蔡佳翌
- 作品数：18 被引量：32H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- Notch1高表达急性T淋巴细胞白血病发病中细胞增殖的相关机制被引量：2
- 2018年
- 目的探讨Notch1高表达急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）发病中，细胞增殖的相关机制及靶向药物干预效价。
方法选择Notch1高表达的T-ALL细胞株（A3、MOLT-4、Jurkat细胞株）和来源于20例健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）为研究对象。采用不同浓度（0、50、100 nmol/L）的细胞周期抑制剂palbociclib处理T-ALL细胞株与PBMC，采用CCK-8法检测其细胞增殖状态，计算不同浓度palbociclib处理时的半数抑制浓度（IC50）值，细胞涂片观察细胞形态，并且采用流式细胞术分析T-ALL细胞株与PBMC的细胞周期变化，实时荧光定量（RT）-PCR检测相关基因mRNA的相对表达水平。采用t检验比较不同浓度palbociclib处理后T-ALL细胞株与PBMC相关基因mRNA的相对表达水平等呈正态分布计量指标。结果①A3、MOLT-4细胞株Notch1基因表达的灰度值百分比，分别为（62.3±3.40）%、（77.6±4.71）%，显著高于PBMC的（20.8±1.53）%，并且差异均有统计学意义（t=6.236、10.034，P=0.025、0.008）；Jurkat细胞Notch1基因表达的灰度值百分比为（28.5±1.36）%，与PBMC比较，差异无统计学意义（t=1.257，P=0.430）。②相较于PBMC，MOLT-4细胞株增殖活性被palbocicib显著抑制，其次为A3细胞株，并且3种细胞增殖活性抑制呈明显时间和浓度依赖。经palbocicib处理48 h后，A3及MOLT-4细胞株的IC50值分别为（0.43±0.12）μmol/L和（0.10±0.06）μmol/L，显著低于PBMC的（0.83±0.15）μmol/L，前二者分别与后者相比，差异均有统计学意义（t=12.354、7.486，P=0.006、0.015）。③细胞形态结果显示，相较于PBMC，经palbocicib 100 nmol/L处理后，A3和MOLT-4细胞株的细胞增殖受到明显抑制，细胞分散，簇状增殖现象消失。④细胞周期检测结果显示，经palbocicib 50 nmol/L处理时S＋G2期A3、MOLT-4细胞株的细胞比例较palbocicib 0 nmol/L处理时显著降低，并且差异均有统计学意义（t=5.358�
- 李香沈莉菁陈芳源高晓钟华蔡佳翌张义炜朱迪
- 关键词：急性病细胞增殖
- 三氧化二砷对白血病细胞EVI-1基因作用的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对白血病细胞中EVI-1基因的作用。方法:采用1μmol/L的As2O3处理1例高表达EVI-1基因的急性单核细胞白血病患者的原代细胞,并用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞的EVI-1 mRNA表达率;同时采用RT-PCR检测人白血病细胞株K562、HL-60、U937和THP-1中EVI-1 mRNA基因的相对表达量。选取EVI-1 mRNA表达量最高的THP-1细胞株作为研究对象,经多位点PCR测序确认其包含EVI-1基因全长片段后,分别以1、3、5μmol/L的As2O3处理THP-1细胞株,观察细胞形态变化,CCK8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测EVI-1 mRNA表达率,蛋白质印迹法检测细胞内EVI-1蛋白的表达情况。结果:As2O3能下调原代细胞中EVI-1 mRNA,抑制THP-1细胞株增殖、诱导其凋亡,且呈剂量、时间依赖性;As2O3能下调THP-1细胞株EVI-1 mRNA、EVI-1蛋白的表达。结论:As2O3通过抑制白血病细胞EVI-1 mRNA、EVI-1蛋白的表达,从而促进其凋亡。
- 周凌云陈芳源沈莉菁万海霞钟济华蔡佳翌
- 关键词：三氧化二砷凋亡
