周国民
- 作品数：109 被引量：362H指数：11
- 供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 小鼠胚胎近端流出道隔的融合与心肌化研究被引量：6
- 2005年
- 目的探讨心脏近端流出道隔的融合和心肌化过程及其机制。方法选用胚胎(embryonicday,ED)11.5至出生后1dC57BL6小鼠(简称C57小鼠)。采用免疫组化法测定横纹肌肌动蛋白αSCA,神经嵴细胞的标记物AP2及HNK1,凋亡相关分子activecaspase3的表达;采用TUNEL法原位检测细胞的凋亡程度。结果①近端流出道隔的融合及心肌化的时空模式:近端流出道心内膜垫于ED11.5开始融合,ED13.5基本完成融合;心肌化约从ED12.5开始,至ED15.5基本完成。整个心肌化过程呈现心肌从流出道隔由外向内的内向性生长趋势。②近端流出道隔HNK1的表达:从ED11.5到生后1d近端流出道隔极少或几乎无HNK1表达。③近端流出道隔AP2的表达:ED11.5几乎无表达,ED12.5、ED13.5可见少量表达,从ED14.5以后消失。④近端流出道隔细胞的凋亡:TUNEL和caspase3的检测均表明近端流出道隔的凋亡集中出现在ED12.5和ED13.5,一部分凋亡细胞可能为AP2阳性的神经嵴源性细胞。结论C57小鼠心脏近端流出道隔在胚胎发育早中期开始融合,并逐渐完成心肌化过程,心脏神经嵴细胞可能通过凋亡途径参与了该过程。
- 赵晓晴黄国英陈萍谢利剑周国民
- 关键词：神经嵴细胞胚胎
- BMP-4对视神经头处髓鞘形成的抑制作用
- 刘培培周国民
- 阻断神经生长因子信号部分抑制雌二醇对恒河猴视网膜血管内皮细胞的作用被引量：6
- 2004年
- 目的 研究神经生长因子 (NGF)信号系统在雌激素调控视网膜血管内皮细胞中的作用。 方法 选用恒河猴视网膜 脉络膜血管内皮细胞系RF 6A ,RT PCR检测雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、NGF及其受体在视网膜血管内皮细胞中的表达。分别观察雌二醇 (estradiol,E2 )、NGF及VEGF、EGF、BDNF等对血管内皮细胞活力(MTT法 )的作用。用流式细胞术 细胞周期法检测E2 、NCF及E2 与K2 5 2a共同处理组的凋亡率。NGF抗体和选择性TrkA拮抗剂K2 5 2a研究对上述作用的阻断效应。同样的分组进行细胞划痕修复实验。 96孔板AngioMatrix胶上观察E2 及NGF对RF 6A内皮细胞管腔形成能力的影响。 结果 RF 6A在细胞外基质胶上可形成管腔样结构。RT PCR检测到ER α、NGF及NGF受体TrkA的mRNA。 1nmol L～ 1 0 0nmol LE2 可以剂量依赖性的增强细胞活力及单层细胞的划痕修复能力 ,其增强作用可部分被NGF抗体及 1 0 0nmol L的K2 5 2a选择性阻断。凋亡率检测显示各组凋亡率相近。E2 可促进RF 6A形成管腔 ,但不能被NGF抗体、TrkA阻断。 结论 除VEGF外 ,E2 还可通过NGF信号系统对视网膜血管内皮细胞活力、划痕修复起促进作用。但结果提示 ,阻断NGF信号系统不影响E2 促RF 6A形成管腔的作用。
- 胡宝洋刘坤万瑾龚宏华佘振珏肖虹蕾周国民
- 关键词：神经生长因子视网膜血管内皮细胞管腔形成恒河猴
- 基于Watersnake的视神经纤维的自动识别被引量：1
- 2008年
- 在视神经横切面图像中,将每个神经纤维的边界精确地分割出来,是视神经形态分析的重要环节。由于神经纤维数量巨大、形态各异,单纯采用一种分割方法无法获得满意效果。采用基于Watersnake的分割方法,整合Watershed和Snake在图像分割方面的优势,分两步进行纤维分割。首先由Watershed获取纤维的粗轮廓,在此基础上由Snake经曲线演化获得纤维的精细轮廓。实验结果表明,Watersnake能较好地识别神经纤维的内外轮廓,为后续的神经纤维形态分析奠定基础。
