张海
- 作品数：139 被引量：402H指数：10
- 供职机构：第四军医大学实验动物中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学一般工业技术更多>>
- 缺血后处理及川芎嗪对大鼠肾缺血再灌注氧自由基的影响被引量：13
- 2008年
- 目的:探讨缺血后处理及川芎嗪对大鼠肾缺血再灌注氧自由基的影响.方法:成年雌性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只,分别为:假手术对照组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、川芎嗪治疗组(I/R+T组)和缺血后处理组(IPO组).各组动物于再灌注24h时取血,检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),同时留取肾组织进行匀浆,测定匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(TAC).结果:与I/R组大鼠相比,I/R+T组和IPO组大鼠的BUN和Cr均下降(P<0.01),SOD升高(P<0.01),MDA下降(P<0.01),CAT升高(P<0.05),TAC升高(P<0.01);与I/R+T组大鼠相比,IPO组大鼠的BUN,Cr,SOD,MDA,CAT和TAC均无统计学差异(P>0.05).结论:缺血后处理能够抑制肾脏缺血再灌注损伤后氧自由基的过度生成,对缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其保护效应与川芎嗪治疗无明显差异.
- 刘广厚王汉民李苏童李嫚张海张鹏
- 关键词：缺血后处理再灌注损伤川芎嗪
- 表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力被引量：1
- 2012年
- 目的:测定表达肝素结合血凝素(HBHA)和人白细胞介素12(hIL-12)融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内诱导产生的免疫应答及对结核分枝杆菌感染的保护作用。方法:将表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌采用同源加强免疫的方法免疫小鼠,检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2和IL-12的表达水平;用结核分枝杆菌感染免疫小鼠,检测小鼠肺部荷菌量和组织病理变化。结果:表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌诱导小鼠产生以IFN-γ、IL-2分泌量增加为主的Th1型免疫应答,并能有效减少感染小鼠肺部结核分枝杆菌的荷菌量和病理损伤。结论:表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌免疫小鼠可诱导产生与卡介苗相当的保护作用,可能成为控制结核病的有效疫苗。
- 赵善民赵勇张彩勤毛峰峰白冰张海师长宏徐志凯
- 关键词：耻垢分枝杆菌肝素结合血凝素人白细胞介素12保护力
- 抗MTB FurB单克隆抗体制备及特性分析
- 2007年
- 目的制备针对结核分支杆菌FurB蛋白的单克隆抗体(mAb)并分析其特性。方法利用纯化的FurB蛋白,采用腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜和腹腔内注射FurB的方法免疫小鼠,然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb,用Western-blot鉴定其特异性,用ELISA法初步分析其特异性位点和相对亲和力。结果获得3株抗FurB mAb,分别为DD12、BH1和DH8,经Western-blot分析都可与FurB蛋白特异性结合。三株mAb中DH8效价最高达到10-10,相对亲和力,BH1>DH8>DD12,3株mAb的抗原表位相近。结论获得的抗FurB mAb效价高、特异性强,可以作为进一步研究FurB功能和作用的有效工具。
- 姜泓高雪李元张海徐志凯薛莹
- 关键词：分枝杆菌结核单克隆抗体
- 空调净化实验动物设施节能设计的探讨
- 通过标准化实验动物设施设计、施工、运行的实践,摸索并总结了一些关于空调净化实验动物设施节能设计的经验,并初步提出了一个简便易行的节能设计方案.
- 李秦李六斤扬贵忠张海师长宏施新猷娄清林
- 关键词：洁净室节能
- 文献传递
- 猴/人免疫缺陷嵌合病毒(SHIV)的研究进展被引量：2
- 2001年
- SHIV是在 SIV其因组框架的基础上利用基因重组技术以 HIV部分基因片段来取代 SIV相应基因而构建的一种重组病毒。SHIV与亲本株病毒有相似的生物学特性 ,能在 CD+ 4细胞、PBMCs、巨噬细胞中复制 ,并能引起猴发生 AIDS症状。另外 SHIV能诱使机体产生中和抗体 ,可以作为侯选疫苗株 ,在 AIDS预防中有广阔的前景。
- 张海李六金沈荣显
- 关键词：生物学特性免疫
- 狂犬病毒3aG株糖蛋白基因克隆及真核表达载体的构建被引量：1
- 2000年
- 目的 构建含狂犬病毒 3a G株糖蛋白的重组质粒p CI- neorab G,为进一步表达及 DNA免疫做准备 .方法 从感染了狂犬病毒 3a G株的鼠脑组织中提取总 RNA进行 RT-PCR,扩增出编码糖蛋白的基因片段 ,重组入 p UC19克隆载体 .再将 p UC19rab G中的糖蛋白基因片段亚克隆入 p CI- neo真核表达载体 .结果 从 3a G株基因组中扩增出特异的糖蛋白基因片段 ,克隆成功 p UC19rab G;经亚克隆 ,筛选鉴定获得了 p CI- neorab G 重组质粒 .结论 构建成功狂犬病毒p U C19rab G重组质粒 ,亚克隆成功 p CI- neorab G重组质粒 ,为下一步表达及
- 张海李六金施新猷娄清林李秦姜焕宏赵世君
- 关键词：狂犬病毒RT-PCR糖蛋白基因克隆
- 人源化小鼠应用现状与存在问题分析
- 人源化小鼠是生物医学研究的良好动物模型,因其携带有人组织/器官可在动物体内重建人免疫系统或肝脏系统,用其构建人类疾病动物模型可产生人种属特异性病理、生理性反应.自人源化小鼠产生以来,在生物医学研究领域得到广泛应用,并取得...
