陈志飞
- 作品数：60 被引量：114H指数：7
- 供职机构：上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目上海市科学技术委员会资助项目上海出入境检验检疫局科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学天文地球更多>>
- 复合PCR鉴定胸膜肺炎放线杆菌方法的建立及初步应用被引量：5
- 2005年
- 根据胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)apxIVA毒素基因序列和16SrRNA序列分别设计了一对特异性引物P1P4和一对通用引物S7S10,建立了检测App全部15个血清型的复合PCR方法。对App的15个血清型国际参考株和国内的11个App菌株进行检测,都能得到363bp和692bp的两个扩增片段。而放线杆菌等13株参考菌株只能得到692bp的扩增片段。该方法能将15个血清型的App菌株鉴定到种。检测的灵敏度达9pgDNA1300CFU。用建立的方法检测临床分离的302株可疑菌株,阳性4株,与其它鉴定方法相符。结果表明复合PCR可用于App菌株的鉴定。
- 李树清易建平陈志飞王巧全周筱华罗满林方怡陈敏夏谦
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌复合PCR
- 用湿法冶金技术从金锑矿中分离锑的方法
- 本发明公开了一种用湿法冶金技术从金锑矿中分离锑的方法。该法将金锑矿石粉末或金锑精矿在可溶性硫化物溶液中处理，使其中的辉锑矿溶解，实现金、锑分离，再用吸附剂对所形成的硫代亚锑酸根进行吸附。将吸附产物煅烧，锑转变为氧化物并融...
- 叶瑛张维睿邬黛黛陈志飞季珊珊黄霞
- 文献传递
- 阴离子捕获剂及其制备和使用方法
- 本发明公开了一种阴离子捕获剂及其制备和在废水处理上的使用方法。这种阴离子捕获剂是一种具有层状结构的双金属氧化物，由于其特殊的结构和性能，使其能通过层间阴离子交换、层状结构重建等机制来吸附环境中的有毒有害的阴离子。将有效量...
- 叶瑛郑丽波冯璐珈沈忠悦杨帅杰韩杰陈志飞
- 文献传递
- 横川后殖吸虫与扇棘单睾吸虫双重PCR鉴别方法的建立被引量：1
- 2015年
- 目的建立一种能快速鉴定横川后殖吸虫(Metagonimus yokogawai)和扇棘单睾吸虫(Haplorchis taichui)的双重PCR方法。方法从Gen Bank中获取横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫以及与其同源性较高的虫种的核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列,应用Primer premier 5.0软件设计2对特异性引物,并优化PCR反应体系和反应条件,建立双重PCR法。将横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫与17个相关虫种一起进行PCR扩增,检测方法的特异性。横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫的ITS1扩增产物经p MD19-T载体进行TA克隆获得质粒,并将质粒进行梯度稀释,检测其敏感性。应用新建的双重PCR法鉴定从47副猫内脏和40副犬内脏中收集的吸虫,检测该方法的准确性和实用性。结果新建的双重PCR法能扩增出横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫的目的片段,大小分别为648 bp和279 bp,不与钩棘单睾吸虫、华支睾吸虫、心形咽口吸虫、次睾属吸虫囊蚴、外睾属吸虫囊蚴、藐小棘隙吸虫、抱茎棘隙吸虫、弗氏棘口吸虫、似锥低颈吸虫、全冠属吸虫、重盘属吸虫、异尖属线虫、东方次睾吸虫、卫氏并殖吸虫、瓦氏瓦生吸虫、背孔属吸虫和宫脂属线虫的DNA发生交叉扩增,具有较好的特异性。敏感性试验表明,应用该双重PCR法,2类吸虫DNA的最低检测值分别为1.49×10-1pg和1.14×10-1pg。对来自猫内脏和犬内脏的吸虫检测表明,该方法能够区分横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫,并且不与猫、狗中其他的吸虫DNA发生交叉扩增。结论本研究所建立的双重PCR法可用于快速鉴定横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫。
- 梅雪芳李树清康羊群石云良黄腾飞陈志飞黄维义
- 关键词：双重PCR