- HAG方案促白血病细胞株凋亡的机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨HAG方案对白血病细胞株HL．60和U937的体外作用效果及机制，为临床急性白血病治疗提供指导。方法以HL-60及U937为实验模型，体外分为单药组，阿糖胞苷联合高三尖杉酯碱组（HA）和以粒细胞集落刺激因子（G-CSF）为预激的HAG三药组，分别作用24、48h后收集细胞，进行细胞计数、细胞形态观察，CCK-8法检测不同药物的组合对两种细胞株的生长抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡标志AnnexinV和PI、细胞分化抗原cD11b、线粒体膜电位JC-1及Caspase．3。结果G．CSF预激24h后，S期细胞明显增多（P〈0．05）。经HAG作用48h后，HL-60和U937细胞数量明显减少，形态观察显示凋亡小体增多，早期凋亡标志AnnexinV明显增高，三药联合组与单药组及两药联合组比较差异有统计学意义（P〈0．05），且对U937细胞株凋亡作用优于HL-60细胞株。CD11b在三组间表达差异无统计学意义（P〉0．05）。药物作用后HL-60和U937线粒体膜电位崩塌的细胞比例增加，三药组显著高于单药组及对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；药物作用后Caspase．3被激活，三药组及单药组与对照组相比，Caspase．3的荧光强度显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HAG的体外研究证实该方案主要通过降低线粒体膜电位途径从而起到诱导肿瘤细胞凋亡的作用。
- 蔡佳翌陈芳源钟济华钟华王海嵘
- 关键词：预激方案细胞凋亡凋亡途径
- 黄酮联合阿霉素协同诱导HL60/ADR细胞凋亡机制的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探究黄酮在体外对多药耐药细胞系HL60/ADR的影响及联合阿霉素后对细胞生长抑制和凋亡的作用机制,探讨中药在白血病化疗中扶正、增效的可能性。方法:用CCK-8法检测黄酮和阿霉素对HL60/ADR细胞生长的抑制作用;用流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡率,并在光镜下观察细胞形态变化;蛋白印迹法检测药物作用后凋亡信号通路蛋白表达的情况;流式细胞仪检测药物作用后HL60/ADR线粒体跨膜电位的变化。结果:黄酮能显著抑制HL60/ADR细胞的增殖,且其抑制细胞增殖效应呈现浓度-时间依赖性;不同浓度的黄酮及联合阿霉素1.5μg/mL(20%抑制浓度即IC20值)后对细胞的抑制作用更明显,具有协同和相加作用。75μg/mL和100μg/mL黄酮能促进HL60/ADR细胞凋亡,而黄酮联合阿霉素的促凋亡作用更显著。蛋白信号通路研究显示,单药黄酮及两药联合能使HL60/ADR细胞线粒体膜电位下降,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL表达明显下调,促凋亡蛋白Bim、Bad、Bax明显增加,激活caspase途径;同时磷酸化的P-JNK蛋白表达水平升高,而P-ERK明显下降。结论:黄酮联合阿霉素可通过线粒体跨膜电位的下降,依赖caspase活化调控Bcl-2家族中Bim、Bad和Bax蛋白表达,下调ERK细胞保护通路并上调JNK应激相关通路,最终协同抑制HL60/ADR细胞增殖并诱导其凋亡。
- 陈芳源张旻玥蔡佳翌沈莉菁钟济华曹兰芳
- 关键词：黄酮阿霉素凋亡HL60
- CAG方案治疗急性髓系白血病中miR-146a的表达变化及其预后分析
- 李昕蔡佳翌盛贤福肖菲朱坚轶刘佳陈芳源钟华
- 异常剪接组织因子在急性髓系白血病细胞株中的表达研究被引量：3
- 2011年
- 急性白血病的出凝血异常和组织因子(tissue factor,TF)的高表达有关。循环血流中的TF主要表达于细胞、微粒(microparticle,MP)和异常剪接TF(alternatively spliced human tissue factor,asHTF)中。为探究asHTF在急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)出凝血异常中的作用,本研究选用了6种常见的AML细胞株NB4、HL-60、Kasumi-1、U937、K562和THP-1,在RNA水平进行了RT-PCR检测。结果发现,在6种细胞株中仅NB4、U937细胞存在全长TF和asHTF的RNA水平基线表达并经测序验证,对上述2种细胞在蛋白质水平进行了流式细胞仪及TF活性、抗原检测发现,asHTF仅有极少量TF抗原表达且基本无TF活性,而MP相关TF(microparticle associated tissue factor,MP-TF)的抗原和活性显著高于asHTF。结论:在NB4、U937细胞中asHTF基本无促凝作用,而MP-TF有凝血活性且在肿瘤细胞释放TF中占主导地位。
- 方怡蔡佳翌钟济华钟华王海嵘陈芳源
- 关键词：急性髓系白血病微粒
- 低剂量地西他滨对免疫性血小板减少症患者来源的骨髓间充质干细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2022年
