蛋白的表达,及对阿霉素敏感性。结果:与对照组比较,各转染组细胞survivin mRNA与蛋白的表达均明显降低(均P<0.05);对照组细胞对阿霉素的IC50值为(20.60±2.86)μg/mL,各转染组细胞对阿霉素的IC50值分别为(11.53±1.46)μg/mL,(14.13±1.82)μg/mL,(15.53±0.46)μg/mL,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:抑制survivin基因的表达能增加BEL-7402细胞阿霉素化疗敏感性。
- 杨永光刘丽娟李明意林满洲张谷裕
- 关键词：RNA干扰存活素
- 超声引导下经皮肝穿刺置管在细菌性肝脓肿治疗中的应用(附35病例)被引量：3
- 2013年
- 目的评价超声引导下经皮肝穿刺置管在细菌性肝脓肿治疗效果。方法对收治本科35例行超声引导下置管治疗的细菌性肝脓肿患者进行回顾性析。结果 35例患者均在超声引导下穿刺置管成功,经对症置管、抗炎冲洗治疗,患者全部治愈,无临床并发症,术后住院时间5～30d(平均13.6天)。结论经皮肝穿刺置管治疗细菌性肝脓肿,具有患者创伤小、成功率高,操作简便、经济、并发症少等特点,临床有推广应用价值。
- 刘丽娟杨永光李明意林满洲张谷裕刘国华徐浩
- 关键词：细菌性肝脓肿超声引导置管引流
