李洋
- 作品数：13 被引量：43H指数：5
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒介导ACE2过表达对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肝细胞的白蛋白表达及迁移能力的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨血管紧张素转换酶2(Angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)过表达对血管紧张素Ⅱ(Angiotensin II,AngⅡ)诱导的肝细胞白蛋白表达下调及细胞迁移性增强的抑制作用。方法常规培养大鼠肝细胞系BRL-3A细胞株,予以Ang II(10-7mol/L)进行刺激,观察不同处理时间(24、48 h)组肝细胞内白蛋白、波形蛋白(vimentin)表达及细胞迁移性的改变;通过构建lenti ACE2慢病毒载体,建立稳定过表达ACE2的细胞系,并分别用AngⅡ、A779进行干预,观察肝细胞内相应蛋白表达及其迁移性的改变。采用细胞免疫荧光、Western blot检测细胞中蛋白水平变化;Transwell迁移实验观察不同处理组细胞迁移能力的改变。结果 AngⅡ处理组肝细胞内vimentin表达显著增加、albumin表达减低,细胞迁移能力显著增强,并具有时间依赖效应。ACE2过表达大鼠肝细胞albumin表达明显升高,vimentin蛋白表达下降,该作用被MAS受体抑制剂A779阻断。同时ACE2过表达显著抑制AngⅡ的作用,vimentin合成显著下降,albumin表达水平显著升高,细胞迁移能力受到抑制。结论 ACE2过表达可抑制AngⅡ诱导的肝细胞albumin表达下调及迁移能力增强。
- 张莉莉张文雍李洋李旭
- 关键词：血管紧张素转换酶2ALBUMINVIMENTIN迁移肝细胞
- 醛固酮通过小窝蛋白介导的肝星状细胞NADPH氧化酶及炎症小体活化促进肝纤维化
- 马晓欣李洋李旭
- 血管紧张素（1—7）对胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用被引量：6
- 2013年
- 目的探讨血管紧张素（1-7）（Ang（1—7））对胆管结扎所致肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法将18只Wistar雄性大鼠随机分为假手术（SHAM）组，胆总管结扎（BDL）组和Ang（1—7）治疗组。假手术组：行开腹术再关腹，在腹腔埋注射泵，以25μg·kg-1·h-1。的速度持续注射等渗盐水；BDL组：开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型，同时在腹腔埋注射泵，以25μg·kg-1·h-2的速度持续注射等渗盐水；Ang（1—7）治疗组：BDL建立肝纤维化模型，同时在腹腔埋注射泵，以25μg·kg-1·h-1的速度持续注射Ang（1—7）。4周后宰杀动物，取肝组织，行苏木素一伊红染色，进行肝纤维化评分；Masson胶原染色，测定胶原的表达；利用免疫组织化学，免疫印迹（Westernblot），组织免疫荧光检测血管生成的标志：血管性血友病因子（vwF），血管内皮细胞生长因子A（vEGFA），血小板一内皮细胞黏附分子CD31的表达。根据资料不同采用One-wayANOVA检验、LSD法、Welch法、Durmett’s T3法、t检验或相关性分析。结果研究结果显示：在BDL组中，与SHAM组相比，肝纤维化评分（4．83±0．75对比0．00±0．00，Ｐ=0．000）、胶原面积（87．27±5．33对比0．98±0．11，P=0．000）、免疫组织化学检测vWF的表达（灰度值3．11±0．3对比1．00±0．07，Ｐ=0．000）、VEGFA的表达（灰度值8．38±1．64对比1．00±0．08，Ｐ=0．003）、CD31的表达（灰度值3．05±0．44对比1．00±0．12，P=0．000），Westernblot检测vWF的表达（灰度值0．380±0．008对比0．270±0．007，P=0．000）、VEGFA的表达（灰度值0．270±0．005对比0．120±0．002，P=0．007）、CD31的表达（灰度值0．350±0．008对比0．060±0。004，P=0．000）均明显增高，差异有统计学意义护值均〈0．01）；免疫荧光检测BDL组肝组织vWF、VEGFA、CD31阳性表达细胞较SHAM组明显
