李敬东
- 作品数：282 被引量：1,279H指数：17
- 供职机构：川北医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅科学研究项目四川省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信生物学自动化与计算机技术更多>>
- 稳定高表达CYP2E1基因肝癌HepG2细胞系的构建被引量：2
- 2015年
- 目的构建稳定高表达CYP2E1基因的肝癌HepG2细胞系。方法通过NCBI查询CYP2E1的编码序列,设计并构建表达质粒p LV(Exp)-Puro-CMVm-CYP2E1,用载体对应的慢病毒包装质粒(p MDLg/pRRE、pRSVREV和p MD2.G)共同转染293T细胞。利用携带CYP2E1基因的慢病毒(Lenti-CYP2E1-e GFP-Puro)感染HepG2细胞系,采用嘌呤霉素抗性筛选方法构建高表达CYP2E1肝癌HepG2细胞系。增强绿色荧光蛋白检测转染情况,荧光定量PCR及Western blotting检测HepG2、空载及转染CYP2E1基因的HepG2细胞系中CYP2E1 mRNA和蛋白。结果 HepG2细胞系均成功转染CYP2E1基因。HepG2、空载及转染CYP2E1基因的HepG2细胞系中CYP2E1mRNA相对表达量分别为1.02±0.06、1.06±0.05、7.42±0.07,蛋白相对表达量分别为0.26±0.02、0.29±0.01、1.61±0.08,转染CYP2E1基因的HepG2细胞系与前两者比较,P均<0.05。结论通过慢病毒转染成功构建了稳定高表达CYP2E1基因的肝癌HepG2细胞系。
- 熊永福闫再华杨召李敬东
- 关键词：CYP2E1基因慢病毒载体肝癌HEPG2细胞
- CYP2E1在肥胖酒精协同增效性脂肪性肝炎中对促炎性巨噬细胞基因表达的影响的初探
- 目的 探讨CYP2E1在脂肪肝中对胰岛素抵抗通路的激活及促炎性巨噬细胞(M1型)基因表达的影响方法 通过慢病毒转染构建CYP2E1稳定高表达的巨噬细胞系(记为A系),用未转染的普通巨噬细胞系作为参照(记为B系),使用脂肪...
- 杨召李敬东
- 解剖性切除对≤5cm肝癌预后影响的Meta分析被引量：2
- 2012年
- 目的用Meta分析的方法，评价≤5cm肝癌解剖性与非解剖性切除对患者预后的影响。方法检索已公开发表的有关比较≤5cm肝癌解剖性与非解剖性切除对患者术后生存期影响的所有随访严密的临床研究，按纳入和排除标准筛选文献，并对符合条件的所有研究结果进行Meta分析，统计处理使用RevMan5．0软件。结果符合纳入标准的共4篇文献，总样本量776例，其中解剖性切除组484例，非解剖性切除组292例。纳入研究对象年龄53．4—63．0岁，男：女为3．56：1，87．1％患者术前肝功能为Child-PughA级，94．5％患者是单个肿瘤。对比两组间的1、3、5年无瘤生存率和总生存率，结果发现两种手术方式对患者预后影响无明显差别。但敏感性分析提示，肝癌解剖性切除能提高患者3年无瘤生存率（OR=0．72，95％CI：0．52～0．99，P=0．04）。结论≤5cm肝癌解剖性切除能提高患者3年无瘤生存率，但不能延长远期无瘤生存率和总生存率。但两种手术方式对肝癌预后的影响还需规范的、足够大样本的前瞻性随机对照研究来证实。
- 田云鸿李敬东赵国刚彭勇石刚徐威李德新李强
- 关键词：肝切除术预后META分析
- E6-AP基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中调节膜联蛋白A2的表达被引量：3
- 2016年
- 目的检测E6-AP基因及膜联蛋白A2(Annexin A2)在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达,探讨其对癌细胞增殖、凋亡及浸润转移的影响。方法设计1条无关序列Negative-siRNA作为阴性对照组和针对E6-AP基因的3条特异性E6-AP-siRNAs片段转染至MDA-MB-231细胞内作为实验组,未经处理细胞作为空白对照组,加入脂质体处理的细胞为脂质体组,利用RT-PCR检测干扰E6-AP后在MDA-MB-231细胞中E6-AP和Annexin A2 mRNA相对表达水平。选择出转染效率最高的E6-APsiRNA1组及阴性对照组、空白对照组继续行后续实验。Western blot检测干扰E6-AP后E6-AP和Annexin A2在MDA-MB-231细胞中的蛋白的相对表达水平。利用CCK-8试剂盒法、流式细胞术、Transwell小室侵袭实验分别检测干扰E6-AP后MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡、侵袭能力。