夏伟
- 作品数：31 被引量：112H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 变形链球菌葡糖基转移酶催化活性区的分子克隆及表达被引量：6
- 2005年
- 目的:克隆变形链球菌葡糖基转移酶中催化活性区(CAT)的基因片段,并在大肠杆菌中表达。方法:通过PCR技术克隆CAT的基因片段并通过蛋白重组融合表达技术使其在大肠杆菌中表达。结果:成功克隆了CAT的基因片段,并在大肠杆菌中得到其融合蛋白的表达。结论:成功克隆葡糖基转移酶CAT基因并获得其融合蛋白的表达,为后续研究奠定了基础。
- 夏伟王成龙董洁高亚萍杨光邵宁生刘洪臣
- 关键词：变形链球菌葡糖基转移酶克隆分子克隆
- 一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因鉴定方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因快速、准确鉴定方法；涉及该方法在生物医学领域中的应用。本发明通过以下技术方案实现：首先通过现有的miRNA靶标预测生物信息学软件，如Targetsc...
- 邵宁生李洁黄宝春夏伟陈留存李少华苏雪婷王芳丁红梅
- 文献传递
- 临床肿瘤标本中差异miRNA的检测及mir-200b功能研究
- miRNA是一类长约22个核苷酸的非编码小RNA分子，以转录后调节的方式改变靶基因的表达水平。miRNA通常由RNA聚合酶II转录生成pri-miRNA，后经Drosha/pasha切割形成70个核苷酸左右的pre-mi...
- 夏伟
- 关键词：表达谱靶基因MIRNA芯片癌旁组织
- 文献传递
- 一种肝癌药物治疗的靶标及其应用
- 本发明公开了属于医学肿瘤学技术领域的一种肝癌药物治疗的靶标Vasorin蛋白及其应用。本发明通过液相差异SELEX的方法，以伴肝外转移的AFP阴性HCC患者血清为靶标，以正常人血清为消减靶标，获得特异识别肝癌患者血清的富...
- 邵宁生李少华李慧王玮丁红梅李洁夏伟刘农乐赵强王芳
- 病理类型特异的卵巢癌组织适配子的鉴定
- 2013年
- 目的鉴定经组织切片消减SELEX筛选获得的4条候选适配子对不同类型卵巢癌组织的识别特性。方法公司合成、荧光素修饰候选适配子,利用免疫荧光实验对筛选获得的适配子候选序列进行鉴定。结果免疫荧光实验证明,适配子OC-10-19和OC-10-36能够特异识别卵巢浆液性乳头状囊腺癌,且OC-10-36还能够对早期的不典型增生进行识别,另2条适配子OC-10-10和OC-10-37仅识别个别的卵巢浆液性囊腺癌。结论成功筛选获得识别不同类型卵巢癌组织的特异适配子,为适配子用于不同病理类型标志物的鉴定、临床辅助诊断等提供了理论基础。
- 王玮丁红梅李慧李洁夏伟邵宁生李少华
- 关键词：卵巢肿瘤适配子病理类型
- 高效快速提取股骨头中总RNA的方法被引量：1
- 2011年
- 背景:从骨组织中有效提取总RNA是进行骨科相关实验的基础,目前所知方法的提取效果不理想。目的:探寻一种高效、快速的骨组织总RNA提取方法。方法:取健康大耳白兔股骨头迅速置于用液氮预冷过的研钵中,液氮中反复研磨至粉末状,再将其移至预冷的匀浆器内,加入Trizol,充分匀浆后4℃离心,取上清,加入氯仿离心,使RNA与细胞DNA、蛋白质及其他成分分离从而得到总RNA。另取兔股骨头,按传统方法取材后保存,无匀浆过程,传统Trizol法提取总RNA作为对照。紫外分光光度计测定RNA样品浓度、纯度及产率。甲醛变性胶电泳观察RNA的28S,18S条带是否清晰,有无降解和DNA污染。结果与结论:实验方法提取的总RNA浓度在0.80～0.90g/L,A260/A280在1.90～2.00之间,A260/A230在1.4～1.6之间,明显高于传统方法提取的RNA各指标,说明实验方法提取的总RNA纯度高,无DNA、蛋白质污染。甲醛变性胶电泳可清晰显示28S,18S两条带,大体观察其比例大约为1:1,证实RNA提取完整,没有降解。由此可见,实验方法提取的骨组织总RNA质量高,提取方法方便、快捷,可用于骨组织分子生物学研究。
- 柳铭李章华陈颖王芳夏伟陈友浩潘峰
- 关键词：股骨头抽提总RNA