- 目的·研究低剂量地西他滨对原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)患者来源的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法·纳入2020年4月—2021年10月上海交通大学医学院附属仁济医院血液科门诊或住院的ITP发病期患者10例,以及10例无骨髓异常的非ITP患者作为对照(normal control,NC),收集骨髓穿刺标本,分离MSC,流式细胞术检测其表面抗原标志物。使用CCK-8试剂盒和EdU细胞增殖检测试剂盒检测及比较ITP患者来源(MSC-ITP)和对照组来源(MSC-NC)的MSC增殖水平差异,并使用微管荧光探针检测细胞形态的变化。使用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况,采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒检测细胞凋亡水平。通过不同浓度的地西他滨以不同的时长处理MSC-ITP,探索地西他滨促其增殖的最佳浓度及处理时间。以最佳浓度的地西他滨处理MSC-ITP,观察其对细胞凋亡水平的影响。Western blotting检测细胞凋亡相关通路蛋白的表达,以及地西他滨的影响。结果·与MSC-NC相比,MSC-ITP细胞形态异常,细胞核碎裂、皱缩较多,体外增殖水平减弱,基础凋亡率增加。地西他滨刺激MSC-ITP增殖的最佳工作浓度为2.5μmol/L,最佳处理时间为24 h。2.5μmol/L地西他滨处理MSCITP 24 h后细胞核形态得到改善,细胞核的碎裂和凝聚减少,凋亡率显著降低(P<0.05)。Western blotting结果表明,地西他滨处理后,MSC-ITP中线粒体凋亡通路相关蛋白BAX降低,胱天蛋白酶(caspase3)和cleaved-caspase3减少(均P<0.05)。结论·ITP患者骨髓来源的MSC形态异常,体外增殖水平减弱,基础凋亡率增加;低剂量地西他滨可以促进该细胞增殖,抑制其凋亡;该作用可能是通过线粒体凋亡途径介导的。
- 王昕芃王君颖蔡佳翌付婉彬钟华
- 关键词：免疫性血小板减少症骨髓间充质干细胞地西他滨细胞凋亡
- Kindlin与肿瘤细胞增殖关系的研究进展被引量：1
- 2015年
- Kindlin是一族新发现的黏着斑蛋白。目前,已在哺乳动物中发现该蛋白家族有3个成员,包括Kindlin-1、Kindlin-2和Kindlin-3[1]。不同的Kindlin家族成员在进化上具有高度的同源性和保守性,参与了多种重要的细胞生理过程,如细胞迁移、增殖和分化的调控。Kindlin家族成员的异常与多种肿瘤的发生、发展及遗传性疾病密切相关。
- 郎雯竞蔡佳翌陈芳源
- 关键词：肿瘤细胞增殖
- DCK基因多态性与阿糖胞苷治疗急性髓系白血病疗效的关系
- 2010年
- 目的研究脱氧胞苷激酶（DCK）的单核苷酸多态性（SNP）及其对阿糖胞苷（Ara-C）治疗急性髓系白血病（AML）疗效的影响。方法采用高温连接酶检测反应技术,检测126例接受Ara-C治疗的AML患者（AML组）和100名健康人（正常对照组）DCK基因7个SNP位点（SNP1~7）的基因型和等位基因分布频率,比较DCK不同基因型分布AML组患者的Ara-C治疗效果。结果 DCK基因SNP1（rs2306744）等位基因和SNP2（rs12648166）基因型分布频率,在正常对照组与AML组和Ara-C治疗无效组（n=35）之间比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。在AML组,SNP1的CC型基因型和SNP2的多态性基因型（AG＋GG型）以及SNP3（rs4694362）的野生型基因型,对Ara-C治疗表现出较好的临床反应。结论 DCK基因的SNP能作为潜在的Ara-C治疗AML患者预后的分子标志之一。
- 杨冠群陈芳源万海霞钟华王海嵘钟济华蔡佳翌欧阳仁荣
- 关键词：急性髓系白血病阿糖胞苷脱氧胞苷激酶单核苷酸多态性
- 预激方案和标准方案治疗初治急性髓系白血病的临床观察被引量：2
- 2017年
- 目的:比较预激方案与标准化学治疗(化疗)方案治疗初治急性髓系白血病(AML)的疗效、不良反应和生存情况。方法:回顾性分析175例可随访的初治AML患者,分成预激方案组(n=60)和标准方案组(n=115),标准方案组采用IA(去甲氧柔红霉素、阿糖胞苷)或DA(柔红霉素、阿糖胞苷),预激方案组采用CAG(阿克拉霉素、阿糖胞苷和粒细胞集落刺激因子)或IAG(去甲氧柔红霉素、阿糖胞苷和粒细胞集落刺激因子)诱导治疗,2组患者均为一疗程缓解,同方案巩固2个疗程,或2个疗程缓解,同方案巩固一疗程,随后进入巩固维持治疗阶段。结果:预激方案组与标准方案组在完全缓解率、无病生存率和总生存率方面差异无统计学意义(均P>0.05),但预激方案组患者化疗后骨髓恢复时间、感染发生率及单采血小板的输注量均低于标准方案组患者(均P<0.05)。结论:预激方案在治疗初治AML的临床疗效和患者生存情况与标准方案相类似,但骨髓抑制及感染发生等不良反应较标准方案轻微,故可作为初治AML患者诱导治疗的可选方案之一。
- 朱坚轶路莎莎陈芳源蔡佳翌韩晓凤黄洪晖钟华钟璐
- 关键词：预激方案急性髓系白血病初治
