费恩阁
- 作品数：14 被引量：92H指数：6
- 供职机构：解放军军需大学动物科技系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 人白细胞介素6逆转录病毒表达载体的构建被引量：1
- 1994年
- 实验以ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｌｌｋｓ质粒为载体，构建了人白细胞介素６次级克隆ｐＢＩＬ－６。用限制性内切ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＶ消化ｐＢＩＬ－６，分离并回收了ＩＬ－６ｃＤＮＡ片段，并在其平未端加入了ＢａｍＨＩ接头。实验将带有ＢａｍＨＩ粘性末端的ＩＬ－６全基因片段插入到了逆转录病毒载体ｐＺＬＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１的ＢａｍＨＩ位点上，构建了重组质粒ｐＺＬＰＩＬ－６。经对重组予ＤＮＡ的琼脂糖凝胶电泳、限制住内切酶分析和核酸杂交鉴定，筛选出了含有ＩＬ－６ｃＤＮＡ片段及插入方向正确的ｐＺＬＰＩＬ－６。
- 黎诚耀费恩阁王世若韩文瑜高荣凯
- 关键词：白细胞介素6病毒载体基因
- 伪狂犬病病毒闽A株gE主要抗原表位基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：1
- 2002年
- 根据伪狂犬病病毒 Rise毒株 g E基因序列 ,设计合成 1对引物 ,采用 PCR方法 ,从伪狂犬病病毒闽 A株 DNA扩增出 5 5 8bp片段。将该片段克隆到 p UC19质粒中 ,测序正确后再将其克隆到表达质粒 p ET- 2 8a中 ,以 BL 2 1(DE3)为宿主菌 ,在 IPTG诱导下获得了高效表达。经 SDS- PAGE及 Western- blotting鉴定分析 ,表达蛋白大小约 2 30 0 0 ,蛋白薄层扫描分析表明 ,该蛋白约占菌体总蛋白的 30 %。
- 黄毓茂黄培堂费恩阁
- 关键词：GE基因大肠杆菌基因表达抗原克隆
- 伪狂犬病病毒Ma株基因组3.4kb及4.4kbBamHI片段的克隆与鉴定
- 2001年
- 本试验采用BamHI酶切伪狂犬病病毒 (PRV)Ma株基因组DNA ,电泳回收 3 4kb和4 4kb片段 ,快速克隆了伪狂犬病病毒Ma株BamHI 3 4kb和 4 4kb片段到质粒 pUC1 9中 ,对其进行部分序列测定并与Genebank序列进行同源性分析 ,结果表明BamHI 3 4kb片段包含UL50等基因 ,与Ka株UL50基因同源性为 87% ,BamHI 4 4kb片段包含RSP40及PK等基因片段 ,与Ka株RSP40基因同源性为 98%。Ka株BamHI 3 4kb片段包含TK基因 ,而包含UL50基因的BamHI片段为 7 4kb。结果表明 。
- 黄毓茂林绍荣王全凯费恩阁
- 关键词：伪狂犬病病毒基因克隆病苗
- 伪狂犬病毒闽A株基因文库的构建及物理图谱的分析
- 1999年
- 以质粒pBR322 作载体, 用鸟枪法克隆出了PRV 闽A 株除Bam HI-1,BamHI-2外的所有酶切片段,构建了PRV闽4株基因文库,并以克隆出的Bam HⅠ片段用光生物素标记作探针, 应用分子杂交法确定PRV闽A株绝大部分限制内切酶位点的位置。
- 汪铭书郭万柱娄高明费恩阁宣华
- 关键词：伪狂犬病毒基因文库物理图谱
- 牛病毒性腹泻病毒P125基因重要区的比较与分析
- 1997年
- 牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)为黄病毒科瘟病毒属中的成员。根据在细胞培养物中是否产生病变,可将BVDV分为致细胞病变(CP)
- 王新平涂长春李红卫宣华朱维正费恩阁殷震
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒基因重排基因缺失BVDV细胞培养物
- 伪狂犬病毒DNA限制性内切酶分析被引量：10
- 1995年
- 应用５种限制性核酸内切酶（ＢａｍＨＩ、ＫｐｎＩ，ＳａｌＩ、ＢｇｌⅡ和ＨｉｎｄⅢ）建立了伪狂犬病毒闽Ａ株ＤＮＡ的内切酶图谱，并与Ｂｕｋ株、Ｓｈｏｐｅ株、Ｎｏｒｄｅｎ株、Ｓ株，台湾ＮＴＵ株进行比较，认为闽Ａ株与美国或欧洲毒株无关，而与台湾株同源，表明核酸限制性内切酶分析在伪狂犬病病毒研究中是一种毒株鉴别、分子流行病学调查的有用工具。
- 汪铭书郭万柱冯炳芳王印娄高明费恩阁宣华韩素文
- 关键词：伪狂犬病毒DNA
- 鹅细小病毒和番鸭细小病毒核酸疫苗重组质粒的构建及表达被引量：12
- 2002年
- 将鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MPV)主要结构蛋白(VP2-VP3)基因克隆到核酸疫苗质粒pIRES1neo载体上,构建了核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP,通过脂质体转染法分别将重组质粒转染到鹅胚成纤维细胞和番鸭胚成纤维细胞中,核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP分别转染鹅胚成纤维细胞和番鸭成纤维细胞中,于转染后72h收取细胞,细胞裂解液裂解后,经Westernblot检测其表达产物可出现特异性反应带,证明表达产物具有很好的反应原性。
- 李雪梅章金刚向华陈晓月金宁一费恩阁
- 关键词：鹅细小病毒番鸭细小病毒核酸疫苗重组质粒
- 牛病毒性腹泻的临床类型与致病机理的研究进展被引量：15
- 1998年
- 本文对牛病毒性腹泻的主要临床类型，牛病毒性腹泻病毒的两个生物型与临床表现型的关系及粘膜病致病机理的最新研究进展做了综述。
- 王新平费恩阁
- 关键词：牛病毒性腹泻粘膜病致病机理
- 伪狂犬病毒闽A株基因文库的构建及物理图谱分析被引量：14
- 1994年
- 本文报道以质粒ｐＢＲ３２２作载体，用鸟枪法克隆出了ＰＲＶ闽Ａ株除ＢａｍＨＩ－１，２外的所有酶切片段，构建了ＰＲＶ闽Ａ株基因文库，并以克隆出的ＢａｍＨＩ片段用光生物素标记作探针，应用分子杂交法确定了ＰＲＶ闽Ａ株绝大部分限制性内切酶位点的位置。
- 汪铭书郭万柱娄高明费恩阁宣华
- 关键词：伪狂犬病毒基因文库物理图谱家畜病毒学
- 鹅细小病毒长春分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的原核表达被引量：3
- 2002年
- 根据国外已发表的鹅细小病毒(GPV)A株基因组核苷酸序列,设计并合成了一对用于GPV主要结构蛋白(VP2-VP3)基因表达的引物。利用合成的引物,扩增并鉴定了GPV中国长春株(GPVCC株)的VP2-VP3基因。将扩增的目的基因插入到原核表达载体pET28(a)的多克隆位点,构建了表达GPVVP2-VP3基因的原核载体pEGVP1。重组表达载体质粒转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测到大小分别为75000和58000的表达蛋白带。Westernblot分析表明,表达产物具有很好的特异性。
- 李雪梅章金刚向华陈晓月金宁一费恩阁
- 关键词：鹅细小病毒结构蛋白原核表达