- Mir-200b抑制膀胱癌细胞T24的迁移被引量：1
- 2010年
- 目的在膀胱癌细胞系中过表达mir-200b,观察其对T24细胞迁移能力的影响,并检测WASF-3表达水平的改变。方法将mir-200b mimic,WASF-3 siRNA及阴性对照分别转染T24细胞,通过qPCR及Western印迹实验检测WASF-3表达水平的改变;利用Transwell实验检测转染后T24细胞迁移能力的改变。结果转染mir-200b及WASF-3 siRNA后WASF-3在mRNA及蛋白水平上均有明显下降,同时细胞迁移能力亦有明显下降。结论mir-200b能够通过改变WASF-3的表达水平抑制膀胱癌细胞系T24的迁移能力,为进一步探索miRNA在膀胱癌发生发展过程中的作用提供了研究基础。
- 夏伟宋涛李洁陈留存李少华丁红梅王芳邵宁生
- 关键词：微小RNA膀胱肿瘤T24
- 一种热稳定人角质细胞生长因子突变体的制备方法及其应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及以核苷酸定点突变方法对人角质细胞生长因子(KGF-2)一级结构单个氨基酸的置换，即将KGF-2第100位的赖氨酸的编码序列AAG突变为精氨酸编码序列AGG，通过构建原核表达载体pBV220-h...
- 邵宁生孙卫国刘农乐王芳李少华赵强李洁丁红梅夏伟
- 文献传递
- 不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基的筛选和鉴定被引量：4
- 2013年
- 目的筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基并对其进行鉴定。方法利用完整细胞为靶子的消减SELEX技术筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基,通过放射性同位素、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structue分析软件分析配基的一、二级结构并对筛选得到的配基进行鉴定。结果经过9轮消减SELEX筛选,放射性同位素检测文库已富集;流式细胞术检测经过测序和分析得到12条配基中的H1、H16、H4、L1、L10和H19与高致龋变形链球菌临床分离株特异结合,不与低致龋变形链球菌临床分离株特异结合,其中,H19的特异性结合程度最强,解离常数为69.45±38.53 nmol/L。结论筛选获得特异识别高致龋变形链球菌临床分离株的ssDNA配基。
- 王成龙胡丹阳刘佼佼李少华苏东华席庆储冰峰夏伟赵强丁红梅罗燕萍杨继勇邓斌徐娟邵宁生
- 关键词：变形链球菌配基
- LncRNA-GAS5抑制miR-21介导的非完全匹配靶mRNA降解被引量：13
- 2017年
- LncRNA-GAS5作为miR-21的"分子海绵",通过"吸收"miR-21从而调控miR-21对靶基因的抑制.此外,miR-21直接调控非完全匹配靶基因PTEN和TPM1的表达.我们首先在HEK293T和HeLa细胞中确认,miR-21通过碱基互补配对调控非完全匹配靶基因PTEN和TPM1的蛋白表达,但不影响PTEN和TPM1mRNA的水平.此外,过表达miR-21后,qRT-PCR检测PTEN和TPM1mRNA的半衰期,发现它们的半衰期显著缩短,miR-21加速PTEN和TPM1mRNA的降解.通过转染lncRNA-GAS5的过表达质粒,发现lncRNA-GAS5竞争性地与miR-21结合能够延长PTEN和TPM1mRNA的半衰期,而miR-21与lncRNA-GAS5碱基互补配对结合后,又对lncRNA-GAS5存在调节作用,减弱lncRNA-GAS5的稳定性并加速lncRNA-GAS5的降解.LncRNA-GAS5作为miR-21的"分子海绵"能够抑制miR-21对非完全匹配靶mRNAPTEN和TPM1的降解,同时,miR-21与lncRNA-GAS5结合后又存在对lncRNA-GAS5的反馈调节,这些相互作用机制的发现有助于了解lncRNA、miRNA、mRNA之间这个复杂又精细的调控环路.
- 郑伟董洁李少华丁红梅李慧黄皑雪夏伟白琛俊郭晓华李达耿介李洁邵宁生
- 关键词：MIR-21PTEN
