唐榕
- 作品数:36 被引量:177H指数:7
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市现代生物与新药产业发展基金国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 耐热FD DNA多聚酶在PCR中的应用条件被引量:1
- 1991年
- 探索了用于多聚酶链式反应(PCR)的FD DNA多聚酶的最适反应条件在100μl的反应液中含有25 mmol/L的Tris-HCl(pH8.0),25 mmol/L的(NH_4)_2SO_4,1.5 mmol/L的MgCl_2,200 μg/ml的明胶,dNTP各200 μmol/L,模板量为3.3×10~(-2)Pg,引物量各为290 nmol/L,1~2 U的耐热FD DNA多聚酶,30次循环反应的系统为通用PCR最适反应系统。应用这一反应系统,混迹于大量DNA分子中的特定DNA片段可借助于琼脂糖凝胶电泳专一性地、快速而有效地检出。
- 毛裕民杨树青唐榕刘坚冯霄马匆匆
- 关键词:多聚酶PCR扩增
- 基因芯片技术在胰腺癌相关基因研究中的应用被引量:2
- 2004年
- 目的 应用基因芯片技术比较胰腺癌组织与正常胰腺组织基因表达谱的差异 ,以寻找新的诊断指标和治疗位点。方法 将 12 80 0 0个人类全长基因的PCR产物点样在特殊处理后的玻片上制备基因芯片。采用逆转录的方法分别将Cy5 dUTP标记胰腺癌组织mRNA、Cy3 dUTP标记正常胰腺组织mRNA以制备探针。将每一标本的混合探针与芯片杂交 ,用ScanArray 30 0 0荧光扫描仪扫描荧光信号。应用ImaGene3.0软件分析、计算每点的Cy5和Cy3信号值。以Cy5 /Cy3比值的自然对数绝对值 >0 .6 9为标准 ,筛选差异表达基因。结果 在所检测的 6例胰腺癌标本中 ,共有 5 4个基因有差异表达 ,其中胰腺癌组织中表达上调基因 32个 (包括基因库中已登录基因 2 4个 ) ,表达下调基因 2 2个 (包括基因库中已登录基因 15个 )。结论 基因芯片技术为阐明胰腺癌特异基因表达谱提供了强有力的工具。
- 谭志军胡先贵应康李瑶唐榕曹贵松唐岩金钢
- 关键词:基因芯片技术胰腺癌基因
- 用甲酰胺提高多聚酶链式反应的特异性、灵敏度和效率的研究
- 1992年
- 在多聚酶链式反应体系中加入甲酰胺可以有效地抑制非特异性扩增,提高特异性扩增,并使反应的灵敏度提高一个数量级。
- 黄超毛裕民唐榕
- 关键词:甲酰胺聚合酶链反应
- 慢性乙型肝炎患者HBV DNA前C区突变株的分析被引量:1
- 2001年
- 高涛王渭康王介非顾士民胡德昌高昭景李晓芳唐榕
- 关键词:慢性乙型肝炎HBV-DNA
- PCR扩增ZFY及ZFX基因对奶牛的性别鉴定被引量:7
- 1993年
- 根据人及鼠 ZFY 及 ZFX 基因设计一对引物(ZF_1;ZF_2),利用 PCR 方法对牛的ZFY 及 ZFX 基因进行扩增.将扩增片段用 RStI 酶切,再通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后判定牛的性别.公牛 ZFY 基因的 PCR 扩增片段有一个 RStI 酶切位点,ZFX 基因没有 PSTI 酶切位点.所以公牛的 PCR 片段经酶切后出现三个片段(468bp;356bp;112bp).而母牛的 PCR 扩增片段酶切后仍只有一个片段(468bp).据此就可区别雌雄性别.
- 徐亚欧龚荣慈唐榕毛裕民
- 关键词:PCR奶牛性别鉴定基因
- 核酸快速抽提方法
- 本发明是一种快速核酸抽提方法。现有技术中用强力变性剂溶解蛋白质,再采用硅藻、玻璃粉吸附和解吸附等方法提取核酸,但是操作繁琐,多次离心等不足,经常易导致实验失败。本发明研制了一种乙醇、焦碳酸二乙酯混合溶液,与一定比例的待测...
