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王建瑛

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：暨南大学生命科学技术学院生命与健康工程研究院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇原核
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇GSK3Β
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇暨南大学

作者

  • 1篇王建瑛
  • 1篇刘小会
  • 1篇刘朗夏
  • 1篇高玲梅
  • 1篇高学娟

传媒

  • 1篇南京医科大学...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
GSK3β及其显性负突变体的原核表达与纯化
2011年
目的:构建原核表达GST-GSK3β1、GST-GSK3β2及其显性负突变体(dominant-negative mutant)GST-GSK3β1 K85M的重组质粒,并进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定。方法:利用PCR扩增和基因重组技术,以含有人源目的片段的质粒Flag-GSK3β1、YFP-GSK3β2及Flag-GSK3β1 K85M为模板,扩增出相应的目的基因片段,并将其插入具有GST标签的原核表达载体pGEX-6P-1中,构建GST融合蛋白表达质粒。通过对GST-GSK3β1、GST-GSK3β2和GST-GSK3β1 K85M融合蛋白进行诱导表达、温和法裂解以及纯化实验,确立有效的表达和纯化方法。最后应用Western blot方法鉴定纯化的融合蛋白。结果:成功构建GST-GSK3β及其显性负突变体质粒,并通过诱导表达和纯化得到目的蛋白。结论:GST-GSK3β1、GST-GSK3β2及GST-GSK3β1K85M显性负突变体质粒的成功构建及目的蛋白的表达与纯化,为更深入地研究GSK3β蛋白的生物学功能奠定基础。
王建瑛高玲梅刘小会高学娟刘朗夏
关键词：融合蛋白纯化
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共1页<1>
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