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文喻玲

作品数：23 被引量：48H指数：5
供职机构：北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
发文基金：云南省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 21篇期刊文章
  • 1篇会议论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 14篇医药卫生
  • 12篇生物学

主题

  • 19篇病毒
  • 15篇轮状
  • 15篇轮状病毒
  • 13篇免疫
  • 6篇蛋白
  • 5篇荧光
  • 5篇人轮状病毒
  • 5篇细胞
  • 5篇免疫学
  • 5篇抗原
  • 5篇基因
  • 4篇免疫荧光
  • 3篇英文
  • 3篇真核
  • 3篇真核细胞
  • 3篇轮状病毒属
  • 3篇抗体
  • 3篇抗原表位
  • 3篇克隆
  • 3篇脊髓灰质炎

机构

  • 21篇中国医学科学...
  • 3篇云南民族大学
  • 2篇北京协和医学...

作者

  • 23篇文喻玲
  • 20篇陈元鼎
  • 8篇李传印
  • 8篇范耀春
  • 7篇潘小霞
  • 6篇赵庆欢
  • 6篇张艳
  • 5篇尹兴晓
  • 5篇魏海涛
  • 5篇于洋
  • 4篇袁静
  • 3篇曹志亮
  • 3篇张顺
  • 3篇赵冰心
  • 2篇刘名英
  • 2篇郭仁
  • 2篇刘晓
  • 2篇熊新宇
  • 2篇王晶
  • 1篇代青

传媒

  • 8篇中国生物工程...
  • 4篇中国生物制品...
  • 2篇生物技术通讯
  • 2篇中国医学科学...
  • 1篇Zoolog...
  • 1篇病毒学报
  • 1篇病毒学杂志
  • 1篇中国医药生物...
  • 1篇昆明医科大学...
  • 1篇第九次全国生...

