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小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定被引量：1: 2007年; 目的研究小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定方法，为干细胞替代疗法或构建人工阴道黏膜治疗先天性无阴道提供依据。方法取7～8周龄小鼠的阴道黏膜上皮，用酶消化培养法原代培养阴道黏膜干细胞（VMSC）。用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代分离和富集VMSC。显微镜下动态观察细胞生长特性；苏木精-伊红（HE）染色；透射电镜观察细胞超微结构；荧光显微镜下观察标记滞留细胞（LRC）。免疫组化sP法检测细胞表面标记物（β1整合素、细胞角蛋白19）进行鉴定。结果用酶消化培养法得到原代VMSC，用Ⅳ型胶原黏附法分离到较纯的VMSC，经连续传代，富集到大量VMSC。动态观察发现细胞呈克隆性生长的干细胞特性。HE染色细胞呈椭圆形或梭形、核质比例大等幼稚细胞特征。透射电镜发现细胞呈未成熟细胞特征。荧光显微镜下LRC的核呈亮黄色，标记滞留时间长。免疫组化SP法检测β1整合素和细胞角蛋白19呈阳性表达。结论用酶消化培养法可原代培养VMSC。用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代可分离、富集VMSC。免疫组化SP法检测细胞表面标记物可鉴定VMSC。; 刘风华王沂峰梁晓萍彭文明曹长安周峰; 关键词：阴道黏膜干细胞细胞培养

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周峰