- 张彩勤赵勇张海
- 关键词：生物医学胚胎干细胞移植诱导多功能干细胞
- GANT61通过自噬性细胞死亡抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖被引量：3
- 2017年
- 目的观察Hedgehog通路抑制剂GANT61对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用。方法 GANT61作用MCF-7细胞后,通过流式细胞术检测细胞死亡;提取处理细胞总RNA和蛋白。分别采用Real-time PCR和Western blot检测Hedgehog通路SHH、Gli1、Gli2及自噬标志物LC3-Ⅱ表达;处理细胞固定后通过电子显微镜观察GANT61诱导的自噬体形态;自噬抑制剂3-MA处理细胞或自噬相关基因atg5 siRNA转染细胞后再用GANT61作用,流式细胞术检测细胞死亡数量。结果 GANT61能明显诱导MCF-7死亡,降低Hedgehog通路SHH、Gli1、Gli2表达水平,提高LC3-Ⅱ蛋白表达,并可诱导MCF-7细胞产生自噬体。3-MA及atg5 siRNA可减弱GANT61诱导的细胞死亡。结论 GANT61通过诱导自噬性细胞死亡机制发挥抗乳腺癌细胞活性。
- 宋扬刘佩娟辛智倩张波赵勇张彩勤白冰师长宏张海
- 关键词：自噬性细胞死亡乳腺癌MCF-7细胞
- 结核杆菌Hsp65与人IL-2融合蛋白在耻垢杆菌表达
- 2011年
- 目的:构建能够分泌表达结核分枝杆菌热休克蛋白65(Hsp65)与人IL-2融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌(recombinant Mycobacterium Smegmatis,rMs)。方法:用EcoRⅤ和HindⅢ双酶切含Hsp65-IL-2融合基因的pPRO-hsp65-IL-2载体,回收目的基因片断Hsp65-IL-2,并将其亚克隆入同样双酶切的大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭分泌表达载体pDE22中。重组质粒pDE22-hsp65-IL-2酶切鉴定正确后,电穿孔转化MS感受态,潮霉素抗性压力筛选阳性rMs。Western-blot鉴定rMs培养上清蛋白中目的蛋白的表达。结果:重组pDE22-hsp65-IL-2质粒酶切后可获得约2000 bp片段,与预期大小一致。Western-blot结果表明,rMs培养上清蛋白中有特异性反应条带,大小为78kD,与Hsp65-IL-2融合蛋白大小相一致。结论:成功构建了大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭分泌表达载体pDE22-hsp65-IL-2,为该rMs的免疫学特性及抗结核分枝杆菌感染的保护效果研究奠定了基础。
- 王丽梅师长宏柏银兰张海康健张薇徐志凯
- 关键词：结核分枝杆菌HSP65耻垢分枝杆菌
- 结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp16.3及其合成肽在小鼠体内诱导的免疫应答
- 2008年
- 目的比较结核分枝杆菌Hsp16.3和Hsp16.3合成肽在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法80只BALB/c小鼠随机分5组共免疫3次,间隔2周。分别于0、2、4、6、8周采集血液,ELISA法检测在抗原Hsp16.3和Hsp16.3合成肽包被时血清中的抗体浓度及第8周时血清中的抗体滴度。末次免疫完成后4周,取每组8只免疫小鼠分离脾淋巴细胞,用Hsp16.3和Hsp16.3合成肽分别刺激后,MTT法测定脾淋巴细胞的增殖指数,夹心ELISA法检测同样抗原刺激下脾淋巴细胞诱生的IFN-γ水平。每组剩余小鼠用H37Rv毒株攻击,4周后取小鼠脾脏分离脾淋巴细胞,倍比稀释后涂平板,3周后计数CFU。结果抗Hsp16.3和Hsp16.3合成肽的抗体在免疫的前4周均增长迅速,而后趋于缓和。Hsp16.3/DDA/MPL、Hsp16.3合成肽/DDA/MPL、Hsp16.3合成肽/FIA、BCG组和生理盐水组在第8周时抗Hsp16.3的抗体滴度分别为1:3000、1:1500、1:1500、1:500和1:100,抗Hsp16.3合成肽的抗体滴度分别为1:2000、1:2000、1:1000、1:500和1:100;在Hsp16.3和其合成肽的刺激下,各组平均刺激指数分别为(3.13±0.18)和(2.895±0.13)、(3.21±0.21)和(3.54±0.2)、(2.395±0.15)和(3.125±0.12),(1.67±0.12)和(1.93±0.14),(1.04±0.09)和(1.16±0.08);在同样抗原刺激下,各组诱生的IFN-γ水平分别为(182.43±6.01)pg/mL和(182.43±8.67)pg/mL、(193.522±9.26)pg/mL和(198.915±6.16)pg/mL、(179.135±7.83)pg/mL和(188.32±5.13)pg/mL,(274.56±10.26)pg/mL和(283.47±6.19)pg/mL,(71.14±3.34)pg/mL和(72.91±2.45)pg/mL;各组脾脏的荷菌数分别为(6.74±0.14)、(6.60±0.13)、(6.81±0.28)、(5.95±0.17)和(7.82±0.21)。结论二者在免疫学特性方面各有优势,提示Hsp16.3和Hsp16.3合成肽均有望成为TB疫苗的候选组分。
- 张廷芬师长宏朱德生张海赵勇岳晨莉赵雷刘建利
- 关键词：结核分枝杆菌HSP16.3亚单位疫苗