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 2篇2012
  • 3篇2011
  • 2篇2010
  • 4篇2009
  • 3篇2008
  • 2篇2007
  • 1篇2005
  • 1篇1990
  • 1篇1989
  • 1篇1982
共 23 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
A组轮状病毒NSP1基因克隆表达及免疫学性质研究被引量：4
2010年
轮状病毒(rotavirus,RV)非结构蛋白1(non structural protein1,NSP1)在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。运用基因克隆和表达技术在大肠杆菌中表达了TB-Chen株RVNSP1蛋白,进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成与分布以及NSP1的系统进化和基因分型研究。结果表明,大肠杆菌BL21(DE3)能高效表达重组NSP1蛋白(rNSP1),rNSP1表达量约占菌体总蛋白的34.4%。rNSP1能诱导免疫豚鼠产生特异性血清抗体。Western blot及免疫荧光检测结果表明,抗rNSP1血清抗体能特异性识别自身蛋白,对SA11、Wa株的NSP1蛋白有交叉反应性;免疫荧光结果还表明,SA11感染的MA104细胞中合成的NSP1蛋白在细胞质中区域化聚集形成辐射状排列的颗粒状结构,而Wa株的NSP1不能形成此样结构。至今发现的A组RV至少可以分为16个不同的NSP1基因型,TB-Chen株NSP1为A2型。不同基因型有独特的敏感宿主范围,同一基因型可能感染不同种动物,同一种动物也可能感染不同基因型。基因型A4型和A16型仅在鸟类病毒株中出现;而且鸟类中只有A4型和A16型。研究结果为进一步研究NSP1蛋白质的结构功能及其应用开发奠定了很好的基础。
魏海涛张艳范耀春李传印文喻玲陈元鼎
关键词：轮状病毒免疫学性质基因分型
A组轮状病毒NSP6蛋白表达及免疫学性质研究(英文)被引量：2
2009年
轮状病毒(RV)NSP6与NSP5由同一基因片段编码,至今对NSP6性质了解很少。用基因重组表达和免疫学方法,重组表达了A组人RVNSP6蛋白,进行了NSP6的动物免疫及其抗原反应性、免疫原性研究以及RV感染细胞中NSP6的合成及亚细胞分布研究。研究结果表明,NSP6可在原核系统中高效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的34.2%;NSP6免疫豚鼠血清抗体可特异性识别菌体细胞中表达的NSP6和SA11及Wa病毒感染的MA104细胞中合成的NSP6蛋白;病毒感染细胞中合成的NSP6在感染后3h就可检测到,12h表达量达到最高;NSP6在病毒感染细胞质中呈弥散状分布,并主要积聚在细胞核的周围,未观察到毒质体样结构。研究结果对深入了解RVNSP6的结构与功能具有重要的意义,具有重要的潜在应用价值。
李传印范耀春文喻玲张艳魏海涛陈元鼎
关键词：轮状病毒免疫学特性细胞内分布
A组人轮状病毒NSP3基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
2007年
目的:获得轮状病毒NSP3基因的表达产物及其抗血清。方法:将TB-Chen株轮状病毒NSP3基因插入质粒pETL,构建重组表达质粒pET-NSP3,并转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白NSP3;用凝胶分离回收的方法纯化该蛋白,免疫豚鼠制备该蛋白的抗血清。结果:构建了重组表达质粒pET-NSP3,并在大肠杆菌中高效表达了重组蛋白NSP3,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的28.6%;有效地纯化了目的蛋白并制备了该蛋白的抗血清,Western印迹表明该抗血清能与重组蛋白NSP3发生特异性免疫反应。结论:通过质粒pETL能高效表达轮状病毒NSP3蛋白,该重组蛋白具有较好的免疫反应性,为进一步研究其结构、功能及免疫学性质奠定了基础。
于洋文喻玲赵庆欢曹志亮陈元鼎
关键词：轮状病毒克隆
痘苗病毒/T7 RNA聚合酶辅助的原核基因在真核细胞中的表达(英文)
2011年
痘苗病毒/T7RNA聚合酶这一瞬时表达系统由于具有很多优于其他表达系统的特点而被广泛地应用于表达外源蛋白。TB-Chen株轮状病毒的VP6 DNA编码片段插入到原核质粒pETL的噬菌体T7启动子和终止子之间,获得重组表达质粒pET-VP6。构建好的重组表达质粒pET-VP6通过脂质体转染到真核细胞MA104中,用携带噬菌体T7RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF7-3再感染,可在细胞检测到目的蛋白VP6的表达。研究结果还显示,痘苗病毒vTF7-3感染后,细胞病变较快,严重影响了蛋白的表达量。结果提示,如果能降低痘苗病毒vTF7-3的致细胞病变作用而不影响其在细胞中合成T7 RNA聚合酶的能力,蛋白可能会得到高效表达。为进一步研究VP6基因的特性及更好地应用痘苗病毒/T7 RNA聚合酶这一瞬时表达系统提供理论基础。
潘小霞张顺文喻玲袁静陈元鼎
关键词：真核细胞T7RNA聚合酶
A组人轮状病毒全基因组克隆和基因型分析被引量：13
2008年
运用基因克隆和重组技术,从一急性胃肠炎患儿样品中克隆到一株轮状病毒(RV)全基因组cDNA。核苷酸序列测定结果表明,该株RV基因组11条RNA共含有18613个核苷酸(3302bp^751bp),编码5791个氨基酸。全基因组研究结果表明,该株RV(TB-Chen)为A组,II亚组,基因型为G2P[4]/NSP4[A]。这是首个A组人RV全基因组研究结果的报道,对研究和开发RV疫苗具有积极的意义。
陈元鼎刘晓熊新宇曹志亮文喻玲赵庆欢余洋尹兴晓李传印范耀春
关键词：全基因组克隆基因型分析