- 宁佐伟张文雍李洋蔡双明张莉莉李旭
- 关键词：血管性血友病因子CD31
- 脑摄取平衡时丙泊酚对犬脑不同区域GAT-1 mRNA和GAD65 mRNA的影响被引量：1
- 2012年
- 目的 探讨不同剂量丙泊酚恒速静注50 min时对犬脑不同区域γ-氨基丁酸浆膜转运体1（GAT-1）及谷氨酸脱羧酶65（GAD65）mRNA的影响。方法 18只12-18月健康杂种犬，雌雄不限，体质量10-12 kg，随机分为对照组（C组）、低剂量组（L组）和高剂量组（H组），每组6只。L组和H组分别以丙泊酚5.5 mg/kg和7.0 mg/kg静脉注射，续以55 mg/（kg.h）和70 mg/（ kg.h）恒速静脉输注50 min，分别取颈内动、静脉血各2 ml后，快速静脉注射10% KCl注射液2 mg/kg处死；采用高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）测动、静脉血浆丙泊酚浓度。C组不给予任何干预措施，快速静脉注射10% KCl注射液2 mg/kg处死。3组均解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶、额叶组织，采用实时荧光定量PCR技术测脑组织中GAT-1 mRNA和GAD65 mRNA的表达水平。结果 丙泊酚静脉输注50 min时，L组和H组丙泊酚血浆浓度（动脉-动脉，静脉-静脉比较）差异显著（P〈0.01），而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。L组和H组下丘脑和海马GAT-1 mRNA的相对表达量均明显高于C组（P〈0.05, P〈0.01），两组之间差异无统计学意义（P〉0.05）；其他脑区GAT-1 mRNA的相对表达量3组均无显著差异。下丘脑和海马GAT-1 mRNA相对表达量的变化率，L组分别为（61.26±7.17）%和（79.34±39.95）%，差异无统计学意义（P〉0.05）；H组分别为（74.64±19.63）%和（97.12±32.31）%，差异无统计学意义（P〉0.05）。背侧丘脑GAD65 mRNA 的相对表达量，L组和H组均明显高于C组（P〈0.01）；其他脑区GAD65 mRNA的相对表达量3组均无显著差异。结论 丙泊酚恒速静注50 min，犬脑对丙泊酚的摄取处于平衡状态，此时，丙泊酚可明显上调下丘脑和海马GAT-1 mRNA以及背侧丘脑GAD65 mRNA的表达，呈非剂量依赖性。
- 杨晶晶林春水古妙宁李洋刘亚伟范钦陈莺
- 关键词：丙泊酚
- 脑摄取平衡时丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2mRNA的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)mRNA表达的影响。方法:18只健康杂种犬,雌雄不限,12～18个月,体重10～12kg,随机分为对照组(C组)、低剂量组(L组)和高剂量组(H组),每组6只。L组15s内静脉注入丙泊酚5.5mg/kg诱导,55mg/(kg.h)恒速静注维持;H组15s内注入丙泊酚7.0mg/kg诱导,70mg/(kg.h)恒速静注维持。静注50min时取颈内动、静脉血各2mL后静注10%KCl注射液2mg/kg处死L组和H组动物。采用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)检测动、静脉血浆丙泊酚浓度。C组不给予任何干预措施,快速静注10%KCl2mg/kg处死。3组均于无菌条件下解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶以及额叶组织,qRT-PCR方法检测脑组织EAAT2 mRNA的表达水平。