- 唐榕李晓芳毛裕民
- 文献传递
- 基因芯片技术及产品的开发与应用研究被引量:1
- 2002年
- 1.概念、开发目的与意义:基因芯片是曾被评为1998年度世界十大科技突破之一的生物芯片技术的一个分支,它是大量的靶基因片段被有序、高密度地排列在玻璃、硅等载体上而制成,将待测样本标记后与之杂交,运用检测装置以及计算机软件检测芯片各靶基因的标记信号,从而快速、灵敏、高通量地比较和分析待测样本中的基因信息.该技术是目前后基因组研究中开发和应用最广泛的技术,在生命科学、医学研究、制药研究等领域有重要应用价值.
- 毛裕民谢毅李瑶裘敏燕应康陈沁黄燕唐榕曹跃琼戴建凉刘芳
- 关键词:基因芯片基因治疗基因诊断寡核苷酸基因芯片
- PCR扩增ZFY、ZFX序列鉴定奶牛性别的灵敏度研究被引量:14
- 1997年
- 从克隆、测序所得奶牛ZFY、ZFX序列中设计1对高特异性引物(或探针),即分别特异于牛ZFY、ZFX的ZF3、ZF4,与克隆时使用的引物ZF2搭配成ZF2、ZF3和ZF2、ZF4。利用这2对引物和ZF1、ZF2对奶牛基因组DNA进行NestPCR来判断性别,结果达到用超微量(8pg)DNA,即可检出ZFY、ZFX序列而判定雌雄的灵敏度;用非同位素标记试剂盒(DIG-System)标记ZF3、ZF4作为探针,对ZF1、ZF2扩增产物点杂交来判断性别。
- 龚荣慈徐亚欧唐榕毛裕民
- 关键词:性别鉴定PCRZFYZFX
- 聚合酶链反应对结核杆菌DNA重复序列的检测被引量:4
- 1993年
- 本文用聚合酶链反应(PCR)检测结核杆菌(TB)DNA,在TB染色体DNA中的一个片段多次重复出现,将此片段作为靶DNA,用PCR技术进行扩增。引物的DNA核苷酸序列为5’CCT GCG AGC GTA GGC GTC GG3’和5’CTC GTC CAG CGC CGC TTC GG3’在反应中用94℃变性,68℃退火延伸,43个循环可将1fgTBDNA扩增到能通过凝胶电泳检测出其特异性产物,此产物在作为对照的其他细菌中不能检出,加入100ng人基因组DNA对检测效果无影响。本方法为快速、敏感、特异地检测临床标本中的TB打下了基础。
- 陈一平翁心华唐榕毛裕民徐肇玥傅奇
- 关键词:聚合酶链反应结核杆菌DNA
- 采用基因芯片技术获取人脑胶质瘤差异表达的基因及一条全长新基因的研究被引量:5
- 2001年
- 目的 运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因 ,并对其中一条基因进行了初步的研究。方法 抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针 ,经杂交、洗涤后 ,通过计算机观察二者表达谱的差异情况 ,对 436F11克隆子进行了northernblot,原位杂交和生物信息学分析。结果 通过四次基因芯片筛选 ,获得 15条与胶质瘤相关的新基因 ,经northernblot证实 436F11基因在人正常脑组织中高表达 ,而在人脑胶质瘤中低表达。原位杂交得到相同的结果。BLASTn和BLASTx分析显示 ,436F11基因为全长新基因 ,共编码 78个氨基酸 ,其理论分子量为 86 48Da ,等电点为 4 6 9,与鼠PKIβ 6 9%同源 ,命名为人PKIβ。 结论 基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少、高质量、高速度、高敏感等特性。人PKIβ可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因 。
- 祁震宇惠国桢李瑶唐榕周宗祥夏放顾少华应康谢毅
- 关键词:基因芯片脑胶质瘤全长基因