重组轮状病毒抗原表位亚单位疫苗的小鼠保护性被引量：5
2005年
目的评价重组表达的轮状病毒(R V)抗原表位疫苗的小鼠体内保护效果及安全性。方法在以FlockH ouse virus病毒外壳蛋白为载体的外源抗原表位呈递系统(FH V-R NA2系统)中构建和重组表达R V V p4蛋白上第223～262位抗原表位(R EA BC)在原核系统犤;质粒pET,大肠杆菌BL21(D E3)犦中表达的REABC免疫小鼠用细胞培养适应的参照RV W a(G1PA型)和SA11(G3P2型)经口腔灌胃攻击,对R V攻击后的免疫小鼠和对照小鼠的感染症状、排毒情况、血清抗体中和病毒感染性效价进行测定和分析。结果R EA BC可诱导免疫小鼠产生较强的抗-W a和抗-SA11株血清中和抗体和特异的免疫记忆反应,有效保护免疫小鼠对W a和SA11的攻击(不腹泻),减少病毒在体内复制水平和排毒时间,与对照组相比差异具有显著性(P<0.001)。结论重组表达RV抗原表位REABC对小鼠具有较好的免疫保护效果和安全性。
刘晓李嘉琦熊新宇陈瑜娜彭梅代青文喻玲陈元鼎
关键词：轮状病毒免疫保护性
免疫荧光法检测原核和真核细胞中表达的轮状病毒外壳蛋白VP4被引量：3
2008年
目的:用免疫荧光法快速检测原核和真核细胞中表达的轮状病毒(RV)外壳蛋白VP4。方法:以抗VP4的抗体为一抗、FITC标记的羊抗豚鼠IgG为二抗,用免疫荧光方法检测在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达的同源RVVP4;检测SA11或Wa株RV感染MA104细胞后不同时间段病毒VP4的合成及其在感染细胞中的分布情况。结果:用免疫荧光法可直接检测到原核细胞中表达的外源蛋白,也可检测到病毒蛋白在真核细胞中的分布情况。结论:免疫荧光法可特异、方便、快速地检测RVVP4在原核和真核细胞中的表达;来源于RVTB-Chen株的VP4抗体可特异性识别同源病毒VP4,交叉识别SA11或Wa株的VP4。
赵庆欢文喻玲于洋陈元鼎
关键词：免疫荧光法外壳蛋白VP4
轮状病毒Vp6蛋白的免疫荧光检测被引量：10
2008年
目的检测在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的重组轮状病毒(Rotavirus,RV)Vp6蛋白和RV SA11感染的MA104细胞中不同时间表达的Vp6蛋白及其分布规律。方法应用纯化的重组A组人轮状病毒TB-Chen株Vp6(rVp6)蛋白和RVSA11分别免疫豚鼠,制备抗血清,以抗rVp6豚鼠血清作为检测抗体,应用间接免疫荧光技术检测rVp6蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。分别用抗Vp6和抗RV SA11豚鼠血清检测Vp6蛋白和RV SA11株在感染的MA104细胞中的分布。结果在轮状病毒感染的MA104细胞和大肠杆菌BL21(DE3)中均能检测到轮状病毒Vp6蛋白。以抗RV SA11血清作为一抗检测感染细胞,比用抗rVp6血清检测具有更强的敏感性。结论免疫荧光试验可用于轮状病毒Vp6蛋白的检测。
尹兴晓文喻玲赵庆欢于洋陈元鼎
关键词：轮状病毒免疫荧光
轮状病毒结构蛋白VP6的原核表达及其作为检测抗原在病毒检测中的应用被引量：2
2012年
目的原核表达轮状病毒(Rotavirus,RV)结构蛋白VP6,并初步应用于以VP6为检测抗原检测RV血清抗体的ELISA方法,用于不同型RV免疫后抗体水平的检测。方法提取TB-Chen株RV基因组RNA,采用RT-PCR法扩增VP6基因,插入表达载体pETL中,构建重组表达质粒pET-VP6,转化E.coli BL21(DE3),表达rVP6。表达的rVP6经纯化后,与TB-Chen株(G2P[4]型)、Wa株(G1P[8]型)和SA11株(G3P[2]型)RV分别免疫豚鼠,制备血清抗体,以SA11株血清抗体,经Western blot鉴定纯化的rVP6,以纯化的rVP6为检测抗原,采用ELISA法检测不同型RV免疫血清抗体。结果重组表达质粒pET-VP6经双酶切和测序鉴定证明构建正确;表达的rVP6相对分子质量约为45 000,表达量占菌体总蛋白的34.7%;纯化的rVP6纯度达90%以上,蛋白浓度为8.304μg/μl,可与豚鼠抗RV SA11株血清抗体发生特异性反应;以纯化的rVP6为检测抗原,可检测TB-Chen、Wa、SA11株和抗rVP6的豚鼠免疫血清抗体。结论成功地在大肠杆菌中表达了rVP6,以具有共同组/亚组抗原特异性的rVP6作为检测抗原,可检测同一组/亚组内不同型的RV血清抗体,为研制以VP6为检测抗原检测RV感染的ELISA试剂盒奠定了基础。
袁静潘小霞滕玉梅姬秋彦文喻玲陈元鼎
关键词：轮状病毒属酶联免疫吸附测定
TB-Chen株轮状病毒NSP5/NSP6及基因型的初步研究被引量：7
2009年
TB-Chen病毒是一株分离自中国胃肠炎患儿的A组轮状病毒。研究结果表明,TB-Chen病毒的NSP5和NSP6由第10基因组节段编码,该节段全长816bp。NSP5含200个氨基酸,由第22~624位核苷酸（nt）编码,预测分子量为21.9 kD,等电点为7.86。NSP6含92个氨基酸,由第80~355位nt编码,预测分子量为11 kD,等电点为9.65。对编码NSP5和NSP6的ORF核苷酸序列的分子进化分析结果表明,A组RV的NSP5至少可分为7个不同的基因型（H1~H7型）,TB-Chen株NSP5属于H2型;NSP6至少可分为8个基因型（h1~h8型）,TB-Chen株NSP6属于h2型。这是首个对A组人RV的NSP6基因分型的研究结果的报道,并且我们建议NSP6的基因型以英文字母＂h＂代表,如TB-Chen株的NSP5/NSP6基因型为H2h2,69M株的NSP5/NSP6基因型为H7h7,Wa株与KU株的NSP5/NSP6基因型为H1h8。
文喻玲李传印范耀春张艳魏海涛陈元鼎
关键词：分子进化基因型分析
全选 清除 导出
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