结果:丙泊酚静注50min时,L组和H组丙泊酚血浆浓度(动脉-动脉,静脉-静脉比较)差异显著(P<0.01),而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的相对表达量,在L组和H组均较C组明显升高,差异显著(P<0.05);L组和H组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。背侧丘脑等其他脑区EAAT2 mRNA的相对表达量3组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:丙泊酚恒速静注50min,犬脑摄取达到平衡状态;此时丙泊酚可显著上调下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的表达,但不同剂量对其表达的影响差异无显著性。
- 李洋林春水古妙宁杨晶晶范钦陈莺
- 关键词：二异丙酚静脉麻醉
- 氯沙坦降低小鼠呼吸机相关性肺损伤及抑制肺组织内小窝蛋白-1及NOX_4的表达被引量：1
- 2015年
- 目的利用呼吸机过度通气建立小鼠机械性肺损伤模型,以血管紧张素II受体抑制剂氯沙坦进行干预,探讨氯沙坦对机械通气性肺损伤小鼠肺内小窝蛋白-1及氧化应激相关蛋白的调节。方法 36只雄性C57小鼠随机分为对照组、机械通气组、单纯药物对照组和治疗组,建模完成后分别检测各组小鼠急性肺损伤情况以及相关蛋白的表达和相互作用。结果机械通气组小鼠肺损伤Smith评分3.3,明显高于对照组(0.4)和单纯药物对照组(0.3),治疗组Smith评分2.3,较机械通气组明显降低(P<0.05);机械通气组小鼠肺组织内小窝蛋白-1和NOX4蛋白表达明显高于对照组及单纯药物对照组(P<0.05),荧光共染可见小窝蛋白-1及NOX4发生荧光重合,治疗组小鼠肺组织内上述蛋白表达较机械通气组明显降低(P<0.05),荧光共染提示小窝蛋白-1及NOX4荧光重合区域较机械通气组减少。结论在机械通气诱导的小鼠急性肺损伤模型中,氯沙坦可缓解机械通气诱导的肺损伤并抑制小窝蛋白-1及NOX4的表达及相互趋近作用。
- 凌旭光娄安妮李洋杨仁强宁佐伟李旭
- 关键词：氯沙坦小窝蛋白-1机械通气急性肺损伤
- 脂多糖通过NOD样受体蛋白3炎症小体通路诱导大鼠急性肝损伤实验研究被引量：7
- 2021年
- 目的:探讨脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肝损伤的机制。方法:对SD大鼠腹腔注射10 mg/kg LPS 24 h后,比较对照组(3只)与LPS组(3只)大鼠外周血转氨酶水平;取肝组织制片后HE染色观察两组大鼠肝组织有无损伤;免疫组化检测两组大鼠肝组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)与凋亡相关微粒蛋白(ASC)表达情况。另取健康SD大鼠分离肝细胞进行原代培养,设空白对照组、L-LPS组和H-LPS组,分别在含0、100、1000 ng/ml LPS的培养基中培养24 h,测定各组细胞增殖与凋亡情况,并采用PCR与Western blot测定各组细胞NLRP3、ASC及白介素-1β(IL-1β)mRNA及蛋白表达情况。结果:LPS组大鼠注射LPS 24 h后,血液转氨酶水平较对照组明显升高(均P<0.05);肝组织HE染色显示LPS刺激可导致大鼠急性肝细胞损伤;肝组织免疫组化染色结果显示NLRP3、ASC蛋白表达阳性。各组肝原代细胞受到LPS刺激后,增殖率均有所降低,凋亡率均有所升高,且H-LPS组细胞增殖率低于L-LPS组,细胞凋亡率高于L-LPS组(均P<0.05);各组肝原代细胞NLRP3、ASC、IL-1βmRNA与蛋白表达量均明显增加,且H-LPS组均高于L-LPS组(均P<0.05)。结论:LPS刺激会造成大鼠急性肝损伤,其机制可能与上调肝组织中NLRP3炎症小体通路有关。
- 黄珊宁佐伟王国正李洋罗晓英金思一
- 关键词：脂多糖SD大鼠NOD样受体急性肝损伤
- 螺内酯对肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用被引量：5
- 2012年