- 赵希梅武金燕任秋实周国民
- 关键词：神经纤维
- 大鼠视网膜内髓鞘形成模型的建立与研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究体外培养的大鼠纹状体神经干细胞在植入同种视网膜后,向少突胶质细胞分化并产生髓鞘的过程,观察髓鞘形成对视网膜结构的可能影响,建立一种中枢神经髓鞘体内发育的新模型。方法将体外传代培养的胚胎纹状体神经干细胞植入新生大鼠的玻璃体腔内,在移植后不同时期观察视网膜内髓鞘的出现部位以及扩展趋势,利用不同染色方法对标本进行检验分析,利用透射电镜进行超微结构观察。结果移植细胞4周后部分视网膜内开始出现成束髓鞘,只分布于神经纤维层。髓鞘束出现的比例、分布面积和形态变化与移植后动物的存活时间相关。电镜观察可见节细胞轴突外包绕有结构正常的中枢神经样髓鞘。较厚的髓鞘束对视网膜节细胞的分布产生一定影响。结论大鼠纹状体神经干细胞可在同种视网膜内向成熟少突胶质细胞分化,视网膜神经纤维层具有促使髓鞘形成的作用;本实验可能为研究少突胶质细胞分化及髓鞘生成机制提供新的在体模型。
- 郑华万瑾刘坤佘振珏肖虹蕾俞彰周国民
- 关键词：细胞培养视网膜髓鞘电镜
- 提前光刺激对小鼠神经节细胞感光视蛋白melanopsin表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨提前光刺激对小鼠神经节细胞发育不同阶段感光视蛋白melanopsin表达的影响。方法对出生4dC57BL/6J小鼠右眼建立提前开睑接受光刺激模型,左眼作为自身对照,应用免疫荧光、RT-PCR和Western blotting方法比较小鼠5天龄、6天龄、7天龄、14天龄和90天龄时提前开睑组和对照组视网膜感光视蛋白melanopsin的分布及转录和翻译水平的表达变化。结果Melanopsin阳性细胞在5天龄时就已经在视网膜上明显表达,随着小鼠视网膜发育的逐渐成熟,提前开睑组和对照组melanopsin表达均逐步下降;组内比较,在6天龄、7天龄、14天龄时melanopsin提前开睑组表达量均少于各自对照组,差异具有显著性(P<0.05);90天龄时melanopsin表达最少,且提前开睑组和对照组差异无显著性(P>0.05)。结论小鼠14天龄之前是melanopsin阳性神经节细胞发育的关键阶段,在此阶段内,melanopain阳性神经节细胞数量逐渐减少,提前开睑光刺激使melanopsin阳性神经节细胞数量进一步减少。本研究结果有助于揭示melanopsin在视网膜神经节细胞发育过程中的表达变化及其可能的分子机制。
- 武静周晓东周国民刘丽芸肖虹蕾
- 关键词：神经节细胞发育MELANOPSIN
- 麝香保心丸对ApoE^-/-小鼠心肌梗死后动脉粥样硬化进程和循环单核细胞亚群的影响被引量：9
- 2020年
- 目的观察麝香保心丸对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠心肌梗死后动脉粥样硬化斑块进程和循环单核细胞亚群(CD11b^+Ly6G^-CD115+Ly6C^hi和CD11b^+Ly6G^-CD115+Ly6C^lo)的影响。方法35只6周龄雄性ApoE^-/-小鼠,高脂喂养10周,选择10只小鼠为假手术组(sham组,等量生理盐水灌胃),25只小鼠通过结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,将造模成功的20只小鼠采用随机数字表法分为心肌梗死组(MI组,等量生理盐水)和麝香保心丸组[MI+SBP组,100 mg/(kg·d)],每组10只,持续灌胃4周。