- 钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫ITS2序列测定及其种系发育分析被引量：2
- 2015年
- 本试验将从犬猫肠道中分离的钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫用盐酸卡红染色后观察其形态学特征;PCR扩增其ITS2基因序列并测序,并将测序结果与GenBank同属异形科的多棘单睾吸虫和横川后殖吸虫序列进行比对;应用Mega 6.05软件采用邻位相连法构建种系发育树进行分析。盐酸卡红染色后显示,钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫各形态学特征符合经典的分类学描述。PCR测序后获得钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫ITS2序列长度分别为295和297bp,G＋C含量分别为49.5%（146/295）和54.2%（161/297）。提交至GenBank后获得登录号分别为钩棘单睾吸虫KJ137221-KJ137223,KP165437-KP165439;扇棘单睾吸虫KP165440。序列比对结果显示,钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫种内差异性为0,4种异形吸虫种间差异为15.2%-28.9%。基于ITS2序列建立的种系发育树显示钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫构成自展值为78%的拓扑分支。
- 梅雪芳李树清胡长红黄腾飞陈志飞黄维义
- 边缘无浆体MSP5基因片段的克隆与原核表达被引量：2
- 2007年
- 目的克隆边缘无浆体MSP5基因,构建重组质粒,并进行表达与鉴定。方法根据GenBank公布的边缘无浆体MSP 5基因序列(AY714547)设计一对引物,无菌颈静脉采集边缘无浆体阳性的牛血,用PCR方法从4血的DNA模板中扩增MSP 5基因582bp的片断。将该片段克隆到原核表达载体pGEX-KG中,构建原核表达载体KG-MSP5,转化BL21,经IPTG的诱导表达蛋白。利用BugBuster GST Bind Purification Kit将其纯化,经Western blotting进行分析。结果重组质粒KG-MSP5,转化BL21,在IPTG的诱导下表达大小约46 kPa蛋白。western blotting分析表明其具有很好的免疫原性。结论本研究为边缘无浆体的血清学诊断试剂盒的研制奠定了基础。
- 杜凯李树清陈志飞周艳琴王贵强王巧全姚宝安赵俊龙
- 关键词：边缘无浆体原核表达纯化
- 有害生物风险评价指标体系与预警技术支持体系的研究
- 周国梁易建平沈秋光印丽萍陈志飞李尉民鞠瑞亭黄晓璪韦国余叶军孙红袁平葛建军戚龙君柴燕郑建中徐颖宋绍祎
- 该项目来源于上海市重大科技攻关项目，项目编号：03DZ19315。 以上海近年已引进植物资源及其有害生物为研究对象，利用植物生理学、生态学、植物保护学、植物病理学、气象学、信息学、管理学等学科基本原理，结合计算机技术，...
- 关键词：
- 关键词：有害生物指标体系预警技术
- 以高岭石为原料制备超纯超细硅粉和硫酸铝的方法
- 本发明公开了一种以高岭石为原料制备超纯超细硅粉和硫酸铝的方法。它是将矿石烘干、研磨、磁选、煅烧后在稀硫酸中溶解，过滤或离心分离得到的溶液经浓缩冷却制得硫酸铝。酸溶残留物经化学提纯、粒度分离和再次磁选，并经喷雾干燥，所得产...
- 叶瑛黄霞季珊珊邬黛黛陈志飞李俊张维睿
- 文献传递
- 液相芯片分型检测猪传染性胸膜肺炎的研究
- 李树清王艳王巧全张强杜军陈志飞刘俊平李健
- 主要技术指标：1.可同步检测App血清1至血清7型抗体的方法，整个反应可在3小时内完成。2.检测猪蓝耳病、猪圆环病毒、猪副猪嗜血杆菌、猪支原体肺炎、猪口蹄疫、猪传染性胃肠炎、猪布氏杆菌病、猪弓形体、猪链球菌阳性血清，均为...
- 关键词：
- 关键词：胸膜肺炎
- 同时检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素的方法
- 一种生物检测工程技术领域的同时检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素的方法，包括如下步骤：1、制备偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA；FB1-KLH和FB1-OVA；2、分别制备抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体；3、制备...
- 严亚贤王元凯陈志飞李树清孙建和
- 文献传递