基因的mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞数的组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD法,吸光度比较采用重复测量的方差分析。结果转染72 h后,E6-AP基因干扰后各实验组(E6-AP-siRNA1组、E6-AP-siRNA2组、E6-AP-siRNA3组)及空白对照组、阴性对照组及脂质体组中的E6-AP mRNA相对表达水平分别为0.159±0.003、0.325±0.006、0.229±0.007、0.593±0.031、0.594±0.012、0.612±0.016,Annexin A2 mRNA相对表达水平分别为0.929±0.017、1.013±0.082、0.992±0.024、1.341±0.037、1.323±0.010、1.326±0.012,差异均有统计学意义(F=850.792、417.447,P均<0.050)。转染72 h后,E6-AP-siRNA1组、空白对照组和阴性对照组中E6-AP及Annexin A2蛋白相对表达水平为分别为0.271±0.017、0.492±0.018、0.477±0.016及0.447±0.034、0.887±0.022、0.849±0.033,组间差异均有统计学意义(F=256.850、350.149,P均<0.050)。转染24、48、72、96 h后,E6-AP-siRNA1组、阴性对照组和空白对照组间比较,不同时间点之间比较,细胞吸光度差异均有统计学意义(F=524.828,P<0.001;F=904.079,P<0.001);分组与时间点存在交互作用(F=28.116,P<0.001)。转
- 侯令密谢少利陈茂山李敬东Emmanuel Ajedichiga Aduah王明浩邓世山幸天勇赵小波
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡肿瘤侵润
- 超声引导下经皮肝穿刺胆道引流术在治疗恶性梗阻性黄疸中的应用价值被引量：28
- 2017年
- 目的分析超声引导下经皮肝穿刺胆道引流术(ultrasound-guidedpercutaneous transhepaticcholangial drainage,USPTCD)在治疗恶性梗阻性黄疸中的临床应用价值。方法收集2016年1~9月我院行US-PTCD术的恶性梗阻性黄疸患者26例,计算穿刺成功率,记录并比较术前及术后丙氨酸转氨酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)及直接胆红素(DBIL)的变化情况。结果 26例患者中24例一次性穿刺成功,成功率约92.1%,2例患者第二次穿刺成功,整体穿刺成功率100%(26/26)。其中左路穿刺21例,右路穿刺5例,术后患者均无严重并发症出现,2例患者术后2~3周内因引流管堵塞,又进行了二次置管。PTCD术后两周复查肝功能,ALT、GGT、ALP、TBIL、DBIL较术前均显著下降,患者临床症状得到显著改善,治疗前后差异统计学意义(P<0.05)。结论 US-PTCD是一种简单有效、精准、安全性高的辅助治疗恶性梗阻性黄疸的有效方法,可以明显提高长期梗阻患者肝功能,改善全身症状,提高部分早期肿瘤患者的手术成功率,降低术后死亡率;可减轻晚期肿瘤患者痛苦,提高生活质量,延长生存期,值得临床推广。
- 周琳李敬东李强胡颖刘健
- 关键词：梗阻性黄疸超声
- 无肝硬化肝癌患者术后生存分析被引量：4
- 2011年
- 肝硬化是肝癌的独立危险因素之一，但有15％一20％的肝癌患者无肝硬化病史[1]。本研究回顾性分析1993年8月至2008年6月我科收治的104例无肝硬化肝癌患者的临床资料，旨在探讨影响这类患者预后的因素。
- 田云鸿李敬东彭勇李权林李德新李强
- 关键词：肝癌患者肝硬化术后独立危险因素
- 腹腔镜胆囊切除术治疗急性胆囊炎的手术时机选择及疗效分析被引量：51
- 2014年
- 目的 探讨急性胆囊炎（Acute cholecystitis,AC）行腹腔镜胆囊切除术（Laparoscopic cholecystectomy,LC）治疗的手术时机,并分析其疗效,为临床治疗AC提供最佳方案.方法 选择2012年7月～2013年7月在我院接受治疗的AC患者116例作为研究对象,根据患者接受手术的先后顺序进行分组,其中≤72h组58例,＞72h组58例,统计并对比两组患者的手术情况以及术后情况.结果 ≤72h组的手术用时、术后疼痛时长、肛门排气时长及住院时长均显著少于＞72h组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;≤72h组的术后备类并发症总发生率为13.79％（8/58例）,显著少于＞72h组的34.48％（20/58例）,差异有统计学意义（P＞0.05）.结论 对AC患者尽早实施LC手术可获得更好的预后疗效,临床上以≤72h实施LC手术为最佳手术时机,值得关注.