- 目的探讨螺内酯对肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用。方法雄性Wistar大鼠24只,随机分为3组,每组8只大鼠。分组如下:假手术组(Sham组);胆总管结扎组(BDL组),予行胆总管结扎术;螺内酯治疗组(BDL+SP组),于手术后第2天给予螺内酯20 mg/kg灌胃处理,1次/d。于4周后取材。Masson三色染色检测胶原和大鼠的肝组织学改变。运用实时荧光定量聚合酶链反应(Real time-qPCR)检测各组血管内皮生长因子A(VEGF-A)mRNA的表达。运用免疫组织化学技术检测各组血管性假血友病因子(vWF)的表达。结果 BDL+SP组纤维化程度较BDL组低[(2.84±0.44)vs(19.73±3.54),P=0.00],差异有统计学意义;免疫组织化学结果显示:BDL组vWF表达较Sham组增高[(3.08±0.17)vs(0.98±0.11),P=0.00],BDL+SP组较BDL组表达下降[(1.15±0.09)vs(3.08±0.17),P=0.00],差异有统计学意义;在BDL组VEGF-A mRNA的表达增加,BDL+SP组则表达下降[(0.71±0.12)vs(1.75±0.15),P=0.00],差异有统计学意义;且各分组中VEGF-A mRNA的表达与vWF表达呈现显著正相关关系(r=0.890,P=0.000)。结论螺内酯通过抑制肝脏VEGF-AmRNA的表达抑制肝窦毛细血管生成。
- 李旭蔡双明宁佐伟李洋张文雍张莉莉
- 关键词：螺内酯肝纤维化血管内皮生长因子
- 醛固酮可通过NLRP3炎症小体诱导小鼠肝星状细胞活化和肝纤维化被引量：7
- 2020年
- 【据《J Gastroenterol Hepatol》2020年6月报道】题:醛固酮通过NLRP3炎症小体诱导小鼠肝星状细胞活化和肝纤维化(作者Li Y等)已有证据表明,醛固酮和NLRP3炎症小体是诱导肝星状细胞活化以及肝纤维化的重要因素。然而,醛固酮与NLRP3炎症小体在肝星状细胞激活以及肝纤维化过程中是否存在相互作用,目前尚不清楚。该研究旨在探讨醛固酮与NLRP3炎症小体在调控肝星状细胞活化以及肝纤维化形成过程中的相互作用关系。
- LI YZHANG YJCHEN TT李洋李旭
- 关键词：肝星状细胞活化醛固酮肝星状细胞激活小鼠
- Alamandine对肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用被引量：1
- 2020年
- 目的探讨Alamandine对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用及相应的分子机制。方法选取18只Wistar雄性大鼠,随机分为对照(Contorl)组、CCL4组和CCL4+Alamandine组。对照组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射橄榄油,每两周注射一次;CCL4组Wistar雄性大鼠腹腔内以2 ml/kg的剂量注射浓度为40%溶于橄榄油的CCL4,每两周注射一次;CCL4+Alamandine组:CCL4制作肝纤维化模型,在腹腔埋入注射泵并以25μg·kg^-1·h^-1的速度持续注射Alamandine。4周后处死大鼠,取肝组织,行HE染色,进行肝纤维化评分;Masson胶原染色,测定胶原的表达;通过免疫组织化学染色、免疫印迹(Western blot)、组织免疫荧光染色检测血管生成的指标:血管性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),血管内皮细胞生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)。结果与Contorl组相比,CCL4组肝纤维化评分,胶原面积,免疫组织化学检测vWF、VEGFA的表达,Western blot检测vWF、VEGFA的表达均明显增高(P均<0.01);免疫荧光检测CCL4组肝组织vWF、VEGFA阳性表达细胞较Contorl组明显增多。与CCL4组相比,CCL4+Alamandine组肝纤维化评分,胶原面积,免疫组织化学检测vWF的表达、VEGFA的表达,Western blot检测vWF的表达、VEGFA的表达均显著下降(P均<0.05);免疫荧光检测CCL4+Alamandine组vWF、VEGFA阳性表达的细胞较CCL4组明显减少。结论Alamandine可抑制肝纤维化大鼠肝窦血管生成。
- 宁佐伟李秀梅王亚东李洋
- 关键词：肝纤维化血管性血友病因子
