余健秀
- 作品数:57 被引量:238H指数:10
- 供职机构:上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 苏云金杆菌毒力的生物测定被引量:10
- 2000年
- 本文对苏云金杆菌(Bt)制剂的生物测定标准化及目前采用的生物测定方法作一较详细的介绍。其中对鳞翅目幼虫的生物测定包括混合饲食法、浸叶饲喂法、蜡洞法、液滴法;对双翅目幼虫的生物测定则有世界卫生组织提出的方法和美国国内标准方法;对路翅目幼虫目前还没有一个统一的标准方法。生化和免疫测定法比传统的生物测定方法快速、简便,但亦存在不足。
- 汤慕瑾余健秀刘静宇庞义
- 关键词:生物测定方法鳞翅目幼虫饲喂法苏云金杆菌(BT)毒力免疫测定法
- 全文增补中
- 苏云金芽孢杆菌分子伴侣串联基因p19-p29的克隆和表达载体的构建被引量:6
- 2002年
- 根据已知序列设计一对PCR引物 (ORF 5S ,ORF 3N) ,可从cry2Aa或cry2Ac操纵子中扩增出包含串联分子伴侣基因p1 9 p2 9的DNA片段 ,预期大小分别为 1 6kb和 2 0kb。对 1 5 0株苏云金芽孢杆菌菌株进行PCR检测 ,从 2 6株中获得了大小为 1 6kb的扩增片段 ,但未获得2 0kb的片段。这表明cry2Aa型操纵子p1 9 p2 9基因存在较广泛 ,而cry2Ac型较罕见。将来自Y2 菌株的 1 6kb片段回收 ,通过一系列亚克隆 ,最终构建成一个含有p1 9 p2 9串联基因的Bt表达载体 ,为进一步研究p1 9 p2
- 余健秀曾少灵谢瑞瑜蒙国基庞义
- 关键词:苏云金芽孢杆菌分子伴侣串联基因克隆
- 中蜂囊状幼虫病病毒部分结构蛋白基因的克隆及序列分析被引量:6
- 1999年
- 根据小RNA 病毒科( Picornaviridae) 中病毒RNA 所具有的结构特征, 采用mRNAcapture kit 提取纯化中蜂囊状幼虫病病毒(Chinesescabrood virus CSBV) 的RNA, 并以之为cDNA合成的模板. 依据小RNA病毒科中的脊髓灰质炎病毒结构蛋白基因序列设计了一对引物VP5和VP3 , 通过PCR 扩增获得预期大小约为1 100 bp的DNA 片段, 将此片段克隆到pGEMTeasy载体上并直接测序. 序列分析表明, 该片段为中蜂囊状幼虫病病毒部分结构蛋白基因, 与意蜂幼虫囊状病病毒结构蛋白基因序列的同源性为86-8 % , 与之对应氨基酸序列的同源性高达93-4 % .
- 冯建勋余健秀张景强
- 关键词:中蜂囊状幼虫病结构蛋白基因克隆
- 高毒广谱杀虫Bt工程菌TnY
- 目前,农作物害虫在不同程度上对Bt制剂产生了抗性或不够敏感,在对这些害虫有效的Bt制剂中均不含Cyt1Aa蛋白。含有cyt1Aa和cry11Aa基因的天然苏云金杆菌,这两个基因均位于大质粒上。而通过质粒转移或ICPs的共...
- 余健秀庞义邓日强
- 关键词:高毒广谱
- 文献传递
- 苏云金杆菌杀虫工程菌及其构建方法
- 本发明涉及一种染色体DNA中含有cytlAa和cryllAa基因的苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)杀虫工程菌及其构建方法。该工程菌是利用转座子衍生载体pTV1TS将cytlAa和cryllAa基因...
- 庞义余健秀邓日强龙綮新
- 文献传递
- 鲨鱼软骨血管形成抑制因子的分离纯化及其活性的初步研究被引量:6
- 2001年
- 以广东阳江鲨鱼软骨为原料 ,研究了鲨鱼软骨新生血管形成抑制因子的分离纯化方法 ,并对其生物学活性进行了初步研究 .采用盐酸胍抽提、膜超滤、丙酮分级沉淀、Sephadex G-75柱层析和 C4反相高效液相色谱等步骤 ,分离纯化出一种新的鲨鱼软骨血管生成抑制因子 -a( Shark Cartilage Angiogenesis Inhibitor-a,SCAI-a) ,分子量为 1 2 60 0 。
- 曾锋谢团霞杨伟兴张展霞余健秀庞义
- 关键词:鲨鱼软骨纯化生物活性
- 苏云金杆菌小试生产发酵影响因子的研究被引量:12
- 2002年
- 利用 1 0L全自动发酵罐对苏云金杆菌小试生产的发酵条件进行了研究。结果显示 ,不同的温度、pH值、培养基成分及接种方式对发酵产量和发酵周期均有影响 ;在培养基配方中存在葡萄糖时 ,葡萄糖单独灭菌对提高苏云金杆菌发酵产量是重要的。初步生物测定显示 ,发酵上清中存在一些杀虫增效因子 ,建议配制苏云金杆菌制剂时尽可能加以利用。
- 余健秀汤慕瑾徐建敏庞义
- 关键词:苏云金杆菌发酵微生物杀虫剂PH值接种方式培养基
- 苏云金杆菌分子伴侣基因、含有该基因的载体及菌株
- 本发明涉及克隆自苏云金杆菌(Bt)的一个分子伴侣(Chaperone)基因p21zb以及含有该基因的载体和菌株。该基因转入Bt菌株不仅能显著提高野生型苏云金杆菌杀虫晶体蛋白(ICPs)的产量,且能激发苏云金杆菌杀虫晶体蛋...
- 余健秀庞义邓日强
- 文献传递
- Twist1 promotes prostate cancer development by mediating the site-specific DNA methylation
- Epigenetic regulation plays a critical role in prostate tumorigenesis.However,how microRNAs(miRNAs)and cytokin...
- 赵娴余健秀
- 文献传递
- 苏云金杆菌辅助蛋白P20对杀虫晶体蛋白Cry1Ab表达的影响被引量:5
- 2003年
- 苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,简称Bt)杀虫晶体蛋白Cry1Ab因其C 半端缺少了一段含 4个半胱氨酸的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定 ,报道苏云金杆菌辅助蛋白P2 0帮助Cry1Ab蛋白的表达及晶体的形成。利用穿梭载体pHT310 1构建 3个表达质粒 ,即pT1B、pP1B和pDP1B ,3个质粒都含有cry1Ab基因 ,不同在于pT1B没有p2 0基因 ,pP1B含有p2 0全基因 ,而pDP1B不仅含有p2 0全基因 ,且在p2 0基因前插入cry1A(c)启动子。分别将这 3个表达质粒经电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型菌株CryB中 ,获得转化菌株T1B、P1B和DP1B。Westernblot表明cry1Ab基因在这 3株菌中均表达了 130kD的蛋白 ,部分降解为大约 6 0kD的蛋白。蛋白定量分析显示 ,3株菌 130kD蛋白量的比为 1∶1.4∶1 5 ,降解后的 6 0kD蛋白量的比为 1∶1.1∶1.6 ,Cry1Ab蛋白总量的比为 1∶1∶2∶1 6。镜检发现 ,Cry1Ab在 3株菌中都形成典型的菱形晶体 ,其晶体大小为T1B
- 汤慕瑾袁美妗陈建武师永霞曾少灵余健秀庞义
- 关键词:苏云金杆菌辅助蛋白杀虫晶体蛋白CRYLAB生物杀虫剂