全自动生化仪检测小鼠血浆TC、TG和LDL-C水平,油红O染色检测主动脉全长斑块面积,F4/80免疫荧光染色检测主动脉窦斑块内巨噬细胞含量,流式细胞术分析循环单核细胞亚群比例。结果与sham组比较,MI组主动脉粥样硬化病变明显加重(P<0.01),斑块内巨噬细胞含量增加(P<0.01),单核细胞数量及Ly6C^hi单核细胞亚群数量明显增加(P<0.01)。与MI组比较,MI+SBP组主动脉粥样硬化病变明显改善(P<0.01),斑块中F4/80^+巨噬细胞含量减少(P<0.01),单核细胞数量及Ly6C^hi单核细胞亚群数量减少(P<0.05,P<0.01)。3组之间Ly6C^lo单核细胞亚群数量及TC、TG、LDL-C水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论心肌梗死会加速动脉硬化病变进程,麝香保心丸通过减少循环中炎性单核细胞比例和斑块中巨噬细胞含量,调控动脉粥样硬化斑块的炎症反应,且不依赖于血脂水平的变化。
- 陈羽斐胡亮张红旗贾剑国施海明罗心平周国民范维琥沈伟
- 关键词：动脉粥样硬化麝香保心丸炎症反应
- 大鼠胚胎视网膜祖细胞分离培养及其分化特性被引量：3
- 2005年
- 目的:建立大鼠胚胎视网膜祖细胞体外培养方法并观察其分化特性。方法:取孕18d大鼠胚胎,用无血清培养技术扩增视网膜祖细胞;用免疫细胞化学、扫描电镜与透射电镜技术对祖细胞的特性及诱导分化的细胞类型进行鉴定。结果:从胚胎大鼠视网膜神经部分离的细胞具有增殖能力,可进行传代培养,获得的细胞球能表达Nestin并具有掺入BrdU的能力。诱导分化后的细胞表达,其中,Thy1.1+细胞最多,Opsin+细胞次之,GS+细胞较少,PKC+细胞少,Syntaxin+及Peripherin+细胞极少,不表达CalbindinD28K。结论:从胚胎大鼠分离的细胞具有自我增殖能力和多向分化潜能,属于视网膜祖细胞;诱导分化产生5种视网膜细胞,以节细胞最多,未见水平细胞。
- 李艳佘振珏周国民
- 关键词：大鼠胚胎细胞分离培养CALBINDIN胚胎大鼠视网膜神经
- BMP-4在视网膜与视神经中的分布及对少突胶质前体细胞分化的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein4,BMP-4)在视网膜与视神经上的表达情况及其对少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)分化的影响,进一步探讨视神经乳头处无髓鞘形成的原因。方法:取生后7d SD大鼠视神经,用免疫组织化学方法研究BMP-4的表达情况。采用恒温振荡法和差速贴壁法分离纯化新生SD大鼠OPCs。用BMP-4诱导OPCs分化,通过免疫细胞化学方法研究OPCs的分化方向。通过Western Blot方法研究BMP-4浓度与OPCs细胞体系内Olig2蛋白表达水平之间的相互关系。结果:(1)在发育过程中,BMP-4仅选择性表达在视神经乳头处;(2)成功纯化的OPCs在PDGF和bFGF撤除后自发分化为少突胶质细胞;(3)OPCs经BMP-4诱导后向II型星形胶质细胞分化;(4)OPCs内Olig2蛋白的表达量随着BMP-4浓度的逐渐增高而逐渐降低。结论:在视神经乳头表达的BMP-4蛋白有可能作用于迁移至此处的OPCs,通过激活相关信号途径以下调OPCs内Olig2蛋白的表达水平,抑制OPCs向少突胶质细胞方向分化,从而抑制视神经乳头髓鞘形成。
- 刘培培陈园园郑华李艳佘振珏肖虹蕾周国民
- 关键词：BMP-4少突胶质前体细胞OLIG2视神经乳头
- 铺片在结膜杯状细胞研究中的应用
- 2001年
- 佘振珏柯碧莲周国民
- 关键词：结膜杯状细胞