- 盛涛李敬东赵国刚
- 关键词：急性胆囊炎腹腔镜胆囊切除术手术时机疗效
- 罕见Schnelldorfer D型多囊肝合并多囊肾1例并文献复习
- 2023年
- 背景与目的:多囊肝(PLD)属一种罕见遗传性疾病,早期一般无特殊临床症状,随其病程进展可以导致肝肾功能衰竭。归纳PLD的病因、发病机制、临床特征,对指导PLD诊治有重要的临床参考价值。笔者报告1例Schnelldorfer D型PLD合并多囊肾(PKD)患者诊治过程,并结合文献对病例特点进行总结,以期加深对该病的认识。方法:回顾性分析川北医学院附属医院肝胆外科收治的1例PLD合并PKD患者的临床资料,总结PLD的病因、发病机制、临床特征,查阅国内外有关PLD的文献并加以整理分析。结果:患者为38岁女性,既往多次多胎妊娠史。磁共振成像(MRI)检查确诊为Schnelldorfer D型PLD合并PKD。目前认为囊肿形成原因是先天性胆管上皮过度扩增和分泌过多液体,女性、雌激素、多胎妊娠是该病进展的危险因素;计算机断层扫描(CT)和MRI影像学检查是PLD诊断和分型的主要手段;治疗方式有手术和药物治疗。患者诊断明确,因经济原因未住院继续治疗,予以保肝、对症处理。结论:PLD发病机制尚不明确,一般进展缓慢,大多数PLD患者早期无明显症状。女性、多次多胎妊娠及雌激素作用可能是其发生进展的重要危险因素。腹部彩超是首选检查方法,增强CT和增强MRI是进一步明确分型及鉴别诊断的检查方法。目前尚无相关权威指南或统一标准指导临床实践。笔者基于病例特征和文献报道总结的PLD诊疗流程可供临床医生日常工作参考,但其规范合理性有待进一步商榷。
- 王海林武国李敬东
- 关键词：囊肿多囊肾疾病
- 胰头癌肿瘤分期影响因素分析
- 2011年
- 目的探讨影响胰头癌(pancreatic head adenocarcinoma,PHA)肿瘤分期的临床因素。方法回顾性分析川北医学院附属医院2004年1月至2010年12月间经手术治疗的PHA临床资料。有序多分类Logistic回归模型行术后肿瘤TNM分期(post-operative TNM staging,pTNM)的单因素和多因素分析。交互验证检验多因素分析结果的判别效果。结果 121例PHA纳入本研究。术前影像学TNM分期为:肿瘤未明确28例(23.1%),IA9例(7.4%),IB45例(37.2%),IIA18例(14.9%),IIB15例(12.4%)和III6例(5.0%)。pTNM分别为IA2例(1.7%),IB7例(5.8%),IIA14例(11.6%),IIB6例(5.0%),III63例(52.1%),IV29例(24.0%)。肿瘤最大直径,术前影像学分期,ALT≥84.6U/L,中性粒细胞/淋巴细胞比值和CA19-9界值是pTNM的影响因素。多因素分析结果预测pTNM准确率为71.7%,交互验证准确率66.7%,若pTNM划分为IA+IB+IIA+IIB,III和IV三类,则预测准确率78.6%,交互验证准确率74.6%。结论影像学分期结合临床因素能够提高PHATNM分期准确度。
- 徐威李敬东赵国刚田云鸿
- 关键词：胰头癌肿瘤分期
- 转录因子YY1上调PD-L1表达促进胆囊癌免疫逃逸的作用研究被引量：3
- 2020年
- 目的研究转录因子阴阳1(Yin-Yang1,YY1)上调程序性死亡分子配体1(PD-L1)表达促进胆囊癌免疫逃逸的作用。方法采用免疫组化法检测胆囊癌组织、癌旁组织、正常胆囊组织中YY1蛋白表达水平,体外培养正常人胆囊上皮细胞系HGBEC和人胆囊癌细胞系GBC-SD、SGC-996、IH-GB1,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定各细胞中YY1水平;YY1 siRNA-1675转染GBC-SD细胞。实验分为BC组、YY1 siRNA NC组、YY1 siRNA-1675组。流式细胞仪测定PD-L1、CD69、CD25水平及人T淋巴细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素γ(IFN-γ)水平;PROMO网站预测YY1的潜在靶基因,行双荧光素酶报告实验验证。结果与正常组织相比,癌旁组织、胆囊癌组织中YY1阳性表达率显著升高(P<0.05),与癌旁组织相比,胆囊癌组织中YY1蛋白阳性表达率显著升高(P<0.05);与人胆囊上皮HGBEC细胞相比,人胆囊癌IH-GB1、SGC-996、GBC-SD细胞中YY1水平显著升高(P<0.05),其中GBC-SD细胞中YY1水平最高,因此后续实验以GBC-SD细胞进行。与BC组、YY1 siRNA-NC组相比,YY1 siRNA-1675组IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、CD69、CD25水平显著升高(P<0.05),YY1、PD-L1水平和人T淋巴细胞凋亡率明显降低(P<0.05);PROMO网站预测表明,PD-L1是YY1的靶基因,双荧光素酶报告实验证明PD-L1是YY1的作用靶点。结论下调YY1水平可靶向抑制PD-L1表达,可能通过此机制抑制胆囊癌免疫逃逸。
- 周杰李敬东权刚孙骥
- 关键词：胆囊癌免疫逃逸
