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蛋白4.1家族在小鼠黑色素瘤细胞中的表达及其对细胞增殖的影响: 2016年; 目的筛选小鼠黑色素瘤细胞中蛋白4.1家族的表达,探讨蛋白4.1对小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响。方法以MEF、B16、B16-F10细胞基因组RNA和总蛋白为模板,经PCR法和Western blot筛选蛋白4.1在小鼠黑色素瘤细胞中的表达;通过分子克隆构建真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3并转染黑色素瘤细胞;检测表达蛋白4.1B后B16、B16-F10细胞增殖的变化。结果蛋白4.1B在黑色素瘤细胞中表达缺失;通过转染成功构建的真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3发现,表达蛋白4.1B的黑色素瘤细胞的增殖作用被显著性抑制。结论通过真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3转染表达蛋白4.1B可显著抑制B16和B16-F10黑色素瘤细胞的增殖。; 门颖丽康巧珍丁聪刘诗梦江慧王晓东汲振余刘鑫王婷; 关键词：黑色素瘤细胞真核表达抑制增殖

MBP在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用被引量：1: 2016年; 目的：探讨大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用及可能机制。方法：将12只6～8周龄的BALB/c小鼠皮下注射2×10^6个H22细胞,建立荷瘤模型,荷瘤后第2天将小鼠分为PBS组和MBP组,每组6只,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行干预,期间监测肿瘤体积和小鼠体重变化,测量肿瘤和各脏器质量,ELISA法检测脾细胞分泌IL-12和IFN-γ的水平,Real-time PCR检测肿瘤组织中IFN-γ和IL-17A mRNA的相对表达量。结果：MBP能抑制肿瘤的生长（P〈0.05）。与PBS组相比,MBP组小鼠脾细胞中IL-12、IFN-γ分泌量上升,肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达量上升,IL-17A mRNA的表达量下降（P〈0.05）。结论：MBP能够有效抑制肝癌H22肿瘤生长,其作用可能是通过激活Th1型免疫反应和抑制Th17型免疫反应。; 门颖丽康巧珍王小龙杜明宣黄夏冰张亚萌汲振余王婷刘鑫; 关键词：麦芽糖结合蛋白 TH1 TH17

兔抗鼠IL-12p35多克隆抗体的制备及应用: 2017年; 利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估抗体效价,Western blot检测抗体特异性。LPS刺激小鼠脾细胞,ELISA法检测IL-12抗体阻断后细胞培养上清中的IFN-γ的分泌量。结果:成功构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,并获得重组融合蛋白GST-IL-12p35(约48kDa)。抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体,ELISA法测得IL-12p35多克隆抗体效价为1256 000,Western blot证实制备的多克隆抗体能够识别结合重组蛋白。IL-12p35多克隆抗体能够有效地抑制LPS诱导的脾细胞IFN-γ的表达。; 门颖丽康巧珍王小龙江慧刘诗梦汲振余王婷刘鑫; 关键词：LPS IFN-Γ

HP-NAP对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用被引量：1: 2016年; 目的:研究幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长抑制作用及可能机制。方法:构建p ET28a-NAP重组质粒,转入E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导HP-NAP的表达,Ni柱亲和层析法对其进行分离纯化。取BALB/c小鼠,皮下注射H22细胞(2×106个/只)构建荷瘤模型,随机分为PBS组和HP-NAP组,以皮下瘤旁注射的方式给予PBS或HP-NAP,监测肿瘤体积和小鼠体重变化。1周后牺牲小鼠,取瘤体及各脏器称重,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ分泌水平,实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达水平。结果:利用大肠杆菌原核表达系统成功制备了HP-NAP。HP-NAP可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,对小鼠体重和脏器指数无明显影响。与PBS组相比,HP-NAP组小鼠脾细胞IFN-γ的分泌水平及肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达水平均升高(P<0.05)。结论:HP-NAP可能通过上调IFN-γ的表达抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。; 王晓东康巧珍王小龙李树芳王婷刘鑫汲振余; 关键词：肝癌 H22细胞 IFN-Γ 小鼠

兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体的制备和鉴定被引量：2: 2016年; 目的制备兔抗小鼠白细胞介素23p19(IL-23p19)多克隆抗体。方法利用分子克隆技术构建重组表达质粒p ET-16b-IL-23p19,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE及Western blot法分析鉴定蛋白,镍柱亲和层析纯化制备蛋白;以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大白兔,获得抗血清,并利用亲和层析法纯化抗血清,制备兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体;采用ELISA检测抗体效价;Western blot法检测抗体特异性。结果重组表达载体p ET-16b-IL-23p19构建正确且IL-23p19蛋白能够在大肠杆菌BL21(DE3)中有效表达。通过多次IL-23p19蛋白免疫新西兰大白兔,成功制备兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体。ELISA检测确定新西兰大白兔血清效价达1∶256 000,Western blot法证实兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体能特异性识别小鼠IL-23p19蛋白。结论成功制备了兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗体,抗体具有高的效价和较好的特异性。; 门颖丽王小龙丁聪王晓东汲振余王婷康巧珍刘鑫; 关键词：原核表达蛋白纯化抗体制备

细胞与分子免疫学全英混合式教学模式的探索被引量：2: 2016年; 细胞与分子免疫学是面向生物学及医学专业的一门重要的专业基础课,又是多学科交叉发展最为迅速的前沿科研领域之一。以郑州大学全英免疫学课程教学模式探索与实践为例,就师资建设、教材选定、教学方式及考核方式等方面进行探讨,多角度全面地探索了全英混合式教学的模式。丰富的课堂教学内容和考核评价体系,不仅激发了学生对免疫学课程学习的兴趣,也有效地培养了他们的科研素养和综合能力。卓有特色的全英混合式教学模式提高了教学质量,取得了良好的教学效果,已成为国际化人才培养的重要途径之一。; 王婷陈鲤翔康巧珍刘鑫祁元明; 关键词：混合式教学研究性教学改革

优化高校课堂教学效果初探被引量：1: 2014年; 高等学校课堂教学是高等学校教学的主要组织形式,是保障高等学校其它教学方式取得成功的基础。要取得好的高等学校课堂教学效果,需要高校教育工作者不断探索和总结。从课堂设计、现代教育技术应用以及课堂教学语言的使用等角度进行了分析和探讨,以促进高等学校课堂教学效果的进一步提升。; 刘鑫康巧珍王婷; 关键词：课堂教学效果课堂设计课堂语言

白细胞介素27抗肿瘤作用的研究进展被引量：2: 2016年; 白细胞介素27(IL-27)是IL-6/IL-12家族的一种异源二聚体细胞因子。IL-27能够通过促进CD4^+T细胞向Th1细胞分化,抑制Th2细胞、Th17细胞分化,增强细胞毒性T细胞效应,发挥抗肿瘤作用。IL-27能够调节抗血管生成相关蛋白和趋化因子的表达,从而抑制肿瘤相关血管的生成。此外,IL-27还能通过抑制上皮-间质转化等过程从多个方面参与抗肿瘤作用。因此,IL-27作为抗肿瘤细胞因子已受到越来越多的关注,成为肿瘤免疫治疗中的热点,本文总结了IL-27在抗肿瘤以及抗转移方面的研究进展。; 杜明宣康巧珍王婷; 关键词：TH1细胞免疫调节血管生成

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王婷